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POSSIBLE ENVIRONMENTAL IMPLICATIONS FROM HEAVY METAL RESISTANCE OF BACTERIA ISOLATED FROM EXCRETA OF HUMBOLDT PENGUIN/POSIBLES IMPLICANCIAS AMBIENTALES DEBIDO A LA RESISTENCIA A METALES PESADOS EN BACTERIAS AISLADAS DE EXCRETAS DEL PINGUINO DE HUMBOLDT/POSSIVEIS IMPLICANCIAS AMBIENTAIS DEVIDO A RESISTENCIA A METAIS PESADOS EM BACTERIAS ISOLADAS DE EXCRETAS DO PINGUIM DE HUMBOLDT.

Introduccion

La contaminacion del agua, aire y suelo por metales pesados es uno de los problemas ambientales mas graves provocados por el hombre (Blais et al., 2007). Las fuentes mas comunes de contaminacion por dichos metales son los procesos industriales, los vertidos municipales y la mineria (Munoz y Becker, 1999). En Chile, como consecuencia del desarrollo minero en el norte y el desarrollo industrial en la zona central, se registra una creciente y preocupante contaminacion ambiental en los ecosistemas costeros por las altas concentraciones de metales que afecta desde el subsuelo hasta la atmosfera, incluyendo suelos y cuerpos de agua (Salamanca et al., 2004). En estas zonas del pais se concentran muchas colonias de pinguinos de Humboldt, las cuales se ven afectadas por estas actividades antropogenicas (Celis et al., 2014). El pinguino de Humboldt (Spheniscus humboldti) es una especie de ave marina que habita el litoral de las costas del Peru y de Chile; se alimenta en el mar en base a una dieta constituida principalmente de peces, complementado con calamares y crustaceos (Martinez y Gonzalez, 2004). Muchos metales pesados son incorporados al organismo a traves de la dieta, y una gran parte de ellos son excretados por el pinguino una vez que esta en tierra (Celis et al., 2014).

La presencia de metales pesados en el ambiente puede modificar la flora microbiana que alli habita, dependiendo de la concentracion de estos elementos quimicos (Montuelle et al., 1994). Existe evidencia que indica que la contaminacion con metales pesados puede favorecer la resistencia bacteriana tanto en ambientes marinos como terrestres (Baker-Austin et al., 2006) y que algunos organismos pueden ser portadores de genes resistentes a los antibioticos (Singer et al., 2006). La resistencia a metales pesados en poblaciones bacterianas puede considerase como un fenomeno ambiental de seleccion natural para la supervivencia de las especies, lo que podria alterar la biota bacteriana autoctona de los ecosistemas (Pathak y Gopa, 2005; Baker-Austin et al., 2006). Se ha visto que bacterias nativas del genero Pseudomonas que habitan en suelos de ambientes mineros presentan resistencia a metales pesados tales como Cd, Cu y Pb (Monge-Amaya et al., 2008). De este modo, la contaminacion de los ecosistemas costeros puede tener repercusiones que van mas alla de afectar a la poblacion del pinguino de Humboldt, pues la exposicion de bacterias autoctonas a altas concentraciones de metales pesados podria significar la aparicion de cepas resistentes, cuyas consecuencias pueden ser graves para el ambiente (Nies, 2003). A nivel mundial se estima que sobre el 70% de las enfermedades infecciosas emergentes tienen su origen en la fauna silvestre, y ademas de aumentar significativamente con el tiempo, la mayoria de los patogenos que las provocan presentan resistencia a antibioticos (Jones et al., 2008). Esto implica que muchos lugares donde viven especies silvestres podrian estar experimentando los mismos problemas.

La influencia antropica juega un papel importante en la contaminacion de los ecosistemas marinos y terrestres, lo que se ha visto reflejado por la cercania de las infraestructuras o de nucleos urbanos a los nichos silvestres (Salamanca et al., 2004; Celis et al., 2014). La contaminacion por metales pesados sobre la flora microbiana no ha sido cabalmente estudiada en fauna de zonas costeras de Chile (Moraga et al., 2003). La exposicion a altas concentraciones de metales pesados podria estar influyendo en la susceptibilidad de las bacterias gastrointestinales de especies como el pinguino de Humboldt. Mas aun, ciertos estudios han mostrado que la contaminacion con metales en ambientes naturales podria tener un importante rol en la proliferacion de la resistencia a antibioticos usados en humanos y en animales (Alonso et al., 2001; Summers, 2002; Rose et al., 2009). Esto ha motivado la realizacion de algunos estudios sobre susceptibilidad a metales pesados en bacterias que habitan en los ecosistemas costeros de Chile (Mondaca et al., 1993; Moraga et al., 2003). Sin embargo, estos estudios se han realizado sobre la base de matrices abioticas y no sobre matrices bioticas como las excretas, donde las bacterias gastrointestinales de especie silvestres que habitan los ecosistemas costeros podrian tener importancia. No se sabe si la contaminacion por metales pesados tiene incidencia sobre la flora microbiana de estas aves marinas en relacion a los habitats a los que estas especies estan vinculadas. En este estudio, se pretende 1) determinar si existe resistencia a metales como Cd, As, Pb, Cu y Zn en bacterias presentes en excretas de colonias de pinguinos de Humboldt que anidan en tres lugares de la costa chilena, y 2) investigar si dichos metales tienen efecto sobre la resistencia bacteriana a algunos de los antibioticos usados en humanos y en veterinaria.

Metodologia

Recoleccion de muestras

Los muestreos se llevaron a cabo entre diciembre 2011 y enero 2012 desde tres lugares del litoral chileno donde habitualmente anidan estas aves (Figura 1): Isla Pan de Azucar (26[degrees]09'S, 70[degrees]40'O), Isla Chanaral (29[degrees]01'S, 71[degrees]34'O) e Isla Cachagua (32[degrees]35'S, 71[degrees]27'O). Se recolectaron 20 muestras frescas de excretas (~5g cada una) de pinguinos de Humboldt, correspondientes a un grupo de animales de la colonia y no de un individuo en particular, desde los sitios de anidamiento en cada colonia. Para ello, se utilizaron guantes de latex, espatulas de plastico y bolsas de polietileno Ziploc. Cada muestra se almaceno en un contenedor con hielo (~4[degrees]C) hasta su llegada a laboratorio.

La isla Pan de Azucar es una isla de forma ovalada (1,5x1km) ubicada en el norte de Chile, a 1km de la costa y a 18km de la bahia de Chanaral, lugar donde desechos de la mineria fueron vertidos en gran cantidad entre 1938 y 1974 (Vermeer y Castilla, 1991); alli existe una importante poblacion de pinguinos de Humboldt, con ~5000 individuos. Por su parte, la Isla Chanaral es una isla circular (2km de diametro) situada a 7km de la costa y a 100km al norte de la bahia de Coquimbo; constituye una de las mas grandes colonias de pinguinos de Humboldt en el norte de Chile, con una poblacion estimada de 22000 individuos. Por su parte, Isla Cachagua esta ubicada en la zona central de Chile, y es una pequena area (250x200m) situada a 100m de la costa y a 20km de la Bahia de Quintero, un area altamente industrializada; a pesar del pequeno tamano de la isla, Cachagua constituye un lugar de anidacion importante para los pinguinos de Humboldt, soportando una poblacion de ~2000 individuos (Meza et al., 1998).

Determinacion de la resistencia a metales pesados y antibioticos

Las muestras de excretas fueron pesadas para estandarizar una cantidad fija (5g de peso seco) sobre la cual se trabajo en los analisis. A partir de cada muestra, 1g fueron sembrados por esparcimiento superficial en placas de Petri con agar R2A y agar ENDO-C (Merck[R]), las cuales se incubaron por cinco dias a temperatura ambiente (20[degrees]C). Las colonias desarrolladas se caracterizaron de acuerdo a su morfologia y las colonias seleccionadas se traspasaron a placas de agar PCA (Merck[R]) enriquecido con 800[micro]g x [ml.sup.-1] de CuS[O.sub.4] (Moraga et al., 2003). La identificacion bacteriana a partir de las colonias aisladas se baso en estudios de morfologia microscopica con tincion Gram y en propiedades bioquimicas. Para la tipificacion de las especies identificadas se utilizo un sistema estandarizado de identificacion bacteriana (API).

La resistencia a As, Cd, Cu, Pb y Zn se determino utilizando las siguientes soluciones (Merck[R]): [N.sub.2]As[O.sub.4]H x 7[H.sub.2]O, Cd[Cl.sub.2], CuS[O.sub.4], Pb[(N[O.sub.3]).sub.2] y Zn[Cl.sub.2] (Moraga et al., 2003). Para Zn las concentraciones ensayadas fueron 3200, 1600, 800, 400 y 200[micro]g x [ml.sup.-1], para As, Cu y Pb fueron 1600, 800, 400, 200 y 100[micro]g x [ml.sup.-1], mientras que para Cd los niveles testeados fueron 400, 200, 100, 50 y 25[micro]g x [ml.sup.-1] (Mondaca et al., 1993). La resistencia bacteriana se determino a traves de la concentracion minima inhibitoria (CMI) para estos metales (Anisimova et al., 1993). Los ensayos se realizaron en agar PCA suplementado con el metal. Las placas se sembraron con un replicador Steel y fueron incubadas por 48h.

La resistencia a antibioticos se estudio mediante la tecnica de difusion en placa, en base a las definiciones dadas por el European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (Matuschek et al., 2013). Se utilizaron los siguientes antibioticos (Merck[R]): oxitetraciclina (30 [micro]g x [ml.sup.-1]), penicilina (10 [micro]g x [ml.sup.-1]), gentamicina (10 [micro]g x [ml.sup.-1]), florfenicol (30 [micro]g x [ml.sup.-1]), amoxicilina (20 [micro]g x [ml.sup.-1]), sulfatrimet (25 [micro]g x [ml.sup.-1]) y cefapirina (30 [micro]g x [ml.sup.-1]). Las cepas fueron reactivadas desde partidas congeladas, cultivadas en placa por triplicado y chequeadas para ver crecimiento bacteriano despues de 24, 48 y 72h. Se utilizaron tres repeticiones en cada caso. Los resultados se registraron como sensible o resistente; no se considero el crecimiento intermedio.

Resultados

Del analisis de las muestras de excretas obtenidas de las diferentes colonias de pinguinos de Humboldt, se logro identificar diferentes cepas bacterianas (Tabla I). Las bacterias Gram negativas tales como Brevundimonas, Erwinia, Chryseobacterium, Weeksella, Pseudomonas y Mannheimia presentaron resistencia a penicilina, asi cono tambien Enterococcus durans, una bacteria Gram positiva. Por su parte, Erwinia y Pseudonoma presentaron resistencia a sulfatrimet y penicilina.

En las pruebas de susceptibilidad a metales, los valores de la concentracion minima inhibitoria (CMI) mostraron que el metal mas toxico (con menor CMI) para todas las cepas aisladas resulto ser el Cd, seguido por el Cu (Tabla II). Se encontro que todas las cepas bacterianas aisladas en las excretas del pinguino de Humboldt de las tres localidades estudiadas fueron resistentes al Zn; en cambio, todas las bacterias aisladas de Isla Chanaral no mostraron ninguna resistencia al Cu, siendo este lugar el mas alejado de la costa. Todas las bacterias aisladas de Isla Cachagua y la mayoria de las bacterias de Isla Pan de Azucar (exceptuando C. indogenes y M. luteus) mostraron resistencia al Pb, mientras que por el contrario las cepas bacterianas de Isla Chanaral no mostraron ninguna resistencia a este metal. Por su parte, E. durans, E. faecium, Pseudomonas spp. y B. vesicularis aisladas de las excretas obtenidas de Isla Cachagua mostraron resistencia al Cd. Por otra parte, solo M. haemolytica y Pseudomonas spp. de Isla Pan de Azucar mostraron resistencia al Cd. La mayoria de las cepas de Isla Cachagua e Isla Pan de Azucar fueron resistentes al As, pero no asi las aisladas de Isla Chanaral. Se noto que las cepas resistentes presentaron simultaneamente resistencia a dos o mas metales, particularmente en aquellas cepas aisladas de Isla Cachagua (Figura 2). Se observo una mayor resistencia al As, Cu y Pb en las cepas bacterianas aisladas de las excretas de pinguinos de Humboldt en Isla Cachagua, lo que coincide con las mayores concentraciones de estos metales en las excretas recolectadas desde este lugar (Tabla III).

Discusion

No se encontraron estudios similares de susceptibilidad bacteriana a metales pesados en excretas de pinguinos. Mas aun, poco se conoce acerca del impacto de la contaminacion con metales sobre las poblaciones bacterianas en areas donde habita el pinguino de Humboldt. Los diferentes valores de CMI encontrados sugieren que las bacterias son capaces de codificar complejos mecanismos de resistencia antimicrobiana, tales como enzimas hidroliticas, bombas de flujo, mutaciones en porinas de membrana, biofilms y elementos geneticos moviles (Girlich et al., 2007). Entre estos ultimos estan los plasmidos, los integrones, los transposones y elementos integrativos, los cuales pueden transmitirse entre especies bacterianas mediante procesos de conjugacion (Vargas et al., 2010). Cuando un elemento movil porta simultaneamente genes de resistencia a metales pesados y a algunos antibioticos, la presencia de metales pesados en el entorno claramente favorece la seleccion de dichos elementos geneticos en las poblaciones bacterianas (Mondaca et al., 1993; Ahmed et al., 2007). El presente estudio revela que existen bacterias gastrointestinales del pinguino de Humboldt resistentes a algunos de los metales pesados estudiados. Moraga et al. (2003) mostraron que bacterias del genero Pseudomonas aisladas en muestras de agua de la bahia de Iquique (760km al norte de Isla Pan de Azucar), con una gran actividad industrial en su borde costero y cuyas industrias descargan sus residuos liquidos en ella, son resistentes a Pb, As y Cu, y a cefataxima, amikacina, nitrofurantoina y ampicilina. En el presente estudio, la mayoria de las bacterias aisladas mostraron resistencia a As, Cu, Pb y Zn. Todas las bacterias Gram negativas aisladas presentaron resistencia a penicilina y algunas a sulfatrimet. En general, las bacterias Gram negativas tales como Chryseobacterium y Pseudomonas, presentan resistencia innata a muchos antibioticos (Poole, 2005; Sakurada, 2008), pero no observamos ninguna resistencia a oxitetraciclina, gentamicina, florfenicol, amoxicilina, sulfatrimet o cefapirina.

Las mayores resistencias a Pb, Cu y As fueron observadas en isla Cachagua, la que a diferencia de las otras dos islas estudiadas es la que se encuentra mas cercana al litoral y que esta mas afectada por actividades antropogenicas. Existen estudios que han establecido que la resistencia bacteriana a metales en ecosistemas muy contaminados esta asociada a la resistencia a antibioticos (Baker-Austin et al., 2006), como es el caso de la resistencia bacteriana al Hg (Summers et al., 1993) y la resistencia de enterobacterias a la tetraciclina, aun a concentraciones sub-letales de As, Cu y Zn (Chen et al., 2015). Por otro lado, la presencia de metales pesados en las excretas de aves articas puede inducir cierta resistencia en bacterias que viven en ambientes terrestres (Sjolund et al., 2008). Los trabajos llevados a cabo en suelos muy contaminados por la mineria indican que ciertas bacterias nativas en suelos contaminados pueden desarrollar resistencia a Hg y otros metales pesados, asi como tambien a cloranfenicol, ampicilina, tetraciclina, estreptomicina y kanamicina (Rojas et al., 2014). Se ha encontrado que existe una amplia resistencia a Hg, Cu, Pb, Ni, Zn y antibioticos en bacterias que viven inmediatamente bajo la superficie de suelos contaminados (Diptendu y Goutam, 2013). No obstante, y dado que los pinguinos se alimentan en el mar, pueden transportar los metales pesados que ingieren a traves de la dieta a los sitios de anidacion en tierra, actuando como biovectores de contaminacion (Blais et al., 2007). Es alli donde estos contaminantes se concentran, pudiendo aumentar la resistencia de ciertas comunidades bacterianas nativas de estos lugares terrestres. Las excretas son un sustrato ideal para el crecimiento microbiologico y constituyen un medio favorable para que las bacterias esten metabolicamente activas.

B. vesicularis es resistente a sulfametoxazol, trimetropina y ceftazidima (Zhang et al., 2012) y tambien se ha reportado resistencia a vancomicina por parte de bacterias del genero Enterococcus (Cetinkaya et al., 2000). En aves, se ha encontrado que cepas de Pseudomas aisladas de la cloaca del perico bronceado (Brotogeris jugularis) y de cotorra (Aratinga pertinax) son resistentes a trimetoprim-sulfametoxazol, cefotaxima y ampicilina (Vargas et al., 2010). Un gran numero de bacilos no entericos Gram negativos, como Pseudomonas, aislados de la cloaca de gaviota argentea (Larus argentatus) han mostrado resistencia a amikacina, ampicilina, aumentina, carbenicilina, celtiofur, tetraciclina, ticarcilina y tribrissen (Rose et al., 2009). Otro estudio encontro que M. haemolytica es altamente resistente a penicilina y tambien a florfenicol (Pijoan y Aguilar, 2000). La administracion de antibioticos de uso veterinario, como florfenicol, celtiofur o tribrissen, puede inducir la seleccion de bacterias resistentes a los antibioticos en la poblacion animal, que despues puede extenderse a los humanos a traves de la cadena alimentaria. La fauna silvestre no se encuentra aislada de la cadena alimentaria y por ende muchos de los problemas en ganaderia y clinica humana se estan observando en estos animales (Van der Bogaard y Stobbering, 2000).

La resistencia a uno o a varios antibioticos en las bacterias aisladas en animales silvestres es un factor de riesgo para su salud (Vargas et al., 2010). Adicionalmente, el uso de antimicrobianos en la poblacion humana y animal resulta en la liberacion de residuos que portan tanto antibioticos como bacterias resistentes a ellos en los ambientes terrestres y marinos (Silbergeld et al., 2008). En nuestro estudio es interesante notar que la mayor resistencia bacteriana se manifesto en los lugares donde hubo mayor concentracion con metales pesados, lo que refuerza lo establecido por Montuelle et al. (1994), quienes indican que la resistencia de la flora microbiana depende de la concentracion de estos elementos quimicos en el ambiente. La Isla Cachagua esta ubicada en una zona altamente industrializada y con asentamientos humanos, mientras que Isla Chanaral esta alejada de las actividades humanas (Celis et al., 2014). La liberacion de As, Cu y Pb al ambiente es el resultado de diferentes actividades antropogenicas, y su presencia en el aire, agua y suelo se debe al uso de combustibles fosiles, a las fundiciones, al uso de pesticidas y farmacos, a las pinturas y a las maderas impregnadas que se usan en las viviendas (Duruibe et al., 2007).

Existe evidencia de que las bacterias resistentes a antibioticos y metales viajan grandes distancias. En ambientes remotos, como el Artico, se ha encontrado resistencia bacteriana a Hg, Cd, Pb, Cu y Zn, en sedimentos y agua, con una correlacion positiva entre metales y antibioticos (Neethu et al., 2015). Otro estudio encontro que bacterias aisladas de excretas de aves articas presentaron resistencia a ampicilina, trimetropina, sulfametoxazol, cloranfenicol y tetraciclina (Sjolund et al., 2008). En el norte y zona central de Chile, muchos de los vertidos al mar son aguas residuales industriales que pueden contener metales pesados (Salamanca et al., 2004) y efluentes urbanos que pueden tener metales y compuestos farmacologicos (muchos de ellos conteniendo Hg) debido al aumento del consumo por la poblacion humana y el uso en animales (Jones et al., 2005; Heberer, 2002). En el litoral del norte y centro de Chile las corrientes oceanicas pueden movilizar los metales a grandes distancias (Celis et al., 2014) y podrian llegar hacia los sitios de anidacion de los pinguinos de Humboldt si las condiciones climaticas cambiaran, razon por la cual es preciso contar con un monitoreo continuo. La resistencia bacteriana en ecosistemas marinos y terrestres contaminados con metales como Hg, Cu, Pb, Ni y Zn (Rojas et al., 2014; Ball et al., 2007) significaria que la exposicion microbiana a tales metales pesados podria resultar en una seleccion indirecta de bacterias con resistencia a multiples antibioticos (Baker-Austin et al., 2006; Seiler y Berendonk, 2012). Puesto que los metales pesados son todos similares en sus mecanismos de toxicidad, la tolerancia a multiples metales es un fenomeno comun entre las bacterias resistentes a metales (Rajbanshi, 2008). De esta manera, aunque en nuestro estudio no se pudo probar, la exposicion a metales pesados podria estimular el desarrollo de cepas bacterianas nativas resistentes a antibioticos y viceversa si las condiciones cambiaran (Rojas et al., 2014). Debido al cambio climatico, los sistemas biofisicos y ecologicos estan siendo alterados, y como consecuencia de ello se estima que habra un aumento de las temperaturas en el norte y zona central de Chile (Gonzalez et al., 2009). Se sabe que las mayores temperaturas promueven la transmision de patogenos (Patz et al., 2005), lo cual implica que habra una mayor presion sobre los ecosistemas terrestres y marinos del norte y centro del pais. En esas condiciones, existe un escenario propicio para que muchas cepas nativas interactuen con las bacterias gastrointestinales que expulsa el pinguino de Humboldt cuando excreta en los lugares donde anida. El impacto que podrian tener las excretas de los pinguinos de Humboldt en los lugares donde estas aves anidan es un tema que requiere ser mas investigado.

Conclusiones

Las cepas resistentes a metales pesados encontradas en este estudio podrian afectar los ciclos organicos e inorganicos en los ambientes del litoral septentrional y central de Chile. A pesar de que no se encontraron evidencias que indiquen que la resistencia bacteriana a metales en los lugares estudiados esta fuertemente asociada a la resistencia a antibioticos, se noto cierta tendencia. En general, las cepas bacterianas aisladas de las excretas de pinguino presentan una mayor resistencia a metales pesados en los sectores que se encuentran mas cercanos al litoral, los cuales presentan los niveles mas elevados de metales pesados como consecuencia de las diferentes actividades antropogenicas. Esto permite localizar las zonas donde las actividades humanas impactan mayormente sobre estas especies de aves marinas, lo que seria un aporte para evaluar el grado de contaminacion debida a la actividad antropogenica y que podria estar afectando la fauna del litoral y la salud humana, y ayudara a la toma de decisiones adecuadas que apunten a la reduccion de las sustancias contaminantes en el ambiente.

AGRADECIMIENTOS

Este estudio ha sido financiado por la Vicerrectoria de Investigacion de la Universidad de Concepcion, a traves del proyecto 214.074.051-1.0. Los autores agradecen la colaboracion del personal de la Corporacion Nacional Forestal (CONAF) y del Servicio Nacional de Pesca (SERNAPESCA) para la obtencion de los permisos para la toma de datos en terreno.

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Zhang C, Hsu H, Li C (2012) Brevundimonas vesicularis bacteremia resistant to trimethoprim-sulfamethoxazole and ceftazidime in a tertiary hospital in southern Taiwan. J. Microbiol. Immunol. Infect. 45: 448-452.

Recibido: 10/03/2016. Modificado: 15/05/2017. Aceptado: 17/05/2017.

Winfred Espejo. Medico Veterinario. Candidato al doctorado, Centro EULA, Universidad de Concepcion (UdeC), Chile.

Marco Sandoval. Maestria en Edafologia, Universidad Autonoma Chapingo, Mexico. Doc tor en Ciencias Ambientales, Centro EULA- Chile. Profesor e Investigador, UdeC, Chile.

Jose E. Celis. Maestria en Recursos Naturales, Michigan State University, EEUU. Doctor en Ciencias Ambientales, Centro EULA-Chile. Profesor e Investigador, UdeC, Chile. Direccion: Departamento de Ciencia Animal, Facultad de Ciencias Veterinarias, UdeC. Av. Vicente Mendez 595, Chillan, Chile. e-mail: jcelis@udec.cl

Juana Lopez. Maestria en Ciencias, UdeC, Chile. Profesora e Investigadora, UdeC, Chile.

Fredy Riquelme. Tecnologo Medico. Profesional laborante, UdeC, Chile.

Caption: Figura 1. Ubicacion geografica de las colonias de pinguinos de Humboldt en la costa de Chile desde donde se obtuvieron las muestras de excretas.

Caption: Figura 2. Porcentajes de ocurrencia de las resistencias a los metales en las cepas analizadas en Isla Cachagua.
TABLA I
BACTERIAS AISLADAS EN EXCRETAS DEL PINGUINO DE
HUMBOLDT (Spheniscus Humboldti), CANTIDAD DE CEPAS
AISLADAS (N) Y SU NIVEL DE SUSCEPTIBILIDAD A LOS
ANTIBIOTICOS TESTEADOS

Familia                   Genero            Especie       Gram   N

Caulobacteriaceae    Brevundimonas       vesicularis      -      20
Enterobacteriaceae   Erwinia             spp.             -      18
Flavobacteriaceae    Chryseobacterium    indologenes      -      20
Flavobacteriaceae    Weeksella           virosa           -      21
Aerococcaceae        Aerococcus          viridans         +      30
Enterococcaceae      Enterococcus        faecium          +      20
Enterococcaceae      Enterococcus        durans           +      22
Enterococcaceae      Enterococcus        casseliflavus    +      21
Staphylococcaceae    Gemella             morbillorum      +      20
Pseudomonadaceae     Pseudomonas         spp.             -      28
Micrococcaceae       Micrococcus         luteus           +      21
Pasteurellaceae      Mannheimia          haemolytica      -      20

Familia                 Nivel de susceptibilidad *

Caulobacteriaceae    R (P) / S (OX, G, F, A, SU, CE)
Enterobacteriaceae   R (P, SU) / S (OX, G, F, A, CE)
Flavobacteriaceae    R (P) / S (OX, G, F, A, SU, CE)
Flavobacteriaceae    R (P) / S (OX, G, F, A, SU, CE)
Aerococcaceae        S (P, OX, G, F, A, SU, CE)
Enterococcaceae      S (P, OX, G, F, A, SU, CE)
Enterococcaceae      R (P) / S (OX, G, F, A, SU, CE)
Enterococcaceae      S (P, OX, G, F, A, SU, CE)
Staphylococcaceae    S (P, OX, G, F, A, SU, CE)
Pseudomonadaceae     R (P, SU) / S (OX, G, F, A, CE)
Micrococcaceae       S (P, OX, G, F, A, SU, CE)
Pasteurellaceae      R (P) / S (OX, G, F, A, SU, CE)

* R: Resistente / S: Sensible. OX: oxitetraciclina, P: penicilina,
G: gentamicina, F: florfenicol, A: amoxicilina, SU: sulfatrimet;
CE: cefapirina.

TABLA II
CONCENTRACIONES MINIMAS INHIBITORIAS (CMI)DE METALES PESADOS
PARA LAS BACTERIAS AISLADAS EN EXCRETAS DEL PINGUINO DE
HUMBOLDT EN TRES LOCALIDADES DE LA COSTA DE CHILE

Localidad    Bacterias aisladas               CMI ([micro]g x
                                               [ml.sup.-1]) *

                                           Pb       As       Cu

1            Chryseobacterium indogenes    800      1600     1600
             Micrococcus luteus            800      1600     800
             Mannheimia haemolytica        1600     1600     400
             Erwinia spp.                  1600     1600     800
             Pseudomonas spp.              1600     1600     1600
             Enterococcus casseliflavus    1600     1600     400
             Brevundimonas vesicularis     1600     1600     1600
2            Chryseobacterium indogenes    800      800      400
             Brevundimonas vesicularis     800      800      400
             Aerococcus viridans           800      800      400
             Weeksella virosa              800      800      400
             Enterococcus casseliflavus    800      800      400
             Gemella morbillorum           800      800      400
             Micrococcus luteus            800      800      400
             Pseudomonas spp.              800      800      400
3            Chryseobacterium indogenes    >3200    >3200    1600
             Enterococcus durans           >3200    >3200    1600
             Enterococcus faecium          >3200    >3200    1600
             Pseudomonas spp.              >3200    >3200    1600
             Enterococcus casseliflavus    >3200    >3200    1600
             Brevundimonas vesicularis     >3200    >3200    1600

Localidad    CMI ([micro]g
             x [ml.sup.-1]) *

             Zn      Cd

1            >1600   200
             >1600   100
             >1600   >400
             >1600   100
             >1600   >400
             >1600   200
             >1600   >400
2            >1600   100
             >1600   100
             >1600   100
             >1600   200
             >1600   200
             >1600   200
             >1600   100
             >1600   100
3            >1600   200
             >1600   >400
             >1600   >400
             >1600   >400
             >1600   100
             >1600   >400

* Concentracion minima del metal que resulto inhibitoria para el
crecimiento bacteriano. 1: Isla Pan de Azucar, Cachagua.
2: Isla Chanaral, 3: Isla

TABLA III
CONCENTRACIONES MEDIAS DE METALES PESADOS * Y PORCENTAJE
DE CEPAS RESISTENTES AISLADAS DESDE EXCRETAS DE PINGUINOS
DE HUMBOLDT OBTENIDAS EN ESTE ESTUDIO

Metales         Isla Pan de Azucar

          [micro]g x [g.sup.-1]      %

Cu                148,8             43
As                 1,9              100
Pb                 1,8              71
Cd                 47,7             43
Zn                487,1             100

Metales           Isla Chanaral

          [micro]g x [g.sup.-1]      %

Cu                 69,6              0
As                 0,4               0
Pb                 1,6               0
Cd                 21,2              0
Zn                222,5             100

Metales          Isla Cachagua

          [micro]g x [g.sup.-1]      %

Cu                199,7             100
As                 7,9              100
Pb                 12,8             100
Cd                 42,5             67
Zn                 0,8              100

* Reportadas por Celis et al. (2014); [micro]g [g.sup.-1],
peso seco.
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Author:Espejo, Winfred; Sandoval, Marco; Celis, Jose E.; Lopez, Juana; Riquelme, Fredy
Publication:Interciencia
Date:May 1, 2017
Words:5392
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