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Presencia de Piscirickettsia salmonis en truchas de cultivo (Oncorhynchus mykiss) en Junin, Peru.

PRESENCE OF PISCIRICKETTSIA SALMONIS IN FARMED TROUT (Oncorhynchus mykiss) IN JUNIN, PERU

INTRODUCCION

La trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss) es la especie dulceacuicola mas importante en el Peru, especialmente en las zonas altoandinas. La region Junin, en la Sierra Central, destaca por la produccion de truchas, llegando a producir de 1337 toneladas en 2003 a 2078 toneladas en 2008 (FAO, 2012).

Este crecimiento debe sustentarse en adecuadas practicas sanitarias, ya que estas influyen directamente sobre los indices productivos y reproductivos de los peces. Entre las enfermedades mas comunes en los principales paises productores de trucha, se encuentra la piscirrickettsiosis, conocida tambien como <<sindrome rickettsial salmonideo>> (SRS) (Lannan et al., 1999).

El agente etiologico, identificado como Piscirickettsia salmonis, corresponde a un microorganismo gram negativo, no movil, no encapsulado, habitualmente cocoide, en pares o en forma de anillo (Lannan et al., 1999). Es una bacteria patogena intracelular obligada y se agrupa en la subdivision gamma de las proteobacterias (Lannan et al., 1999; Austin B y Austin D, 2007).

La piscirrickettsiosis es una enfermedad de transmision vertical y horizontal. Los peces infectados presentan letargia, nado superficial y oscurecimiento de la piel. Tambien es comun observar anorexia y lesiones en la piel, desde pequenas areas de escamas elevadas hasta ulceras superficiales (Lannan et al, 1999).

En la necropsia es comun encontrar inflamacion en los rinones, esplenomegalia, anemia, ascitis, lesiones en el higado y hemorragias petequiales en el estomago, intestino, vejiga natatoria, musculatura del cuerpo y grasa visceral (House et al., 1999; OIE, 2003). En el higado se pueden observar areas grises y amarillentas, a manera de un puntilleo o en forma de anillos en los peces con enfermedad cronica (Lannan et al., 1999; OIE, 2003). En algunos casos se puede observar un material mucoide amarillento en la luz del intestino (Austin B y Austin D, 2007).

Para el diagnostico se disponen de metodos serologicos, inmunohistoquimicos y moleculares (Lannan et al., 1999). La confirmacion de P. salmonis en el cultivo celular puede hacerse mediante las pruebas de inmunofluorescencia indirecta con anticuerpo (IFI) o por PCR (OIE, 2003). La tecnica de IFI ha resultado ser una tecnica sensible y especifica para este organismo (OIE, 2006).

En el Peru, el agente Piscirrickettsia salmonis, causante de esta enfermedad, representa un riesgo para la crianza de trucha arcoiris debido a la constante importacion de ovas, que podria permitir el ingreso de esta enfermedad al pais y ocasionar problemas y perdidas economicas. No existen estudios preliminares especificos acerca de esta bacteria en el pais, por lo que el objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia de este agente en la cuenca del Mantaro, una de las principales zonas productoras de truchas del Peru.

MATERIALES Y METODOS

Lugar de Estudio

La coleccion de muestras se realizo en tres piscigranjas del departamento de Junin, Peru, localizadas a 3400 msnm. Se trabajo en las piscigranjas El Eden y Arco Iris en febrero de 2009, que corresponde a la epoca de lluvias, con una temperatura ambiental de 10 a 18[grados]C, y en la piscigranja Rumihuasi en agosto de 2009, que corresponde a la epoca seca, con una temperatura ambiental de -1 a 13[grados]C. Eden y Arco Iris tienen una produccion anual de 50 y 25 toneladas metricas, respectivamente, y abastecen el mercado local y supermercados de la ciudad de Lima, en tanto que Rumihuasi tiene una produccion de 53 toneladas metricas y solo abastece el mercado local.

El procesamiento de las muestras se realizo en el Laboratorio de Ictiopatologia de la Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima.

Tamano de Muestra

En el calculo del numero muestral se siguieron las indicaciones del Manual de Animales Acuaticos de la OIE (2006), donde asumiendo una prevalencia de 1% y un tamano de lote mayor de 2000 peces, se colectaron un minimo de 60 truchas por piscigranja.

Obtencion de Muestras

Las truchas se colectaron de varias pozas que contenian los peces juveniles (40.0 [+ o -] 7.5 g de peso y 17.0 [+ o -] 4 cm de largo) de aproximadamente 4 meses de edad. El sacrificio se realizo mediante la tecnica de corte medular con hoja de bisturi, entre el cerebro y medula espinal (Rosenthal, 2007).

La necropsia se llevo a cabo de acuerdo a Ostrande (2000). Se dejo expuestas las visceras in situ para proceder a la toma de las muestras. Se tomaron cortes de tejido renal y esplenico, de 5 a 10 mm, de cada individuo, se realizo la impronta en laminas portaobjeto y se fijo en acetona por 10 min.

Se hicieron mediciones de temperatura (termometro de alcohol), contenido de oxigeno (kit Sera[R] Test O2, Heinsberg, Alemania) y pH (kit Sera[R] Test pH, Heinsberg, Alemania) del agua de las pozas.

Deteccion de la Bacteria por IFI

Se emplearon las improntas de bazo y rinon en la prueba de IFI, utilizando el kit comercial SRS Fluorotest (Laboratorios BiosChile, 2008). Como control positivo, se utilizaron laminas fijadas en xilol con la cepa LF-89 de Piscirickettsia salmonis, procedente del Laboratorio de Patobiologia de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad de Chile.

RESULTADOS

Entre los principales signos clinicos observados en los peces se encontraron melanosis (24.4%), abdomen abultado (10.6%), exoftalmia (8.3%) y ulceras en la piel (7.8%). Ademas, se observaron peces con nado erratico y superficial. En la evaluacion de los organos internos se observo palidez hepatica (22.8%), esplenomegalia (13.3%) y focos hemorragicos en higado, intestino, ciego pilorico y grasa peritoneal (13.9%) (Fig. 1). No obstante, pese a observarse signos clinicos sugerentes de la enfermedad, no se encontraron muestras positivas a Piscirickettsia salmonis mediante la prueba de IFI.

[FIGURA 1 OMITIR]

Las caracteristicas del agua de las pozas en las piscigranjas se muestran en el Cuadro 1. Asimismo, cabe resaltar la presencia de abundante material en suspension en el agua en las tres piscigranjas.

DISCUSION

En la mayoria de las enfermedades infecciosas y no infecciosas en los peces de cultivo se presentan signos clinicos y lesiones de tipo general, lo que hace dificil llegar a un diagnostico clinico definitivo. En el presente estudio se hallaron peces con lesiones sugerentes de piscirickettsiosis, pero ninguno de estos casos fue positivo a esta enfermedad. Cuadros clinicos similares fueron obtenidos por Fryer et al. (1992) y Smith et al. (1999) en mas del 90% de los peces al inocular P salmonis en truchas arcoiris. Asimismo, en infecciones naturales en salmon coho (Oncorhynchus kisutch) con P salmonis se han encontrado lesiones similares, pero afectando gran cantidad de peces (Branson y Nieto, 1991; Cvitanich et al., 1991; Garces et al., 1991). Por otro lado, Olsen et al. (1997) encontraron lesiones similares en salmones del atlantico juveniles, con una frecuencia menor del 1%, pudiendo identificar a P. salmonis por IFI y por cultivo celular.

La presencia de abundante material en suspension en el agua y la baja concentracion de oxigeno en las piscigranjas Arco iris y Rumihuasi se convierten en potenciales factores de riesgo para el incremento de la susceptibilidad de las truchas a agentes infecciosos, las cuales podrian haber facilitado la ocurrencia de lesiones y signos clinicos encontrados. Por otro lado, los resultados negativos por IFI a P. salmonis sugieren que la enfermedad no se encuentra presente en esta zona o se encuentra en una prevalencia muy baja.

http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v26i1.10922

LITERATURA CITADA

1. Austin B, Austin D. 2007. Characteristics of the disease, Pisciricketsiaceae representative: Piscirickettsia salmonis. En: Bacterial fish pathogens. Disease of farmed and wild fish. 4th ed. UK: Praxis Publishing. p 81-148.

2. Branson E, Nieto D. 1991. Description of a new disease condition occurring in farmed coho salmon, Oncorhynchus kisutch (Walbaum), in South America. J Fish Dis 14: 147-156. doi: 10.1111/ j.1365-2761.1991.tb00585.x

3. Cvitanich J, Garate O, Smith C. 1991. The isolation of rickettsia-like organism causing disease and mortality in Chilean salmonids and its confirmation by Koch's postulate. J Fish Dis 14: 121-145. doi: 10.im/j.1365-276U99Ltb00584.x

4. [FAO] Organizacion de las Naciones Unidas para la A limentacion y la Agricultura. 2012. El estado mundial de la pesca y la acuicultura (SOFIA). [Internet]. Disponible en: http:// www.fao.org/fishery/sofia/es

5. Fryer J, Lannan C, Giovannoni S, Wood N. 1992. Piscirickettsia salmonis gen. nov., sp. nov., the causative agent of an epizootic disease in salmonid fishes. Int J Syst Bacteriol 42:120-126.

6. Garces L, Larenas P, Smith P, Sandino S, Lannan C, Fryer L. 1991. Infectivity of a rickettsia isolated from coho salmon Oncorhynchus kisutch. Dis Aquat Organ 11: 93-97.

7. House M, Bartholomew J, Winton J, Fryer J. 1999. Relative virulence of three isolates of Piscirickettsia salmonis for coho salmon Oncorhynchus kisutch. Dis Aquat Organ 35: 107-113. doi: 10.3354/dao035107

8. LaboratoriosBiosChile. 2008. Manual: SRS--Fluorotest indirecto. Santiago de Chile: BiosChile. 8 p.

9. Lannan CN, Bartholomew JL, Fryer JL. 1999. Rickettsial and chlamydial infections in fish. In: Woo PTK, Bruno DW (eds). Fish disease and disorders. Vol. 3. Viral bacterial and fungal infections. p 245-267.

10. [OIE] Organizacion Mundial de Sanidad Animal. 2003. Piscirickettsiosis. Manual of diagnostic tests for aquatic animals. Ch 2.1.13. 4th ed. Paris: OIE. 358 p.

11. [OIE] Organizacion Mundial de Sanidad Animal. 2006. Manual de pruebas de diagnostico para los animales acuaticos. 5th ed. Paris: OIE. 384 p.

12. Olsen AB, Melby HP, Spielberg L, Evensen O, Hastein T. 1997. Piscirrickettsia salmonis infection in Atlantic salmon, Salmo salar, in Norway. Epidemiological, pathological and microbiological findings. Dis Aquat Organ 31: 35-48.

13. Ostrande GK. 2000. The laboratory fish. San Diego, USA: Academic Press. 678 p.

14. Rosenthal S. 2007. Frecuencia de lipidosis hepatica en trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss) de fase juvenil en una piscigranja de la sierra central del Peru. Tesis de Medico Veterinario. Lima: Univ Nacional Mayor de San Marcos. 74 p.

15. Smith P, Pizarro P, Ojeda P, Contreras J, Oyanedel S, Larenas J. 1999. Routes of entry of Piscirickettsia salmonis in rainbow trout Oncorhyn-chus mykiss. Dis Aquat Organ 37: 165-172.

Jefferson Yunis A. (1,3), Jahir Anicama D. (1), Alberto Manchego S. (2), Nieves Sandoval C. (1)

(1) Laboratorio de Histologia, Embriologia y Patologia Veterinaria, (2) Laboratorio de Microbiologia y Parasitologia Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru

(3) E-mail: jefyunis@gmail.com

Recibido: 20 de enero de 2014

Aceptado para publicacion: 25 de setiembre de 2014
Cuadro 1. Caracteristicas del agua de las
pozas de crianza de trucha arcoiris en tres
piscigranjas de la zona de Junin, Peru

Piscigranja   Temperatura   Oxigeno (mg/L)   pH
              ([grados]C)

El Eden           12             8.0         6.8
Arco iris         11             4.7         7.9
Rumihuasi         12             4.5         7.5
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Title Annotation:Comunicacion
Author:Yunis A., Jefferson; Anicama D., Jahir; Manchego S., Alberto; Sandoval C., Nieves
Publication:Revista de Investigaciones Veterinarias del Peru (RIVEP)
Date:Jan 1, 2015
Words:1896
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