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Observaciones morfohistologicas del testiculo y espermatozoides de Microlophus peruvianus (Lesson, 1826) (Sauria:Tropiduridae).

Morphohistological observations on testicle and spermatozoa of Microlophus peruvianus (Lesson, 1826) (Sauria:Tropiduridae)

Resumen

El presente trabajo proporciona informacion morfohistologica de los testiculos y espermatozoides de 5 individuos de la lagartija peruana Microlophus peruvianus (Lesson, 1826), procedentes de Huaral, Lima (11[grados] 26'S; 77[grados]24'W); colectados durante el mes de setiembre de 2005. El trabajo de campo se combino con el analisis de laboratorio de las gonadas. La longitud promedio hocico-cloaca fue de 91,3mm [+ o -] 13,655, encontrandose todos los individuos con gran actividad meiotica en la linea espermatogenica con un grosor del epitelio germinativo de 126,33 m[micron][+ o -] 0,092, lo que sugiere que el mes de colecta estaria dentro de su ciclo activo de reproduccion. La linea espermatogenica presenta los tipos celulares tipicos de la espermatogenesis: espermatogonias (3,544 m[micron] [+ o -] 0,4513), espermatocitos primarios (4,864 m[micron] [+ o -] 0,5292), espermatides (2,85 m[micron] [+ o -] 0,4071); no se encontraron espermatocitos secundarios. La morfologia y biometria del espermatozoide de M. peruvianus propone su importancia como valor taxonomico.

Palabras clave: Microlophus peruvianus, lagartija, reproduccion, espermatozoide, testiculo.

Abstract

The present work provides morphological and histological information of the testicles and spermatozoon of 5 specimens of the Peruvian small lizard Microlophus peruvianus (Lesson, 1826), from Huaral, Lima (11[grados] 26'S; 77[grados]24'W); collected during September, 2005. The fieldwork was combined with the gonads analysis at the laboratory. The snout-sewer length average was 91,3mm [+ o -] 13.655; all specimens deals a great spermatogenic meiotic activity showing a germinative epithelium thickness of 126.33 m[micro][+ o -] 0.092, which suggests that the month of collect would be within its active cycle of reproduction. The spermatogenic cells present the typical cellular types of the spermatogenesis: spermatogonias (3.544 m[micro][+ o -] 0.4513), primary espermatocitos (4.864 m[micro][+ o -] 0.5292), spermatids (2.85 m[micro] [+ o -] 0.4071); No secondary spermatocytes where founded. The morphology and biometry of the spermatozoon of M. peruvianus proposes its importance as taxonomic value.

Keywords: Microlophus peruvianus, lizard, reproduction, spermatozoon, testicle.

Introduccion

Microlophus peruvianus (Lesson, 1826) <<lagartija peruana>>, es un saurio comun de la herpetofauna costena; se distribuye desde el suroeste del Ecuador hasta el norte de Chile; en el Peru se le encuentra a lo largo de toda la costa, en particular en la zona intermareal (Catenazzi et al., 2005).

Perez & Jahncke (1998) han resaltado su importancia como controlador de ectoparasitos de aves marinas. Esta especie al igual que otros reptiles del ecosistema costero ha sido poco estudiada y clasificada en la categoria de Datos Insuficientes dentro de las especies amenazadas (Icochea, 1998). La unica referencia sobre aspectos reproductivos de esta especie lo ofrecen Dixon y Wright (1975), quienes sugirieron un largo periodo reproductivo (Julio a Diciembre), de acuerdo a observaciones de foliculos ovaricos vitelogenos y huevos oviductales. Por otro lado los espermatozoides en estas lagartijas tienen un alto valor taxonomico (Texeira et al., 1999; Ferreira & Dolder, 2003).

En el presente trabajo se realiza la descripcion morfohistologica testicular y de sus espermatozoides de Microlophus peruvianus.

Materiales y metodos

En Huaral, Lima (11[grados] 26' S; 77[grados] 24'W), fueron colectados 5 individuos machos adultos de M. peruvianus, en septiembre de 2005. Los especimenes vivos fueron transportados al laboratorio, donde fueron pesados y registrada la longitud hocico-cloaca (SVL) mediante un vernier (0,1mm).

Los individuos fueron sacrificados dentro de las 24 horas luego de su captura, para evitar que el estres de la cautividad altere los resultados. Luego de la diseccion, el aparato reproductor de cada individuo fue extraido, pesado y medido. Se obtuvo el volumen de los testiculos usando la siguiente formula:

4/3[pi]x [(h/2).sup.2] x L

Donde <<h>> es la altura y <<L>> el largo del testiculo.

Los testiculos fueron fijados en formol acetico al 5% y se procesaron para el protocolo histologico, finalmente coloreados con Hematoxilina-Eosina.

Se realizaron observaciones con un microscopio de luz y se tomaron fotografias digitales. Mediante un ocular micrometrico, para cada individuo se determino el diametro del tubulo seminifero (STD), diametro de lumen (LD), grosor de capa albuginea(GA), y grosor del epitelio germinativo(GEH), ademas, se identificaron y midieron los tipos celulares espermatogenicos utilizando el objetivo de inmersion.

Para la evaluacion morfologica de los espermatozoides, se obtuvo una muestra de la cola del epididimo, la que fue colocada en solucion salina (NaCl 0,9 %); se realizo un frotis y se colorearon las laminas con Hematoxilina-Eosina, luego fueron observados y fotografiados. Se midio la cabeza, pieza intermedia y cola de espermatozoides maduros.

Se tabularon los resultados y se obtuvieron promedios con sus respectivas desviaciones estandar (SD); asimismo la correlacion lineal entre la longitud hocico-cloaca y el peso testicular.

Resultados

Las medias de los pesos, longitudes y volumen son mostrados en la tabla 1. Microlophus peruvianus presenta testiculos de coloracion crema de forma oval, recubiertos por la capa albuginea (CA) fibrosa, resistente y algo pigmentada (negrusco); en la tabla 2 se presenta las medias de la CA, el diametro promedio de los tubulos seminiferos de esta especie es de 233,8 ?m, con un diametro promedio de la luz del tubulo de 107,16 ?m (Tabla 2) (Fig 2B).

Se encontro que uno de los especimenes carecia del testiculo derecho.

Los tipos celulares identificados y evaluados fueron:

Espermatogonias: adyacentes a la membrana basal, cuyo diametro promedio es de 3,54 m.

Espermatocitos Primarios: celulas mas coloreadas y de mayor tamano; presentaron un diametro promedio de 4,86 [micron]m.

Espermatides: celulas que se encuentran proximos al lumen del tubulo seminifero; con un diametro promedio de 2,85 [micron]m.

Espermatozoides: ubicados en el lumen. (Tabla 3) (Fig 2A y B)

La estructura basica general de los espermatozoides maduros de M peruvianus presenta una apariencia filiforme, con una longitud total promedio de 79,4 ?m; la cabeza es lanceolada y alargada mide 13,89 ?m. La longitud de la pieza intermedia es 2,5 [micron]m en promedio. La medida de la cola es de 62,9 [micron]m. (tabla 4) (Fig 2C).

Discusion

La cantidad de capas con tipos celulares diferentes de la linea espermatica indicaria que los individuos se encontraban en epoca reproductiva, lo cual concuerda con Dixon y Wright (1975), que indican la estacion reproductiva entre julio y diciembre. La presencia de diferentes lineas celulares, nos indica una alta actividad mitotica; este patron, asi como los volumenes testiculares (129 [mm.sup.3]) y los diametros de los tubulos seminiferos (STD = 0,234 [micron]m), son similares al patron observado durante el estadio IV del ciclo testicular (auge de la espermiogenesis) de Tropidurus torquatus descrito por Vieira et al.,(2001), (volumen testicular de 145 [mm.sup.3], STD= 0,256 [micron]m). Esto podria indicar que algunas especies de la familia Tropiduridae presentan sincronia en el desarrollo de la espermiogenesis y de sus ciclos reproductivos, al igual que lo que sucede con los Phrynosomatidae (Hernandez-Gallego et al., 2002).

No fueron observados espermatocitos secundarios, posiblemente por a la escasez de estos estadios, o por la necesidad de una tecnica de coloracion mas diferencial.

Comparando la longitud total promedio y la forma de los espermatozoides maduros de M. peruvianus (Tropiduridae) con los de Gambelia wislizenii (Crotaphytidae), Crotaphytus bicinctores (Crotaphytidae) y Anolis carolinensis (Polychrotidae) se observan diferencias estructurales y de tamanos, lo cual nos indica que la morfologia de los espermatozoides podrian usarse como caracteres taxonomicos (Tabla 6).

[FIGURA 1 OMITIR]

Literatura citada

Catenazzi A, Carrillo J, and Donnelly M. Seasonal and geographic eurythermy in a coastal Peruvian lizard. Copeia 2005;(4):713-723

Dixon J & Wright J. A review of the lizard of the iguanid genus Tropidurus in Peru. Contribution in Science. The Natural History Museum of Los Angeles. 1975; Pp: 1-39.

Ferreira A & Dolder H. Sperm ultrastructure and spermatogenesis in the lizard, Tropidurus itambere. Biocell 2003; 27(3):353-362.

Hernandez-Gallegos O, Mendez-De la Cruz F, Villagran-Santacruz M, and Andrews R. Continuous spermatogenesis in the lizard Sceloporus bicanthalis (sauria: phrynosomatidae) from high elevation habitat of Central Mexico. Herpetologica 2002; 58(4):415-421

Icochea J. Lista Roja Preliminar de los Anfibios y Reptiles Amenazados del Departamento de Lima. Museo de Historia Natural de la UNMSM. Serie de Divulgacion 1998; 11: 217-229.

Perez J y Jahncke J. Saurios como predadores de ectoparasitos de aves guaneras. Bol Inst Mar Peru (Callao) 1988; 17 (1 y 2): 112-117.

Vieira G, Wiederhecker H, Colli G, & Bao S. Spermiogenesis and testicular cycle of the lizard Tropidurus torquatus (Squamata, Tropiduridae) in the cerrado of central Brazil. Amphibia-Reptilia 2001; 22: pp.217-233.

Cesar Ramirez *, Jose Gonzales, Jose Pino y Betty Shiga

Facultad de Ciencias Biologicas, Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

* Direccion: Laboratorio de Reproduccion y Biologia del Desarrollo. Facultad de Ciencias Biologicas. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Casilla Postal 11-0058. Lima 11. Lima, Peru.

Email Cesar Ramirez: cesynho66@yahoo.com
Tabla 1. Morfometria de Microlophus peruvianus (n = 5) y medidas
del testiculo (n = 9)  (media [+ o -] SD)

Longitud hocico-cloaca (SVL)                 91,3mm [+ o -] 13,66
Peso de testiculo (W Test)                    0,09g [+ o -] 0,03
Altura de testiculo (H)                       5,8mm [+ o -] 0,34
Largo de testiculo (L)                        7,3mm [+ o -] 1,55
Volumen de testiculo (Vol. Test.)     129[mm.sup.3] [+ o -] 0,29

Tabla 2. Medidas del Tubulo seminifero de Microlophus peruvianus,
en [micron]m, n = 24, media [+ o -] SD.

Grosor Capa Albuginea (GA)                    35,27 [+ o -] 23,63
Diametro Tubulo Seminifero (STD)             233,79 [+ o -] 40,28
Diametro Lumen Tubulo Seminifero (SLD)       107,16 [+ o -] 31,04
Grosor del epitelio germinativo (GEH)        126,33 [+ o -] 0,09

Tabla 3. Diametros de las celulas de la Linea Espermatogenica de
Microlophus peruvianus. Medidas en [micron]m, n = numero de celulas
evaluadas, media [+ o -] SD.

Espermatogonias (n = 500)   3,544 [+ o -] 0,4513
Espermatocitos (n = 500)    4,864 [+ o -] 0,5292
Espermatides (n = 100)      2,849 [+ o -] 0,4071

Tabla 4. Longitudes del espermatozoide maduro de
Microlophus peruvianus. Medidas en [micron]m, n = 200.
media [+ o -] SD.

Longitud total          79,4 [+ o -] 3,584
Cabeza                13,895 [+ o -] 0,787
Pieza intermedia       2,546 [+ o -] 0,253
Cola                   62,94 [+ o -] 3,964

Tabla 5. Comparacion de dimensiones testiculares entre Tropidurus
torquatus y Microlophus peruvianus.

                               GEH ([micro]m)

                         promedio      n         SD

Microlophus peruvianus      78        108       0,013
Tropidurus torquatus      126,33       24       0,092

                               STD ([micro]m)

                         promedio      n         SD

Microlophus peruvianus     256        115       0,046
Tropidurus torquatus     233,798       24       0,040

                             Volumen ([mm.sup.3])

                         promedio      n          SD

Microlophus peruvianus    145,9       113       61,905
Tropidurus torquatus       129         9        0,2989

Tabla 6. Comparacion biometrica de espermatozoides de Microlophus
peruvianus con otros saurios. Medidas en [micron]m.

                                Longitud Total

                           Promedion     n      SD

Crotaphytus bicinctores       85,5       32    11,6
Gambelia wislizenii           98,8       19     4,0
Anolis carolinensis           83,2       32     2,3
Microlophus peruvianus        79,4      200   3,584

                                      Cabeza

                           Promedio      n      SD

Crotaphytus bicinctores       20,0       33    0,06
Gambelia wislizenii           20,2       35     0,9
Anolis carolinensis           16,5        6     0,2
Microlophus peruvianus       13,895     200   0,787

                                Pieza intermedia

                            Promedio      n     SD

Crotaphytus bicinctores       3,99        9    0,21
Gambelia wislizenii           4,97        8     0,2
Anolis carolinensis           4,61       15    0,24
Microlophus peruvianus        2,54      200   0,253

                                      Cola

                            Promedio      n     SD

Crotaphytus bicinctores       57,2       18    11,8
Gambelia wislizenii           76,8       14     4,6
Anolis carolinensis           63,3        8     2,6
Microlophus peruvianus       62,94      200   3,964
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Author:Ramirez, Cesar; Gonzales, Jose; Pino, Jose; Shiga, Betty
Publication:Revista peruana de biologia
Date:Jul 1, 2007
Words:2023
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