Printer Friendly

Viabilidad y germinacion de semillas de Hechtia perotensis (Bromeliaceae).

Mexico se encuentra entre las regiones biogeograficas neotropicales, y debido a su riqueza de especies y endemismos excepcionales (Sarukhan, Halffter, & Koleff, 2009) es considerado un pais megadiverso y ocupa el cuarto lugar en el mundo por la diversidad de plantas vasculares que posee (Llorente-Bousquets & Ocegueda, 2008). Entre las especies de plantas que habitan Mexico se reconocen cuatro categorias de distribucion: las endemicas de Mexico, las endemicas de Megamexico I (especies que se distribuyen en Mexico y el suroeste de EE.UU.), las endemicas de Megamexico II (desde Mexico hasta la depresion central de Nicaragua) y las de Megamexico III (desde el suroeste de EE.UU., hasta la depresion central de Nicaragua) (Rzedowski, 1991).

La recoleccion de semillas de buena calidad permite su uso en conservacion, investigacion y restauracion ecologica. La semilla es almacen de la diversidad genetica de la poblacion original. La germinacion de las semillas de especies silvestres y endemicas es especialmente importante ya que esa transicion sucede en las etapas tempranas de vida y establece el contexto para el desarrollo posterior; ademas, la extension de los nichos de germinacion, repercute en la amplitud ecologica y la distribucion geografica, asi como en la seleccion natural de la especie (Baskin & Baskin, 2008; El-Maarouf-Bouteau & Bailly, 2008).

El genero Hechtia Klotzsch (1835:401) es un miembro de la familia Bromeliaceae y es el unico de la subfamilia Hechtioideae (Givnish, Millam, Berry, & Sytsma, 2007). De acuerdo con Ramirez M., Jimenez, FernandezConcha, y Pinzon (2014) Mexico alberga el mayor numero de especies de este genero, con aproximadamente 94 % de ellas endemicas del pais, que en su conjunto esta restringido a Megamexico III, que el numero de especies se estima en 65, pero esta variando rapidamente por el descubrimiento frecuente de especies nuevas y senalan que este genero es uno de los integrantes mas interesantes de las Bromelias mexicanas. Las poblaciones de Hechtia crecen principalmente en regiones aridas y semiaridas y en algunos casos forman matorrales rosetofilos extensos (Ramirez et al., 2014).

Especificamente, H. perotensis I. Ramirez & Martinez-Correa se ha localizado en los estados de Puebla y Veracruz, Mexico, donde crece en matorrales xerofilos en una franja altitudinal estrecha de 2 400 a 2 500 msnm. El epiteto especifico hace referencia a una de las areas en las cuales crece la especie, que es el Valle de Perote en Veracruz. Las plantas de H. perotensis se han descrito como hierbas arrosetadas, terrestres, de hasta 2 m de altura cuando tienen flor; las rosetas son globosas, compactas y densamente cespitosas, y pueden alcanzar 50 cm de altura y 40 cm de diametro. En una colonia puede haber 50 o mas rosetas acaules o con tallos inconspicuos (Espejo-Serna, Lopez-Ferrari, Ramirez-Morillo, & Martinez-Correa, 2007). Las semillas son de color pardo claro, fusiformes, ligeramente rugosas, oblongas, elipsoidales o fusiformes, circumaladas, con una ala extendiendose en dos caudas terminales de alrededor de 1 mm de ancho y 3 mm de longitud.

La biologia de las semillas de Hechtia se conoce poco (Espejo-Serna et al., 2007) y la informacion es escasa en la literatura especializada actual, probablemente debido a su importancia limitada para los humanos. Entre las excepciones, estan las descripciones morfologicas de las semillas de H. nuusaviorum (Espejo-Serna et al., 2007) y H. confusa (Montes R., 2013); la evaluacion de la germinacion de las semillas de H. confusa y H. tehuacana en placas con agar, su fotoblastismo, reaccion al estres hidrico y al potencial osmotico del medio (Montes R., 2013); Escobedo (2012) utilizo semillas de H. schottii Baker en germinacion para evidenciar la presencia de dos alas reducidas. Reyes (2015) senalo que las semillas del genero Hechtia han sido utiles para la restauracion ecologica por su resistencia a la sequia extrema y muchas de ellas tienen importancia ornamental; aunque el autor no especifico cuales especies se recomiendan por su mejor capacidad germinativa. El conocimiento de esta ultima podria aportar informacion sobre la permanencia de las especies endemicas in situ, favorecer la conservacion ex situ y los protocolos de produccion de plantas (Toledo & Wolf, 2008; Pereira, Andrade, Pereira, Forzza, & Rodriguez, 2010). La germinacion ex situ es una opcion para la propagacion de especies con valor comercial y para su preservacion y conservacion de las que forman parte de la riqueza floristica de Mexico, ademas de ser un instrumento para facilitar el estudio de sus procesos ecologicos y fisiologicos.

Los promotores para la germinacion son compuestos quimicos que se utilizan para iniciar o incrementar la capacidad germinativa de semillas. El acido giberelico (A[G.sup.3]) aplicado exogenamente es efectivo en el control y activacion de la germinacion de semillas debido a su habilidad de interrumpir estados de latencia y reemplazar estimulos ambientales, como los de la luz, la temperatura o de ambas. Por esto, A[G.sup.3] incremento los porcentajes de germinacion y disminuyo el tiempo para su inicio en semillas de diferentes especies, como Ferocactus acanthodes, F. wislizeni (Deno, 1994), Albizia spp. (Tigabu & Oden, 2001), Capsicum annuum var. glabriusculum (Dunal) Heiser & Pickersgill (Garcia, Montes, Rangel, Garcia, & Mendoza, 2010) y Jaltomata procumbens (Cav.) J. L. Gentry (Saldivar-Iglesias, LagunaCerda, Gutierrez-Rodriguez, & DominguezGalindo, 2010). El nitrato de potasio (KN[O.sup.3]) se usa para disminuir la latencia y promover la germinacion de las semillas (Siadat, Moosavi, Zadeh, Fotouhi, & Zirezadeh, 2011). Zheng et al. (2009) senalaron que los compuestos con N pueden aumentar la germinacion por ajuste de la tasa de intercambio K+/Na+ e incremento de la actividad de la amilasa, produccion de ATP, y respiracion de las semillas.

Por su parte, la prueba de tetrazolio (cloruro de 2, 3, 5-trifenil-2H-tetrazolio) permite estimar la viabilidad de las semillas (International Seed Testing Association, 2010). El protocolo adecuado varia entre las especies y recolectas; no todas las semillas responden igual a la prueba, ya que se basa en la actividad de las deshidrogenasas de la respiracion que reducen quimicamente la solucion incolora de tetrazolio a formazan (1, 3, 5-trifenilformazan), de color rojo-rosado (Glenner, 1990); de esta manera, es posible identificar tejido vivo (coloracion roja), parcialmente danado (tonalidades rosadas) o muerto (blanco) (International Seed Testing Association, 2010).

El objetivo de este estudio fue conocer el tamano y biomasa de las capsulas y semillas, y la germinacion y viabilidad de las semillas de H. perotensis recolectadas en Veracruz, Mexico, durante los anos 2012 y 2015. La hipotesis fue que la germinacion y la viabilidad de las semillas de H. perotensis son independientes del ano de recolecta, que su germinacion incrementa con el pretratamiento con KN[O.sup.3] o A[G.sup.3], y que al menos una concentracion de tetrazolio es adecuada para identificar su viabilidad.

MATERIALES Y METODOS

Sitio de muestreo: Capsulas de H. perotensis se recolectaron en septiembre 2012 y marzo 2015 de plantas de la region de Frijol Colorado, municipio de Perote, Veracruz, Mexico (19[grados]32'13.95" N, 97[grados]22'98" O, 2 416 msnm; geolocalizacion con Garmin eTrex 10 y Google Earth[R]). El clima de la region de acuerdo con el sistema de clasificacion climatica de Koppen, modificado por Garcia (1988), es semiarido, templado con veranos calidos BS1kw(i')gw", con temperatura media mensual de 9.8 [grados]C en los meses mas frios, y 15.1 [grados]C en los mas calidos; con una precipitacion media mensual entre 11.2 mm en el mes mas seco y 133.7 mm en el mes mas humedo. La vegetacion del sitio de recolecta corresponde a un matorral xerofilo, tambien llamado izotal (Yuccapericulosa, Y. filifera y otras); el estrato arboreo fue escaso y estuvo constituido por Nolina Michx., Yuca sp. y Dasylirion Zucc., en algunas zonas hubo arboles bajos, de menos de 5 m de altura, y esporadicos, pertenecientes a de los generos Juniperus, Quercus y Pinus. En el sitio, las plantas de H. perotensis convivian con Agave horrida subsp. Perotensis B. Ulrich, D. acrotriche (Schiede) Zucc., Tillandsia erubescens Schltdl., T. recurvata (L.) L., N. parviflora (Kunth) Hemsl., Juniperus L. Q. microphylla Nee, P. cembroides Zucc., Echeveria subalpina E. Walther, Salvia L., Lupinus L., Ephedra L., Sedum batesii L., Mammillaria magnimamma Haw., Coryphantha pallida (Engelm.) Lem., Cylindropuntia pallida (Engelm.) F.M. Knuth, Baccharis L., y algunas otras.

Peso y tamano de las capsulas y las semillas: Las capsulas recolectadas se mantuvieron en refrigeracion dos o tres semanas antes de su caracterizacion. La biomasa de 50 capsulas se determino en una balanza analitica ([+ o -] 0.0001 g; Scientech SA 120), su longitud y diametro se midieron con un vernier digital ([+ o -] 0.001 mm; Mitutoyo). Las semillas de 150 capsulas se contabilizaron, su biomasa se obtuvo en balanza analitica, y su longitud y anchura se midieron con vernier digital y microscopio estereoscopico.

Prueba de germinacion con y sin nitrato de potasio y acido giberelico como promotores de la germinacion: Despues de dos o tres semanas de las recolectas de cada ano por separado, se realizaron las evaluaciones de germinacion con seis repeticiones de cien semillas por tratamiento. Las semillas se desinfectaron externamente por inmersion en hipoclorito de sodio comercial (60 g/L de Cl activo) al 1 % (v:v en agua), se enjugaron con agua destilada abundante y se depositaron en cajas Petri con papel filtro, humedecido con 20 mL de agua destilada (testigo), KN[O.sup.3] (99 %; FERMONT[R]) al 0.2 % (p:v en agua), o A[G.sup.3] (90 %; SIGMA[R]) 500 mg/L. Las cajas se colocaron en una camara con ambiente controlado (Thermo Scientific. EE.UU.; modelo 846) a 25 [+ o -] 1 [grados]C y fotoperiodo 12x12 h (12 [micro]mol/m/s de irradiancia) (Sosa, Chavez, Mondragon, Estrada & Ramirez, 2012). Las semillas se consideraron germinadas cuando el hipocotilo expuesto habia alcanzado mas de 1 mm, se contabilizaron a los 8 d de establecido el ensayo y despues de 15 d se obtuvo la germinacion total (Montes R., 2013 observo que en ocho dias, H. confusa alcanzo su germinacion maxima) y el numero de plantulas normales (sin deformaciones en las hojas) y anormales (plantulas con deformaciones en la primera hoja (International Seed Testing Association, 2010).

Prueba con tetrazolio: Las soluciones al 0.1, 0.5 y 1.0 % de 2, 3, 5 cloruro de trifenil tetrazolio (SIGMA-ALDRICH[R]), las temperaturas y el tiempo de incubacion de las semillas en la soluciones de tetrazolio se adaptaron segun las recomendaciones para la prueba bioquimica de viabilidad por tetrazolio descritas en las reglas internacionales de analisis de semillas (International Seed Testing Association, 2010). Cada tratamiento incluyo seis repeticiones y cada repeticion se conformo de 25 semillas; asi, el total de las semillas evaluadas en esta prueba fue 150 por tratamiento. Todas las semillas se preacondicionaron durante una noche (16 h) a 20 [+ o -] 1 [grados]C en rollos de papel absorbente (Scott Brand, Kimberly Clark) humedecido con agua. Luego, para propiciar la penetracion de la solucion de tetrazolio en los tejidos seminales, se realizo un corte horizontal arriba del embrion, con un bisturi con filo recto. Al realizar el corte, se cuido de no danar el embrion, y para esto se utilizo un microscopio estereoscopico (Leica EZ4 HD) (International Seed Testing Association, 2010).

Las semillas acondicionadas se colocaron en recipientes plasticos con tapa y se cubrieron con suficiente volumen de cada una de las soluciones de tetrazolio. Las muestras se mantuvieron en oscuridad, a 30 [+ o -] 1 [grados]C, por 16 h. Luego, las semillas se enjuagaron con agua destilada y los embriones se extrajeron raspando delicadamente la parte opuesta al corte horizontal que se realizo antes y empujando el embrion cuidadosamente con la punta de un bisturi; asi, se obtuvieron los embriones completos. Los embriones se evaluaron y clasificaron en una de las clases de acuerdo con la "International Seed Testing Association" (2010).

Efecto de algunos factores ambientales en las caracteristicas fisiologicas de las semillas: Con la finalidad de analizar el posible efecto de la temperatura, precipitacion e irradiancia en las caracteristicas fisiologicas de las semillas evaluadas, se obtuvo la informacion del clima de la region, entre 2011 y 2015, de la estacion meteorologica Perote, del Laboratorio Nacional de Modelaje y Sensores Remotos del Campo Experimental Pabellon, del Instituto Nacional de Investigadores Forestales, Agricolas y Pecuarias, Mexico. Con los datos de precipitacion y temperatura de los 12 meses previos a cada recolecta se elaboraron los climogramas de acuerdo con lo descrito por Garcia (1988) y los datos de irradiancia se compararon entre los anos con la prueba de t de Student.

Diseno experimental y analisis de resultados: Un diseno completamente al azar se utilizo para evaluar la germinacion con tres tratamientos, un testigo, KN[O.sup.3] (0.2 %) y A[G.sup.3] (500 mg/L). Seis repeticiones por tratamiento fueron incluidas con 100 semillas cada una; asi, un total de 600 semillas fueron evaluadas en esta prueba. El analisis de normalidad se efectuo con la prueba Shapiro-Wilks; estas fueron analizados con ANDEVA, con la prueba de comparacion multiple de medias de Tukey ([alpha] = 0.05) y con la prueba de t de Student.

La prueba de tetrazolio se manejo con un diseno completamente al azar, con tres concentraciones, o tratamientos de tetrazolio (0.2, 0.5 y 1.0 %). Cada tratamiento incluyo seis repeticiones y en cada repeticion se evaluaron 25 semillas; asi, en esta prueba en total se evaluaron 150 semillas por tratamiento. Los resultados de las semillas con embriones viables, no viables, con vigor bajo y sin embrion fueron analizados mediante analisis de varianza, y la prueba de comparacion multiple de medias de Tukey (a = 0.05).

RESULTADOS

En promedio no hubo diferencias significativas en el tamano de las capsulas recolectadas en 2012 y 2015, ni en el numero de semillas que contenian (p > 0.05). La longitud promedio de las capsulas fue cerca del doble de su diametro y la biomasa de las semillas (45 mg) por capsula represento 38 % de la biomasa total de las capsulas. El coeficiente de variacion confirmo la homogeneidad relativa entre las dimensiones, biomasa y numero de semillas en las capsulas de ambas recolectas (Cuadro 1). En contraste con la homogeneidad de las capsulas, las semillas fueron parcialmente diferentes en sus dimensiones entre las recolectas. Las de 2015 fueron 17 % mas anchas que las de 2012 (p [menor que o igual a] 0.05), pero su longitud fue la misma (p > 0.05); ademas, como resultado de su dimension mayor, esas semillas pesaron 15 % mas que las de 2012 (Cuadro 1).

La diferencia en la proporcion de semillas que germino fue altamente significativa (p [menor que o igual a] 0.001) entre los anos de recolecta. Para las muestras de 2012, la proporcion de semillas que germino y origino plantulas normales fue significativa (p [menor que o igual a] 0.05); pues represento solo 25 % de las que germinaron en la segunda recolecta (Testigo Fig. 1A y Fig. IB).

Los promotores de la germinacion no modificaron estadisticamente (p > 0.05) la proporcion de semillas germinadas ni la cantidad de plantulas normales respecto al testigo de ninguna de las recolectas (Fig. 1 Ay Fig. IB).

La proporcion de plantulas anormales no fue significativamente diferente (p > 0.05) entre las recolectas (Fig. 1A y Fig. IB). En la recolecta de 2012 la proporcion de esas plantulas fluctuo entre 0.33 y 2.50 % entre los tratamientos, y fue cerca de 20 veces menor a la proporcion de plantulas normales, independientemente de la presencia o ausencia de los promotores de la germinacion; pero. en promedio, el testigo presento el porcentaje menor de ellas en comparacion con los otros dos tratamientos (Fig. 1A). En la recolecta de 2015 no se observaron plantulas anormales en ninguno de los tratamientos (Fig. IB).

La proporcion de semillas que no germinaron fue significativamente diferente (p [menor que o igual a] 0.004) entre los anos de recolecta, pero no existio diferencia significativa (p > 0.05) entre el testigo y los tratamientos con los promotores del crecimiento para cada recolecta (Fig. 1A y Fig. IB). En la recolecta de 2012, dos tercios de la muestra no germino en el tiempo de evaluacion; y represento 4.5 veces la cantidad de semillas germinadas de la muestra de ese ano (Fig. 1A). En contraste, en la muestra del ano 2015, la proporcion de semillas que no germino fue poco menor de 10 % (Fig. IB).

Para conocer si la proporcion de semillas no germinadas se debia a dano fisiologico del embrion o a embriones latentes, su viabilidad se cuantifico con la prueba de tetrazolio. En esta prueba fue indispensable que el corte en la testa de la semilla, previo al contacto con la solucion de tetrazolio, se hiciera sin danar el embrion; por lo que, para lograr lo anterior en semillas de H. perotensis con longitud menor a 4 mm, fue indispensable cierta habilidad del evaluador. En este estudio, la prueba de tetrazolio permitio clasificar a las semillas de la recolecta del ano 2012, en cuatro tipos segun el color que adquirieron los embriones, que fueron: 1) semillas vigorosas, con embrion color rojo intenso en el tejido sano y, teoricamente, permeabilidad optima de las membranas celulares; 2) semillas fisiologicamente sanas, en ellas los embriones se tineron con una coloracion rosa y la solucion de tetrazolio penetro lenta y uniformemente traves las membranas celulares de sus tejidos; 3) semillas parcialmente danadas o en proceso de deterioro, lesionadas o fisiologicamente envejecidas, con embriones tenidos de color rosa palido y con zonas amplias no pigmentadas; y 4) semillas muertas, sin alguna tonalidad rojo-rosa, color blanco mate en el embrion completo. La clase 3 fue notablemente escasa en las semillas recolectadas en 2012 y no se presento en las de 2015; esos embriones pigmentados parcialmente se contabilizaron como embriones muertos, de la clase 4. Asi, los resultados de esta prueba permitio contabilizar, por diferencia de la muestra total, las semillas sin embrion o abortadas (Fig. 1C y Fig. ID).

Ademas de conocer la capacidad germinativa de las semillas, basada en la presencia de embriones vivos, danados o muertos (Fig. 1A y Fig. IB) los resultados de la prueba con tetrazolio pueden relacionarse con los de la prueba de germinacion estandar en laboratorio (Fig. 1C y Fig. ID).

En la recolecta de 2012, la proporcion de las semillas no fue significativamente diferente (p > 0.05) entre las clases (sin embrion, o con embrion no viable, con viabilidad baja o completamente viable). Este resultado fue independiente de la concentracion de tetrazolio utilizada en la prueba. Por lo que, en promedio 36 % de las semillas de la muestra tenian embrion viable, que al germinar podria haber expuesto las plantulas respectivas normales, ademas una proporcion menor que 9 % de la muestra, podrian haber germinado tambien en presencia de los promotores de la germinacion. Asimismo, la muestra tambien incluyo una cantidad de semillas sin embrion, cercanamente similar a la de las semillas viables (Fig. 1C).

En contraste con las semillas recolectadas en 2012, en la recolecta de 2015 la proporcion de las semillas fue significativamente diferente entre las clases (p < 0.05), y este resultado fue independiente de la concentracion de tetrazolio utilizada en la prueba. Asi, esta ultima recolecta presento en promedio 97.3 % de semillas con embrion viable, pero 10 % de ellas mostro viabilidad baja. Ademas, la muestra tambien incluyo proporciones significativamente menores de semillas sin embrion (2.67 %), y aquellas con embrion no viable estuvieron practicamente ausentes (0.17 %) (Fig. ID). Ya que, la prueba de tetrazolio indico que 36 % de las semillas de la muestra era viable y la prueba estandar de germinacion mostro unicamente 22 % de germinacion se deduce que la muestra recolectada en 2012 contenia cerca de 14 % de semillas latentes.

Los factores ambientales, como la precipitacion, la temperatura y la irradiancia, afectan la planta madre y la calidad de las semillas en desarrollo, lo que repercute en la capacidad germinativa de las semillas. Estos tres factores fluctuaron con tendencias diferentes en los meses previos a las recolectas de ambos anos (Fig. 2A, Fig. 2B y Fig. 2C). En los 12 meses previos a la recolecta de 2012, la precipitacion promedio mensual fluctuo entre 0.11 y 7.52 mm; en contraste, en el caso de la recolecta de 2015, la fluctuacion fue de 0.59 a 3.16 (Fig. 2A y Fig. 2B). En el caso de la precipitacion, las fluctuaciones de la temperatura tambien fueron amplias y con patrones diferentes. Previo a la primera recolecta, las temperaturas promedio mensuales fluctuaron entre cerca de cero grados y 23 [grados]C, y los valores superiores a 20 [grados]C se presentaron por seis meses (Fig. 2A). En contraste, antes de la segunda recolecta, las temperaturas promedio mensuales mostraron otras tendencias y medias mensuales maximas con fluctuacion entre 15.8 y 25 [grados]C (Fig. 2B). La radiacion promedio global de los 12 meses previos a las recolectas (483 y 467 w/[m.sup.2] en el 2012 y 2015) no fueron estadisticamente diferentes entre los anos (p = 0.438), pero los maximos y minimos se presentaron en periodos diferentes. Las diferencias mas sobresalientes se observaron en los meses 2, 4, 6 y 9; en los primeros la radiacion global del 2012 fue 18 % menor que la del 2015, y en el segundo periodo en 2015, la radiacion global fue 25 % menor que en el 2012 (Fig. 2C).

DISCUSION

Las semillas de H. perotensis evaluadas en este estudio fueron similares en color, longitud y anchura independientemente de la fechas de recolecta, pero provenientes de la misma localidad Perote, Veracruz, Mexico. Ademas, esos atributos seminales coincidieron con los descritos por otros investigadores en las semillas de otra localidad (Aljojuca, Puebla, Mexico; km 15 carretera federal San Salvador El SecoEsperanza, 19[grados]05'33" N - 97[grados]32'17" W, 2 500 msmn) y fechas (Espejo-Serna et al., 2007). Los resultados indicaron que esos atributos fueron notablemente estables entre las semillas y poblaciones de H. perotensis.

En contraste, la capacidad germinativa fue significativamente diferente entre los anos de recolecta. En 2012 la prueba de germinacion estandar indico que 77 % de la muestra no tenia capacidad para germinar, durante los primeros 15 d, en las condiciones de temperatura, luz y humedad y oxigeno en laboratorio, que se consideraron optimas o estandar para este proceso (International Seed Testing Association 2010). Pero en la muestra de 2015, las semillas inviables estuvieron practicamente ausentes. Las diferencias entre los anos de recolecta de este estudio confirmaron indirectamente el riesgo de permanencia de la poblacion endemica de H. perotensis, en la localidad de recolecta, dependiente de la calidad de las semillas y su capacidad para germinar y generar plantas normales en algunos ciclos de produccion de semilla. Aunque no se tiene evidencia, podria sugerirse que algo similar sucede en las demas poblaciones hasta ahora conocidas del centrooeste de Veracruz y su porcion limitrofe con Puebla, Mexico (Espejo-Serna et al. 2007).

Las caracteristicas germinativas de las especies silvestres y endemicas, como H. perotensis, son relevantes por diversas causas. La germinacion de las semillas esta entre los eventos mas tempranos y drasticos del desarrollo que suceden en la vida de las plantas, pues con el pasan de ser organismos quiescentes a activos, de estar protegidos con una testa a exponerse a todos los elementos del ambiente y de ser heterotrofos a autotrofos (Donohue, Rubio de Casas, Burghardt, Kovach, & Willis, 2010). Este estudio revelo que las semillas de la muestra de H. perotensis recolectadas en 2012, no fueron vigorosas, y las recolectadas tres anos despues expresaron vigor maximo; pero esta prueba no aporta informacion sobre aspectos como la adaptacion o la distribucion geografica de la especie, por lo que para continuar esta investigacion se espera complementar la informacion con otros analisis.

La prueba estandar de germinacion en laboratorio tampoco ayuda a discriminar entre las semillas que no germinaron por ser latentes, abortadas, o tener embrion danado. En contraste, la prueba con tetrazolio, independientemente de la concentracion usada, permitio determinar que las semillas de la muestra analizadas tenian potencial germinativo contrastante e indicaron que en promedio 64 % de las semillas de la muestra de 2012 no tenian posibilidad de germinar o solo una proporcion del 7 % podria haberlo hecho si las condiciones de germinacion hubieran sido totalmente favorables para activar los embriones con viabilidad baja de esas semillas.

Los resultados, tambien permitieron calcular la muestra recolectada en 2012 contenia semillas latentes puesto que el porcentaje de semillas viables obtenidas en la prueba de tetrazolio es mayor al porcentaje de semillas germinadas obtenidas en la prueba estandar de germinacion. En contraste, las semillas de la recolecta de 2015 no presentaron latencia, la proporcion de semillas que fue clasificada como vigorosa, con la prueba de tretrazolio, germino en la prueba estandar.

La proporcion de semillas germinadas, latentes y no latentes en las poblaciones, como la de H. perotensis muestreada para el presente estudio, permite conocer indirectamente las caracteristicas del banco de semillas. En la muestra de 2012, en promedio, de las 46 semillas por capsula solo 17 fueron viables, ocho podrian haberse encontrado en estado latente y el resto eran semillas abortadas o muertas. En contraste, la de 2015 en promedio una capsula tendria casi exclusivamente semillas viables y unicamente una semilla no viable o abortada.

La latencia es una propiedad de la semilla que previene su germinacion cuando esta en condiciones favorables para ella. Este fenomeno es influenciado por la informacion genetica de la especie, las condiciones ambientales, el balance de reguladores del crecimiento, como acido abscisico (ABA) y giberelinas, y la interaccion de estos dos con el etileno, y algunas auxinas o brasinoesteroides (Bewley, 1997; Finkelstein, Gampala & Rock, 2002; FinchSavage & Leubner-Metzger, 2006). La latencia puede estar relacionada con el embrion o con las estructuras que lo rodean, como la testa, lo que permite distinguir varias clases de latencia (Finch-Savage & Leubner-Metzger, 2006). En el caso de H. perotensis, independientemente del tipo de latencia, la proporcion de este tipo de semillas cambio significativamente entre las recolectas y notablemente no existio en la muestra recolectada en 2015. Este resultado podria deberse al efecto de factores diversos y variados, tanto intrinsecos de la planta y sus estructuras, como de los ambientales durante su desarrollo y maduracion, y a la interaccion de ellos, como se ha observado en otras especies silvestres (Pena-Valdivia et al., 2006). La calidad menor de las semillas recolectadas en 2012 respecto a las de 2015, parece estar relacionada con la escasa precipitacion (menos a 1.03 mm mensuales) durante nueve meses previos a las recolectas; en contraste, la precipitacion antes de la recoleccion de 2015 fue mas abundante, frecuente y regular.

Tambien la temperatura minima, maxima y media durante el ano que antecedio a las recolectas, mostro patrones distintos entre los anos y minimos y maximos parcialmente contrastantes. En el caso de las temperaturas minimas mensuales previas a la recoleccion de 2012, durante ocho meses fueron cercanas a 0 [grados]C y menores a 5 [grados]C. En contraste, 10 meses previos a la recoleccion de 2015 fueron mas calidos y su temperatura minima fluctuo entre 5 y 10 [grados]C. Ademas, la temperatura ambiente maxima en el ciclo previo a la recoleccion de 2012, tambien mostro cinco meses relativamente frios, con temperaturas maximas menores de 20 [grados]C. En contraste, la mayoria de los meses previos a la recoleccion de 2015, mostraron temperaturas maximas que fluctuaron alrededor de los 22 [grados]C, y algunos mostraron hasta 24 y 25 [grados]C. En consecuencia, los patrones de temperatura media mensual entre los dos periodos analizados mostraron tendencias diferentes.

Aunque actualmente no se tiene informacion de la fenologia de H. perotensis, la informacion anterior es evidencia del efecto de la precipitacion y la temperatura ambiente durante la fructificacion y probablemente durante la floracion de las plantas de la poblacion estudiada.

La depredacion de semillas es con frecuencia una causa importante de mortalidad (Wenny, 2000), y si las condiciones son favorables para el crecimiento de las plantulas entonces la germinacion rapida podria ser ventajosa (Xiao, Harris, & Zhang, 2007). La viabilidad en el banco de semillas es necesaria para que la latencia sea adaptable, o las semillas pueden morir antes de germinar, asi que el valor adaptativo de la latencia depende del riesgo relativo de mortalidad de las semillas en el suelo, frente a la mortalidad de las plantulas. La longevidad intrinseca de la semilla en el suelo tambien se convierte en un problema. Si las semillas tienen pocas reservas o estan metabolicamente muy activas para soportar periodos largos antes de la germinacion, la inactividad prolongada conduciria a la muerte de la semilla (Donohue et al., 2010). En este contexto, la depredacion de semillas, el tiempo de germinacion, las caracteristicas del banco de semillas ni la longevidad de estas no se ha documentado en H. perotensis; lo que confirma la importancia de continuar evaluando las poblaciones de esta especie endemica.

El desarrollo de las plantas y sus estructuras, incluidas las semillas, depende de la radiacion, ya que la radiacion baja puede limitar drasticamente la disponibilidad de C y con esto se restringen los suministros de energia para procesos metabolicos esenciales, como gradientes celulares y sintesis de proteinas, y las plantas deben alcanzar un equilibrio entre la asignacion de C para el crecimiento y la acumulacion de reservas (Pons & Poorter, 2014). Lo anterior y la informacion actual permiten sugerir que la radiacion y su interaccion con otros factores ambientales, tambien pudo haber afectado la calidad fisiologica de las semillas de H. perotensis evaluadas.

En general, los promotores germinativos KN[O.sup.3] y A[G.sup.3] no modificaron el porcentaje de germinacion; pero, en la primera recolecta si hubo un incremento pequeno de semillas germinadas que originaron plantulas anormales. Estos resultados permitieron confirmar los resultados de la proporcion de las semillas latentes en esa muestra.

Estos resultados coincidieron con los de Amador-Alferez, Diaz-Gonzalez, Loza-Cornejo, y Bivian-Castro (2013) con semillas de F. histrix y F. latispinus (Cactaceae); en los que no obtuvieron incremento significativos de los porcentajes de germinacion de semillas con la aplicacion de 500 mg/L de A[G.sup.3] en comparacion con el testigo. El A[G.sup.3] tampoco tuvo efecto en la germinacion de Opuntia rastrera, O. microdasys y O. macrocentra (Mandujano, Golubov, & Rojas-Arechiga, 2007). Los resultados de la recolecta de 2012 difirieron de los de Magnitskiy y Ligarreto (2007) con semillas de agraz (Vaccinium meridionale Swartz), las que si incrementaron (32 %) su germinacion despues de 35 d, con la imbibicion de las semillas en soluciones acuosas de KN[O.sup.3] y A[G.sup.3]. Este resultado puede ser indicativo de que la falta de efecto de A[G.sup.3] y KN[O.sup.3] en las semillas de H. perotensis podria cambiar con otras concentraciones diferentes a las utilizadas en este estudio. Los efectos positivos en el incremento de la germinacion, emergencia y en la sincronia de estos eventos se han logrado con la imbibicion de las semillas con 200 mg/L (Navarrete, 1996) a 600 mg/L de A[G.sup.3] (Furatani & Nagao, 1987). Lima, Lima, Venezuela, y Macias (1985) mencionaron que al aplicar AG (1.0 mM) se inhibio la latencia de las semillas y se elimino el efecto de las sustancias lipoproteicas que retardaron o inhibieron su germinacion. Daviere y Achard (2013) describieron los procesos de senalizacion de las giberelinas en las plantas. Estos autores senalaron que las proteinas denominadas DELLA fueron las represoras centrales de los procesos dependientes de AG, como la germinacion; el genoma de Arabidopsis codifico cinco DELLAs que desarrollaron distintas funciones en las respuestas a AG, de ellas, especificamente las conocidas como RGL2 inhibieron la germinacion de las semillas. Ademas, el descubrimiento de un receptor GA (GID1) permitio reconocer que la ausencia de DELLA conduce a la inhabilidad de DELLAs para interaccionar con GID1 aun en la presencia de AG. Por lo que, no todas las especies y variantes responderan a los compuestos denominados genericamente promotores de la germinacion.

Otro aspecto fue el referente a la prueba de viabilidad, la cual nos indico que las concentraciones de tetrazolio evaluadas no generaron diferencia significativa (p > 0.05) en la tincion de los embriones y todas permitieron cuantificar proporciones significativamente similares de cada clase de semillas, con embrion viable, sin el o con vigor bajo. Podria asegurarse que para H. perotensis el uso de cualquier concentracion de este compuesto, entre 0.2 y 1.0 % es adecuada para conocer la viabilidad de los embriones. Estos resultados coincidieron con los de Craviotto et al. (2011), ya que con solucion de tetrazolio al 0.1 y 0.5 %, a 30 [grados]C por 3 h, obtuvieron en semillas de soya resultados adecuados para discernir la coloracion con matices diferentes, que fueron interpretados como indicativos de su estado fisiologico. Aunque no hubo diferencias significativas (p > 0.05) entre las concentraciones en las muestras de cada recolecta en el presente estudio, debe indicarse que con tetrazolio al 0.2 % hubo cierta dificultad para diferenciar entre los embriones viables y los no viables de la recolecta de 2015.

Victoria, Bonilla, y Sanchez (2006) utilizaron solucion de tetrazolio al 0.5 %, por tiempos y temperaturas diferentes, en semillas de Calendula officinalis y lograron la tincion solo de los cotiledones. Ademas, en semillas de Anethum graveolens lograron la tincion adecuada del embrion con tetrazolio al 1 % y la de la semilla completa con 0.5 %. Los resultados coincidieron con los obtenidos en las semillas de H. perotensis, en las que la concentracion de tetrazolio 0.5 a 1 % permitio discernir entre embriones viables y no viables. Esto indica que para las semillas de cada genero y especie es necesario un estudio detallado que incluya tiempos, temperaturas y concentraciones variables del colorante, para establecer los patrones de coloracion de los tejidos.

La proporcion de semillas viables y no viables y latentes de H. perotensis varia su calidad fisiologica en dependencia del ano de produccion; esa calidad es dependiente del clima, como la precipitacion y las temperaturas minimas, maximas y medias, ademas tambien puede evidenciarse el efecto directo de la radiacion global. Las semillas de la especie en estudio con potencial germinativo bajo no se modifican por promotores de la germinacion. El protocolo de la prueba de tetrazolio es adecuado para evaluar la calidad de los embriones en semillas de esa especie de Hechtia, pues los resultados coinciden con los de la germinacion.

Recibido 05-IV-2016. Corregido 26-VII-2016. Aceptado 26-VIII-2016.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecemos a Gerardo Benjamin Torres Canto, estudiante de doctorado del Posgrado en Botanica del Colegio de Postgraduados, por identificar las especies del sitio de recolecta.

REFERENCIAS

Amador-Alferez, K. A., Diaz-Gonzalez, J., Loza-Cornejo, S., & Bivian-Castro, E. Y. (2013). Efecto de diferentes reguladores de crecimiento vegetal sobre la germinacion de semillas y desarrollo de plantulas de dos especies de Ferocactus (Cactaceae). Polibotanica, 35, 109-131.

Baskin, C. C., & Baskin, J. M. (2008). Advances in understanding seed dormancy at the whole-seed level: An ecological, biogeographical and phylogenetic perspective. Acta Botanica Yunnanica, 30, 279-294.

Bewley, J. D. (1997). Seed germination and dormancy. The Plant Cell, 9, 1055-1066.

Craviotto, R. M., Arango, P. M. R., & Gallo, C. (2011). Novedades de la Prueba de Viabilidad por Tetrazolio en Soja. Santa Fe, Argentina: Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Laboratorio de semillas EEA Oliveros.

Daviere, J. M., & Achard, P. A. (2013). Gibberellin signaling in plants. Development, 140, 1147-1151.

Deno, N. C. (1994). The critical role of gibberellins in germination and survival of certain cacti. Cactus and Succulent Journal, 66, 28-30.

Donohue, K., Rubio de Casas, R., Burghardt, L., Kovach, K., & Willis, C. G. (2010). Germination, postgermination adaptation, and species ecological ranges.

Annual Review of Ecology, Evolution, and Systematic, 41, 293-319.

El-Maarouf-Bouteau, H., & Bailly, C. (2008). Oxidative signaling in seed germination and dormancy. Plant Signaling & Behavior, 3, 175-182.

Escobedo, S., J. (2012). Mecanismos de dispersion de semillas en las Bromelias. Desde el herbario CICY 4: 22-23. http://www.cicy.mx/sitios/desde_herbario/

Espejo-Serna, A., Lopez-Ferrari, A. R., Ramirez-Morillo, I., & Martinez-Correa, N. (2007). Dos nuevas especies de Hechtia (Bromeliaceae) de Mexico. Acta Botanica Mexicana, 78, 97-109.

Finch-Savage, W. E., & Leubner-Metzger, G. (2006). Seed dormancy and the control of germination. New Phyto logist, 171, 501-23.

Finkelstein, R. R., Gampala, S. S., & Rock, C. D. (2002). Abscisic acid signaling in seeds and seedlings. The Plant Cell Supplement, 14, 15-45.

Furatani, S. C., & Nagao, M. A. (1987). Influence of temperature, KN[O.sup.3], A[G.sup.3] and seed drying on emergence of papaya seedlings. Scientia Horticulturae, 32, 67-72.

Garcia, E. (1988). Modificaciones al sistema de clasificacion climatica de Koppen. Mexico: Universidad Nacional Autonoma de Mexico.

Garcia, F. A., Montes, H. S., Rangel, L. J. A., Garcia, M. E., & Mendoza, E. M. (2010). Respuesta fisiologica de la semilla chile piquin [Capsicum annuum var. glabriusculum (Dunal) Heiser & Pickersgill] al acido giberelico e hidrotermia. Revista Mexicana de Ciencias Agricolas, 1, 203-216.

Givnish, T. J., Millam, K. C., Berry, P. E., & Sytsma, K. J. (2007). Phylogeny, adaptive radiation, and historical biogeography of Bromeliaceae inferred from ndhf sequence data. Aliso, 23, 3-26.

Glenner, G. G. (1990). Formazans and tetrazolium salts. En R. D. Lillie (Ed.), Biological Stains (pp. 225-235). St. MO: Sigma Chemical Company.

International Seed Testing Association (2010). International Rules for Seed Testing. Basserdorf, CH Switzerland.

Lima, D. S., Lima, D. I., Venezuela, G. R., & Macias, P. (1985). Estudio de la viabilidad de las semillas de Carica papaya L. (Variedad de Maradol Roja). Centro Agricola, 12, 119-130.

Llorente-Bousquets, J., & Ocegueda, S. (2008). Estado del conocimiento de la biota, en Capital natural de Mexico (vol. I, pp. 283-322). Conocimiento actual de la biodiversidad. Mexico: Conabio.

Magnitskiy, S. V. & Ligarreto, G. A. (2007). Efecto del nitrato de potasio, del acido giberelico y del acido indolacetico sobre la germinacion de semillas de agraz (Vaccinium meridionale Swartz). Revista Colombiana de Ciencias Horticolas, 1, 137-141.

Mandujano, M. C., Golubov, J., & Rojas-Arechiga, M. (2007). Efecto del acido giberelico en la germinacion de tres especies del genero Opuntia (Cactaceae) del Desierto Chihuahuense. Cactaceas y Suculentas Mexicanas, 52, 46-52.

Montes, R. S. (2013). Germinacion de especies de la familia Bromeliaceas: aspectos ecologicos y anatomicos (Tesis de Doctorado). Universidad Autonoma de Mexico, Mexico.

Navarrete, R. J. A. (1996). Produccion del Papayo (Carica papaya L.) Variedad Maradol en Yucatan. Instituto Tecnologico Agropecuario No. 2. Merida, Yucatan. Mexico: Centro de Investigacion y Graduados Agropecuarios. Direccion General de Educacion Tecnologica Agropecuaria.

Pena-Valdivia, C. B., Sanchez-Urdaneta, A. B., Aguirre, R. J. R., Trejo, C., Cardenas, E., & Villegas, M. A. (2006). Temperature and mechanical scarification on seed germination of "maguey" (Agave salmiana Otto ex Salm-Dyck). Seed Science and Technology, 34, 47-56.

Pereira, A. R., Andrade, A. C. S., Pereira, T. S., Forzza, R. C., & Rodriguez, A. S. (2010). Morphological aspects of seed, germination and storage of Pitcairnia albiflos (Bromeliaceae). Seed Science and Technology, 38, 79-87.

Pons, T. L., & Poorte, H. (2014). The effect of irradiance on the carbon balance and tissue characteristics of five herbaceous species differing in shade-tolerance. Frontiers in Plant Science, 5, 1-14.

Ramirez, M. I., Jimenez, C. F., Fernandez-Concha, G. C., & Pinzon, J. P. (2014). Three new species and growth patterns in Hechtia (Bromeliaceae: Hechtioideae). Phytotaxa, 178, 113-127.

Rzedowski, J. (1991). El endemismo de la flora fanerogamica mexicana: una apreciacion analitica preliminar.

Acta Botanica Mexicana, 15, 47-64.

Reyes, S. J. (2015). Conservacion y restauracion de cactaceas y otras plantas suculentas mexicanas. Mexico: Comision Nacional Forestal.

Saldivar-Iglesias, P., Laguna-Cerda, A., Gutierrez-Rodriguez, F., & Dominguez-Galindo, M. (2010). Acido giberelico en la germinacion de semillas de Jaltomata procumbens (Cav.) J. L. Gentry. Agronomia Mesoamericana, 21, 327-331.

Sarukhan, J., Halffter, G., & Koleff, P. (2009). Capital natural de Mexico. Sintesis: conocimiento actual, evaluacion y perspectivas de sustentabilidad. Mexico: Comision Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad.

Siadat, S. A., Moosavi, S. A., Zadeh, M. S., Fotouhi, F., & Zirezadeh, M. (2011). Effects of halo and phytohormone seed priming on germination and seedling growth of maize under different duration of accelerated ageing treatment. African Journal of Agricultural Research, 6, 6453-6462.

Sosa, L. D., Chavez, S. J. L., Mondragon, Ch. D., Estrada, G. J. A., & Ramirez, V. P. (2012). Viabilidad y germinacion de semillas de seis especies de Tillandsia (Bromeliaceae) de Oaxaca, Mexico. Fitotecnia Mexicana, 35, 37-42.

Tigabu, M., & Oden, P. C. (2001). Effect of scarification, gibberellic acid and temperature on seed germination of two multipurpose Albizia species from Ethiopia". Seed Science and Technology, 29, 11-20.

Toledo, A. T., & Wolf, J. H. D. (2008). Germination and establishment of Tillandsia eizii (Bromeliaceae) in the canopy of an oak forest in Chiapas, Mexico. Biotropica, 40, 246-250.

Victoria, J., Bonilla, C., & Sanchez, M. (2006). Viabilidad en tetrazolio de semillas de calendula y eneldo. Acta Agronomica, 55, 14-18.

Wenny, D. G. (2000). Seed dispersal, seed predation, and seedling recruitment of a neotropical montane tree. Ecological Monograph, 70, 331-351.

Xiao, Z. S., Harris, M. K., & Zhang, Z. B. (2007). Acorn defenses to herbivory from insects: implications for the joint evolution of resistance, tolerance and escape. Forest Ecology and Management, 238, 302-308.

Zheng, C., Jiang, D., Liub, F., Dai, T., Liu, W., Jing, Q., & Cao, W. (2009). Exogenous nitricoxide improves seed germination in wheat against mitochondrial oxidative damage induced by high salinity. Environmental and Experimental Botany, 67, 222-227.

Violeta Elizalde (1), Jose Rodolfo Garcia (1), Cecilia Beatriz Pena-Valdivia (1) *, Ma. Carmen Ybarra (2), Otto Raul Leyva (3), Carlos Trejo (1)

(1.) Postgrado en Botanica, Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo, Carretera Mexico-Texcoco, km 35.5, Estado de Mexico, 56230, Mexico; violeta.elizalde@colpos.mx, garcianr@colpos.mx, cecilia@colpos.mx, cecibetipv@gmail.mx, catre@colpos.mx

(2.) Departamento de Ingenieria Agroindustrial, Universidad Autonoma Chapingo, Carretera Mexico-Texcoco km 38.5, Estado deMexico, 56230, Mexico; agroalim@correo.chapingo.mx

(3.) Facultad de Ciencias Biologicas y Agropecuarias, Universidad Veracruzana. Camino a Penuela s/n. C.P. Penuela, Amatlan de los Reyes, Ver., Mexico; oleyva@uv.mx

* Correspondencia

Leyenda: Fig. 1. Semillas que germinaron y generaron plantulas normales y anormales, semillas que no germinaron (A y B); semillas sin embrion, y con embrion con viabilidad baja, no viable o viable (C y D) en muestras de Hechtia perotensis, recolectadas en 2012 y 2015 en la region de Frijol Colorado, municipio de Perote, Veracruz, Mexico. Cada columna representa el promedio de seis repeticiones, con 100 semillas cada una + error estandar.

Fig. 1. Seeds that germinated and produced normal and abnormal seedlings, non-germinated seeds (A and B); seeds without embryo, with embryo, low viability, non-viable and viable embryo (C and D) in samples of Hechtia perotensis collected in 2012 and 2015, in the Frijol Colorado region, municipality of Perote, Veracruz, Mexico. Each column represents average of six repetitions with 100 seeds each one + standard error.

Leyenda: Fig. 2. Precipitacion promedio (mm), temperatura minima, media y maxima mensual ([grados]C) (A, B) y radiacion global (C) en los 12 meses previos a recoleccion de semillas de Hechtia perotensis, en 2012 (A) y 2015 (B), en la region de Frijol Colorado, municipio de Perote, Veracruz, Mexico.

Fig. 2. Average rain (mm), minimum, average and maximum temperature per month ([grados]C) (A, B) and global sunlight (C) in the previous 12 months to the Hechtia perotensis seed recollection, in 2012 (A) and 2015 (B), in the Frijol Colorado region, municipality of Perote, Veracruz, Mexico.
CUADRO 1

Caracteristicas de las capsulas y semillas de dos recolectas de
Hechtia perotensis, de la region de Frijol Colorado, municipio de
Perote, Veracruz, Mexico

TABLE 1

Characteristics of capsules and seeds of two collects of Hechtia
perotensis, in the Frijol Colorado region, municipality of Perote,
Veracruz, Mexico

Capsula          Septiembre 2012   Julio 2015       Semillas

Diametro (mm)    5.23 a            5.61 a           Anchura
                 (CV = 9.96 %)     (CV = 9.66 %)
Longitud (mm)    9.79 a            10.14 a          Longitud
                 (CV = 7.08 %)     (CV = 8.31 %)
Biomasa (mg)     103.33 a          133.00 a         Biomasa
                 (CV = 21.03 %)    (CV = 29.04 %)
Semillas por     45.60 a           44.20 a
capsula (Num.)   (CV= 23.34 %)     (CV = 18.48 %)

Capsula          Septiembre 2012   Julio 2015

Diametro (mm)    1.26 b            1.47 a
                 (CV 14.19%)       (CV = 16.64 %)
Longitud (mm)    3.57 a            3.58 a
                 (CV = 8.04 %)     (CV = 7.00 %)
Biomasa (mg)     0.96 b            1.10 a
                 (CV = 460.06 %)   (CV = 31.05%)
Semillas por
capsula (Num.)

Letras iguales en los valores de cada variable de las dos recolectas
indican que no hay diferencia entre ellos de acuerdo con la prueba de
t de Student; CV: coeficiente de variacion.
COPYRIGHT 2017 Universidad de Costa Rica
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2017 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Elizalde, Violeta; Garcia, Jose Rodolfo; Pena-Valdivia, Cecilia Beatriz; Ybarra, Ma. Carmen; Leyva,
Publication:Revista de Biologia Tropical
Article Type:Report
Date:Mar 1, 2017
Words:8020
Previous Article:Some intertidal and shallow water polychaetes of the Caribbean coast of Costa Rica.
Next Article:Distribucion y abundancia espacial y temporal de Stomolophus meleagris (Rhizostomae: Stomolophidae) en un sistema lagunar del sur del Golfo de Mexico.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2022 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters |