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Linfoma difuso de celulas B rico en celulas T en un canino: reporte de caso.

Canine diffuse lymphoma of B-cell rich in T-cell: a case report

Linfoma difuso de celulas B rico em celulas T em um canino: relato de caso

Introduccion

El linfoma es un tumor maligno que se origina de los linfonodos y tejido linfatico, corresponde entre el 5-24% de las condiciones neoplasicas del perro (1, 2, 3).

Esta neoplasia se presenta en caninos, comunmente entre los 6 a 12 anos de edad, sin diferencias entre sexos (1, 4, 5), siendo la alteracion linfoproliferativa de mayor incidencia en pequenos animales (6).

Las clasificaciones de los linfomas han sido diversas y han ido evolucionando en los ultimos anos. La mayoria de los esquemas han sido adaptados de linfomas humanos. La clasificacion de la Kiel y Working Formulation, consideran unicamente los criterios morfologicos, como el crecimiento dentro del linfonodulo (nodular o difuso), y el tamano de las celulas neoplasicas (pequenas, grandes o mixtas) (7). La clasificacion propuesta por la Organizacion Mundial de la Salud (OMS) en 2008 separa los linfomas desde su origen celular como celula precursora o celula madura y define cada tipo segun caracteristicas clinicas, morfologicas, inmunofenotipicas y geneticas (8-10) obteniendo como ventaja la caracterizacion de los linfomas extraganglionares, distinguiendo cada entidad histopatologica segun la diferenciacion, tamano celular y la agresividad (9-11). La aplicacion de la clasificacion histologica de la OMS es un sistema practico para patologos veterinarios no especialistas en hematopatologia (12, 13) (Tabla 1, Figura 1).

La localizacion mas comun corresponde a los linfonodos del cuello, y supraclaviculares. Segun el sitio de su ocurrencia, el linfoma se puede dividir en: multicentrico, gastrointestinal, cutaneo, del sistema nervioso central y nodo extra-linfatico entre otros (1).

El linfoma multicentrico corresponde a la presentacion mas frecuente; el linfoma de celulas B se presenta en un 60% a 70% y el originario de celulas T en un 30% a 40% de los casos (1, 15, 16). Un 7,5% de los casos corresponden a otros tipos de linfomas (5, 7).

Los signos clinicos mas tipicos se manifiestan con agradamiento progresivo, cambios en consistencia y textura y dolor de los linfonodos; su presentacion frecuentemente se asocia con un historial de enfermedad no definida, inapetencia con un curso de dias o unas pocas semanas. La signologia clinica presentada refleja la disfuncion del tejido u organo afectado como ulceras, vomito, ictericia, entre otros (1,17). Las anormalidades en el laboratorio clinico son poco especificas a excepcion de la presencia de hipercalcemia en un 20 a 40% de los linfomas de celulas T y la deteccion en sangre periferica de linfocitos anormales en un 10 a 20% de los casos de linfomas de celulas B (18, 19).

El diagnostico de neoplasias linfoides es un proceso que requiere de varias etapas que incluye el examen clinico, diagnostico por imagen, citologia, hematologia, perfil bioquimico, histopatologia y tecnicas auxiliares como la citometria de flujo e inmunofenotificacion (20).

La inmunofenotipificacion puede realizarse mediante citometria de flujo y por inmunohistoquimica, la ventaja de la primera es que se pueden analizar muestras mas pequenas obtenidas mediante tecnicas menos invasivas. En contraste, la inmunohistoquimica tiene como ventaja la identificacion de los subconjuntos de celulas conservando la arquitectura de los nodulos linfaticos (21).

El diagnostico de linfoma maligno se realiza por histopatologia y citologia, siendo la inmunohistoquimica, fundamental para los casos donde no se puede alcanzar una caracterizacion histologica precisa que permita establecer la linea celular involucrada e instaurar un protocolo terapeutico adecuado (1, 10).

Una adecuada metodologia de diagnostico permite establecer una aproximacion diagnostica mas precisa de las neoplasias derivadas del sistema linfoide. El objetivo del articulo consiste en reportar un caso de un Linfoma difuso de celulas grandes de celulas B rico en celulas T de bajo grado de comportamiento multicentrico diagnosticado mediante evaluacion histopatologica e inmunohistoquimica en un canino.

Descripcion del caso

En febrero de 2016 se remite al area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino, Pasto, Colombia, un canino hembra mestiza de ocho anos de edad y 19 kg de peso para realizar una biopsia por aspiracion con aguja fina (BACAF) de masas submandibulares y linfonodos popliteos.

En los anamnesicos, el propietario reporta la presencia de dos masas en el cuello, decaimiento, anorexia y perdida de peso, desconociendo el tiempo de evolucion del problema. Al examen clinico se evidenciaron dos masas localizadas bilateralmente en la region mandibular de 8 cm de diametro aproximadamente, de consistencia firme e indoloras a la palpacion, linfonodos popliteos e inguinales aumentados de tamano, consistencia dura y moviles, tonsilas aumentadas de tamano, mamas abdominales e inguinales con evidencia de proceso inflamatorio (Figura 2), adicionalmente, se observo alopecia bilateral simetrica en la zona perianal y region abdominal. En el hemograma se reporto eritrocitosis y leucocitosis con neutrofilia, linfocitosis, eosinofilia y monocitosis.

En la evaluacion citologica de las masas submandibulares se evidencio proliferacion neoplasica de celulas redondas de caracteristica linfoide, de gran tamano con evidente alteracion morfologica tanto celular como nuclear (pleomorfismo celular y nuclear, anisocitosis y anisocariosis, megalocitosis y megalocariosis), cromatina de aspecto de grumos, nucleolos evidentes y figuras mitoticas normales y atipicas sugestivo de un linfoma (Figura 3a).

En la evaluacion citologica de los linfonodos popliteos adicionalmente se observo poblacion celular heterogenea (macrofagos, celulas plasmaticas y linfocitos), gran cantidad de linfocitos reactivos, debido al aumento de su tamano, basofilia del citoplasma y la irregularidad de la membrana (Figura 3b).

Debido a las caracteristicas reportadas en la evaluacion citologica, el propietario decidio realizar eutanasia y necropsia para evaluacion macroscopica y microscopica.

Evaluacion anatomopatologica

Descripcion macroscopica

Apariencia externa. condicion corporal 4/5, membranas mucosas oral y conjuntival moderadamente palidas.

Piel y anexos. Presencia de gran cantidad de material acuoso de aspecto serosanguinolento en tejido subcutaneo, presencia de multiples focos de hemorragia localizados en tejido subcutaneo de la region abdominal e inguinal.

Sistema linfatico. Nodulos linfaticos submandibulares, inguinales, cervicales, mesentericos, mediastinicos, axilares, preescapulares, y mamarios severamente aumentados de tamano con dimensiones que comprenden entre 3 cm hasta 8 cm de diametro, coloracion beige de consistencia semidura al corte (Figuras 4a y 4b). Bazo con severo aumento de tamano, presencia de areas de coloracion blanquecina, de forma irregular de aproximadamente 1 cm de diametro con distribucion multifocal las cuales profundizan al corte (Figura 4e). Medula osea de coloracion rojiza y de aspecto hemorragico.

Sistema digestivo. Cavidad abdominal con gran cantidad de liquido acuoso de aspecto serosanguinolento. Estomago moderadamente distendido, mucosa con multiples areas de aspecto hemorragico con distribucion multifocal. Intestino: serosa con areas hemorragicas distribuidas sobre el borde mesenterico de yeyuno, ileon y colon. Mucosa con moderada cantidad de material de aspecto mucoide de coloracion beige en duodeno y yeyuno y de color verde oscuro en ileon, ciego y colon. Higado con moderado aumento en su tamano y bordes ligeramente redondeados (Figura 4c). Pancreas moderadamente palido y presencia de areas de aspecto hemorragico entremezcladas con focos blanquecinos de distribucion multifocal (Figura 4d).

Sistema cardiorespiratorio. Cavidad toracica con gran cantidad de liquido de aspecto serosanguinolento, con presencia de floculos y material de aspecto fibrinoso. Presencia de multiples adherencias que comprometen pared toracica, diafragma corazon y pulmones. Arbol traqueobronquial con abundante cantidad de material de aspecto espumoso, pulmones severamente palidos con presencia de multiples areas de forma irregular de tamanos variables de coloracion blanquecina distribuidas al azar en el parenquima pulmonar. Saco pericardico con moderada cantidad de material de aspecto acuoso. Corazon con moderado aumento de tamano, de forma redondeada y septo moderadamente desviado.

Sistema genitourinario. Vejiga con multiples focos de aspecto hemorragico distribuidas al azar en serosa y mucosa de aspecto engrosado con areas de aspecto hemorragico de distribucion multifocal. Rinones con moderada congestion en region corticomedular, se observa moderada dilatacion de pelvis renal y los ureteres, mucho mas acentuada en el ureter del lado derecho.

Sistema nervioso. aparentemente normal

Diagnostico de necropsia. Los hallazgos macroscopicos evidencian un proceso tumoral aparentemente neoplasico de origen linfoide, de comportamiento multicentrico; adicionalmente las alteraciones observadas en tracto gastrointestinal sugieren una moderada enterocolitis catarral, y los hallazgos en el sistema genitourinario no descartan la participacion de un proceso inflamatorio de tipo infeccioso secundario en vejiga ascendente a traves de las vias urinarias.

De acuerdo a los resultados de la evaluacion macroscopica se tomaron muestras de nodulos linfaticos, bazo, medula osea, pulmones, rinon, musculo estriado, piel, glandula salival parotida y tejido adiposo. Se fijaron en formol bufferado al 10%, se cortaron y se procesaron mediante la tecnica de inclusion en parafina y coloracion de Hematoxilina--Eosina (H/E) para evaluacion histopatologica.

Evaluacion microscopica H/E

Nodulos linfaticos. Se evidencia proliferacion celular neoplasica de origen linfoide la cual presenta un patron de crecimiento infiltrativo que compromete la corteza y medula. Las celulas son de forma redondeada, de pequeno tamano, basofilicas intensas, se distribuyen en forma de paquetes celulares densos pobremente delimitados por estroma de tejido conectivo, nucleo de gran tamano y escaso citoplasma; se evidencia moderado pleomorfismo celular, moderada anisocitosis, y moderada megalocitosis. Se observa moderado pleomorfismo nuclear, moderada anisocariosis y severa megalocariosis. Se contabilizaron tres figuras mitoticas en diez campos al azar a 400x. Adicionalmente se evidencio presencia de celulas neoplasicas comprometiendo la pared de vasos linfaticos y celulas neoplasicas en el interior de los mismos (Figuras 5a, 5b, 5c).

Higado. Moderados cambios microcirculatorios, focos de congestion y hemorragia con distribucion multifocal y centrolobulillar, presencia de multiples y extensas areas de infiltrado de celulas neoplasicas de tipo linfoide con distribucion predominantemente centrolobulillar y perilobulillar (Figura 5d).

Pancreas. Moderados cambios microcirculatorios, focos de congestion y hemorragia con distribucion multifocal, se evidencia areas de metastasis e infiltracion de celulas neoplasicas correspondientes a celulas aparentemente de origen linfoide (Figura 5e, 5f).

Bazo. Moderados cambios microcirculatorios focos de congestion hemorragia enlodamiento y eritrofagocitosis. En pulpa blanca se evidencia proliferacion celular neoplasica de tipo linfoide las cuales se organizan formando paquetes celulares densos pobremente delimitados, con un patron de crecimiento infiltrativo que se extiende de forma difusa sobre la pulpa roja. Las celulas son de forma redondeada, de pequeno tamano, basofilicas intensas con moderado pleomorfismo celular, moderada anisocitosis, y moderada megalocitosis. Se observo moderado pleomorfismo nuclear, moderada anisocariosis y severa megalocariosis. Se contabilizaron dos figuras mitoticas en diez campos al azar a 400x. Adicionalmente se evidenciaron multiples areas de linfocitolisis (Figura 5g).

Intestino delgado. Se evidencia severos cambios microcirculatorios, multiples focos de congestion, hemorragia y enlodamiento con distribucion multifocal en mucosa, submucosa, muscular. La luz con gran cantidad de detritos celulares, se evidencia focos con modera atrofia y fusion de las vellosidades, focos con cambios asociados a muerte celular en la punta de la vellosidad y escasos focos de hiperplasia del epitelio que recubre la mucosa, nucleos con picnosis, cariorrexis y cariolisis, moderado infiltrado inflamatorio linfoplasmocitario con distribucion difusa, severo edema de la submucosa (Figura 6a).

Intestino grueso. Con similares cambios reportados en el Intestino delgado, pero con menor severidad.

Pulmones. Severos cambios microcirculatorios y multiples y extensas areas de congestion, hemorragia, enlodamiento y edema con distribucion difusa, presencia de multiples focos correspondientes a celulas neoplasicas de origen linfoide; adicionalmente en epitelio bronquiolar se evidencian focos con cambios asociados a muerte celular, areas de moderada hiperplasia del mismo, moderada hiperplasia de celulas caliciformes, focos de aplanamiento del epitelio bronquiolar y severo infiltrado inflamatorio predominantemente mononuclear compuesto por macrofagos, celulas plasmaticas y escasos PMNs neutrofilos con distribucion bronquiointersticial (Figura 6b).

Piel. Epidermis aparentemente normal, en la dermis se evidencia proliferacion celular neoplasica de celulas origen linfoide la cual se organiza a manera de paquetes celulares densos y en algunos areas se organizan en forma de cordones pobremente delimitados por estroma de tejido conectivo que compromete a dermis superficial, dermis profunda, y tejido subcutaneo y tejido muscular. Las celulas son de forma redondeada nucleos grandes muy escaso citoplasma con moderado pleomorfismo celular, moderada anisocitosis, y moderada megalocitosis. Se evidencia moderado pleomorfismo nuclear, moderada anisocariosis y severa megalocariosis. No se contabilizaron figuras mitoticas en diez campos al azar a 400X, adicionalmente se evidencio la presencia de celulas neoplasicas dentro de lumen de algunos vasos sanguineos (Figura 6c).

Tejido adiposo. Presencia de extensas areas correspondientes a proliferacion de celulas neoplasicas de origen linfoide con caracteristicas similares a las mencionadas en higado y pancreas (Figura 6d).

Medula osea. Se evidencia severo aumento de la fraccion celular con presencia multiples focos de celulas neoplasicas aparentemente de origen linfoide (Figuras 6e, 6f). Rinon. Severos cambios microcirculatorios, focos de congestion, hemorragia, y enlodamiento con distribucion multifocal. En la corteza se evidencia glomerulos con severa retraccion glomerular y glomeruloesclerosis; Sin embargo, se observan algunos focos con presencia de glomerulos de aspecto tumefacto. Se observan areas con moderado aumento en el espacio de bowman, presencia de material eosinofilico homogeneo y focos de obsolescencia glomerular. Medula: Epitelio tubular con areas con cambios asociados a muerte celular. Nucleos con picnosis, cariorrexis y cariolisis. Tubulos con presencia de material eosinofilico compatible con proteina, cilindros hialinos y depositos de mineral.

Musculo estriado. Presencia de infiltracion de celulas neoplasicas de origen linfoide con caracteristicas similares a las mencionadas en los demas tejidos como pancreas, pulmon, higado, bazo.

Parotida. Moderados cambios microcirculatorios, multiples focos de congestion y hemorragia con distribucion multifocal y presencia de celulas neoplasicas las cuales infiltran el parenquima funcional aparentemente de origen linfoide con caracteristica similar a las reportadas en los demas tejidos.

Diagnostico H/E

Los hallazgos microscopicos corresponden a un linfoma difuso de celulas grandes de comportamiento multicentrico.

Evaluacion inmunohistoquimica

Con base en los resultados de la evaluacion microscopica en H/E; se emplearon anticuerpos inmunohistoquimicos para CD45, (marcador de tumores de celulas redondas) DAKO[R], CD3 (marcador de eleccion para tumores de linfocitos T) DAKO[R] y CD79a (marcador de eleccion para tumores derivados de linfocitos B) DAKO[R] dirigidos contra anticuerpos humanos obtenidos de cultivo celular de raton y conejo (tabla 2). Los cuales se aplicaron a medula osea, nodulos linfaticos y piel y fueron contrastados con hematoxilina de Meyer. El procedimiento se realizo en Inmunotech Laboratories SAS, Bogota, Colombia.

Se observo leve inmunomarcacion para CD45 y una moderada inmunomarcacion para CD3 y CD79a en las celulas neoplasicas de nodulo linfatico, piel y medula osea (Tabla 2). Sin embargo, la intensidad de la inmunomarcacion vario en diferentes areas del tejido; siendo fuerte en algunas regiones, moderada en otras y escasa en algunos focos (Figuras 7, 8, 9).

Diagnostico final

Los hallazgos evidenciados en las laminas de H/E y los resultados en la evaluacion inmunohistoquimica corresponden a una neoplasia maligna de origen linfoide con presencia de celulas B y celulas de tipo T que de acuerdo a la clasificacion de la OMS se cataloga como un linfoma difuso de celulas B rico en celulas T de bajo grado, de comportamiento multicentrico con metastasis en pancreas, higado, pulmon, intestino delgado, medula osea y piel. Adicionalmente, se evidencia moderada enterocolitis necrotica de origen bacteriano y moderada bronconeumonia mononuclear bacteriana.

Discusion

El presente reporte constituye el primer intento de aproximacion diagnostica de neoplasias linfoides en perros empleando marcadores inmunohistoquimicos en el area de catedra y servicio de patologia veterinaria en la Universidad de Narino.

Respecto a la forma de presentacion del tumor, Sueiro et al. (2004) mencionan que el 74,5% de los casos corresponden a la forma multicentrica lo cual coincide con este reporte; adicionalmente los mismos autores mencionan que de estos, el 72,7% corresponden a linfomas de celulas B y el 21,8 % representan neoplasias de celulas T (22).

Valli et al., basados en la clasificacion de la OMS, catalogaron 992 casos de linfoma, encontrando que el linfoma difuso de celulas grandes B corresponde al 39,3% de los linfomas en caninos (13). En el presente caso se evidencio la manifestacion multicentrica de un linfoma de celulas B rico en celulas T de organizacion difusa, que, de acuerdo a la clasificacion de la OMS, corresponde a lo descrito para los casos de linfoma difuso de celulas B rico en celulas T. Sin embargo, el reporte constituye una aproximacion diagnostica y para confirmarlo, se sugiere el empleo de un panel mas completo de marcadores inmunohistoquimicos para tener mayor precision diagnostica.

En Colombia se presentan diagnosticos de tumores linfoides, pero la mayoria de estos se limitan al diagnostico morfologico y caracteristicas clinicas, debido a que el uso de marcadores inmunohistoquimicos en medicina veterinaria es de poco uso, es por eso que para este caso se empleo los marcadores y metodologia que usualmente se utiliza en medicina humana. Se recomienda el empleo de CD34, el cual se expresa en celulas linfoproliferativas progenitoras, CD21 el cual inmunomarca para celulas B maduras, CD20 util en la expresion de celulas B inmaduras, CD9 el cual permitiria descartar posibles leucemias linfociticas de celulas B cronicas, y CD 20 util para diferenciar celulas B (5,15), lo cual permitiria tener mayor precision diagnostica, debido a que nos permiten descartar otras entidades neoplasicas de linfocitos B.

De igual forma Meuten (2002), Wilkerson et al. (2005) y Willman et al. (2009) afirman que inmunotipificacion celular resulta ser el factor mas importante asociado con el pronostico en los linfomas; debido que esta tecnica permite identificar un linaje o estado de diferenciacion del linfocito, comprobandose que el linfoma de celulas T tiene un peor pronostico que el linfoma de celulas B (5, 21, 23).

Wilkerson et al. (2005), Martini et al. (2015) y Pawlak (2014), proponen el siguiente panel para inmunofenotipificacion de linfomas caninos: CD45, CD44, CD18 (Todos los leucocitos); CD3, CD5 (Linfocitos T); CD4 (Linfocitos T colaboradores); CD8 (Linfocitos T citotoxicos), CD21, IgG de superficie (linfocitos B maduros), IgM de superficie (linfocitos B inmaduros); CD14 (Monocitos); CD172a (Granulocitos/ monocitos); CD34 (Celula madre); CD79a (linfocitos B todas las etapas, es un marcador util para distinguir Celulas B inmaduras de tumores de celulas plasmaticas) (21, 24, 25).

Por lo anteriormente expuesto el diagnostico histopatologico e inmonohistoquimico tiene ventajas con respecto al diagnostico citologico, ya que las caracteristicas tisulares, como patron, invasion de tejidos adyacentes, linea celular e infiltracion neoplasica a nivel capsular son evaluadas en la histopatologia y proporcionan informacion importante a la hora de establecer un protocolo terapeutico adecuado, de acuerdo a lo mencionado por Valli, Puicon, y Alvarez (8, 10, 26).

En cuanto al pronostico de supervivencia Valli afirma que perros que padecian linfomas con un indice mitotico mayor de 20 mitosis/400x sobrevivian 33 dias, mientras aquellos con indice mitotico menor de 20 mitosis / 400x sobrevivian 188 dias en promedio (13). En este caso la presentacion correspondio al de bajo grado.

Adicionalmente, para los casos en los cuales se empleen marcadores inmunohistoquimicos Chaves y colaboradores recomiendan que la presencia o ausencia de inmunomarcacion siempre debe correlacionarse con los hallazgos en HE y hallazgos encontrados en la exploracion clinica (27).

Finalmente, se sugiere que en la medida de lo posible cuando se realicen diagnosticos de remision de biopsias, al clinico se le suministre informacion morfologica y se determine el tipo de celular presente (celulas T o B) para que este pueda establecer el protocolo terapeutico mas adecuado para su paciente.

Conclusion

El presente reporte constituye el primer intento de confirmacion diagnostica con ayuda de marcadores inmunohistoquimicos en tumores linfoideos en el area de catedra y servicio de patologia de la Universidad de Narino. El uso de marcadores inmunohistoquimicos demuestran ser una herramienta de gran utilidad para el diagnostico oncologico de tumores linfoides al correlacionar la evaluacion clinica y la evaluacion histopatologica en H/E; Sin embargo, en casos de neoplasias altamente indiferenciadas se recomienda el empleo de un panel completo de marcadores para poder realizar un a mejor aproximacion diagnostica.

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Carmenza Janneth Benavides Melo [1], CvLAC, MV Esp, MSc; Carlos Alberto Chaves Velasquez [1], CvLAC, MV, Esp; Juan Manuel Astaiza Martinez [1], CvLAC, MVZ, Esp, MSc; Dario Antonio Vallejo Timaran [2], CvLAC, MV, Esp; Anghy Marcela Ruiz Salazar [1], Estudiante MV.

Fecha correspondencia:

Recibido: 24 de agosto de 2016.

Aceptado: 17 de marzo de 2017.

DOI: http://dx.doi.org/10.21615/cesmvz.12.1.5

Filiacion:

[1] Grupo de investigacion en Medicina Interna y Farmacologia Veterinaria (Mifarvet), Programa de Medicina Veterinaria, Universidad de Narino. Calle 18 Kra 50, Ciudadela Universitaria Torobajo, Pasto, Colombia.

[2] Grupo de investigacion en Medicina Interna y Farmacologia Veterinaria (Mifarvet), Programa de Medicina Veterinaria, Universidad de Narino; Escuela de Medicina Veterinaria, Universidad de Antioquia,

Leyenda: Figura 2. (a) Masas en region submandibular. (b) Nodulos popliteos aumentados de tamano. (c) mamas aumentadas de tamano y con cambios inflamatorios. (d) Tonsilas aumentadas de tamano. Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 3. Citologia por BACAF, tincion de Giemsa. (a) Linfonodo Mandibular 40x, proliferacion neoplasica de celulas redondas de caracteristica linfoide, de gran tamano con evidente alteracion morfologica tanto celular como nuclear (pleomorfismo celular y nuclear, anisocitosis y anisocariosis, megalocitosis y megalocariosis) (flechas negras). (b) Linfonodo popliteo 40x, poblacion celular heterogenea: celulas plasmaticas (flecha negra), neutrofilos (flecha azul) y linfocitos (flechas verdes). Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 4. (a) nodulos linfaticos popliteos con severo aumento de tamano, consistencia semidura al corte, coloracion beige entremezclada con areas rojo-negruzco. (b) Masa de localizacion cervical correspondiente a los nodulos linfaticos cervicales. (c) Higado, con moderado aumento del tamano. (d) Pancreas de aspecto palido y moderado aumento de tamano. (e) Bazo con, bordes irregulares y multiples focos blanquecinos en la superficie con distribucion multifocal. Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 5. (a, b) Nodulo linfatico 10x, con proliferacion celular neoplasica de origen linfoide con un patron de crecimiento infiltrativo que compromete corteza y medula. (c) Nodulo linfatico 40x, notese celulas neoplasicas correspondientes a linfocitos, de forma redondeada y tamano pequeno. Se observa moderado pleomorfismo nuclear, moderada anisocariosis y severa megalocariosis. (d) Higado 10x, notese la presencia de celulas neoplasicas que infiltran el parenquima funcional de apariencia linfoide con caracteristica similar a las reportadas en los demas tejidos. (e) Pancreas 10x, (f) Pancreas 40x, se evidencia foco de infiltrado de celulas neoplasicas de origen linfoide posiblemente asociado a una metastasis (fechas negras). (g) Bazo 10x, en la pulpa blanca se observa proliferacion celular neoplasica de tipo linfoide con un patron de crecimiento infiltrativo pobremente delimitado el cual se extiende al parenquima funcional (Pulpa roja). Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 6. (a) Intestino delgado 4x con cambios microcirculatorios, multiples focos de congestion, hemorragia y enlodamiento con distribucion multifocal en mucosa y submucosa (flechas negras), mucosa con atrofia y fusion de las vellosidades (llave). (b) Pulmon 10x con severos cambios microcirculatorios (multiples focos de congestion (flechas verdes), hemorragia y enlodamiento (flechas negras) con distribucion multifocal, presencia de multiples focos correspondientes a celulas neoplasicas de origen linfoide las cuales corresponden a metastasis pulmonar (estrellas negras). (c) Piel 4x, dermis con evidencia de proliferacion celular neoplasica de origen linfoide, se organiza a manera de paquetes celulares densos pobremente delimitados por estroma de tejido conectivo con un patron de distribucion infiltrativo. (d) Tejido adiposo 10x con presencia de celulas neoplasicas de origen linfoide. (e) Medula osea 10x, (f) Medula osea 40x, se evidencia aumento de la fraccion celular con presencia de celulas neoplasicas de origen linfoide (flechas verdes). Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 7. Inmunohistoquimica. (a) Control CD3 Nodulo linfatico 10x; (b) CD3 Nodulo linfatico 10x, notese moderada inmunomarcacion (flechas negras); (c) CD3 Nodulo linfatico 40x, se evidencia moderada inmunomarcacion (flechas negras); (d) Control CD3 Nodulo Linfatico 40X; (e) CD3 Medula Osea 40x se evidencia moderada inmunomarcacion (flechas negras).; (f) Control CD3 Nodulo linfatico 4x; (g) CD3 Piel 10X, se evidencia moderada inmunomarcacion; (h) CD3 Piel 40x se evidencia moderada inmunomarcacion (flechas negras). Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 8. Inmunohistoquimica. (a) Control CD45 Nodulo linfatico 4x; (b) Control CD45 Nodulo linfatico 10x; (c) CD45 Medula Osea 40x, notese leve inmunomarcacion de celulas neoplasicas; (d) Control CD45 Nodulo linfatico 40x; (e) CD45 Medula Osea 40x, se observan celulas neoplasicas con leve inmunomarcacion; (f) Control CD79a Nodulo Linfatico 10x; (g) CD79a Nodulo Linfatico 10x, notese moderada inmunomarcacion para linfocitos B (flechas negras); (h) CD79a Nodulo Linfatico 40x, se evidencia areas con moderada inmunomarcacion para linfocitos B (flechas negras). Fuente: Area de catedra y servicio de patologia veterinaria de la Universidad de Narino.

Leyenda: Figura 9. Inmunohistoquimica. (a) Control CD79a Nodulo linfatico 40x. (b) CD79a Nodulo linfatico 40x. Notese la moderada inmunomarcacion (flechas negras) y presencia de celulas neoplasicas correspondientes a linfocitos B en el lumen de un vaso linfatico (llave), presencia de figuras mitoticas aberrantes (flecha verde). (c)Control CD79a Nodulo linfatico 4x. (d) CD79a Medula osea 40x se evidencia moderada inmunomarcacion (flechas negras). (e) CD79a Piel 40x dermis profunda, se evidencia areas con moderada inmunomarcacion (flechas negras). Fuente: Area de Catedra y Servicio de Patologia Veterinaria de la Universidad de Narino.
Tabla 1. Clasificacion de las neoplasias linfoides segun
la Organizacion Mundial de la Salud para el uso en
animales. Fuente: Jubb, Kennedy, and Palmers (2016) 11,
modificado de la OMS (12, 14).

Neoplasias de celulas B

Neoplasias de precursores de celulas B

* Linfoma linfoblastico de celulas B / leucemia linfoblastica
de celulas B.

Neoplasias de celulas B maduras (perifericas)

* Leucemia linfocitica cronica de celulas B /linfocitos de
celula pequena.

--Linfoma de celulas B de celulas pequena

Linfoma de celulas B

* Linfoma difuso de celula grande de linfocitos B

--Centroblastico

--Immunoblastico

--Anaplasico

--Rico en celulas T

--Granulomatosis linfomatoide

* Linfoma folicular de celulas B

--Grados I, II, y III

* Linfoma marginal de celulas B zonal

--Linfoma marginal nodal zonal

--Linfoma marginal esplenico zonal

--MALT (tejido linfoide asociado a mucosas)

* Linfoma de celulas de manto

* Linfoma Burkitt-like

* Plasmocitoma extramedular

* Mieloma multiple

Neoplasias de celulas T

Neoplasias de celulas T y celulas NK (Natural killer)

Neoplasias de precursores de celulas T

* Leucemia linfoblastica de celulas T/ Linfoma linfoblastico
de celulas T

Neoplasias de celulas T Maduras (perifericas)

* Linfoma Nodal de celulas T

--Linfoma zonal de celulas T

--Linfoma periferico de celulas T no especificado

--Linfoma de celulas grande tipo T anaplasico

--Linfoma de celulas T angioinmunoblastico

* Enteropatia asociado a linfoma de celulas T (EATL)

--De celula grande: EATL tipo 1

--De celula pequena: EATL tipo 2

* Linfoma extranodal de celulas T

--Linfoma de celulas T hepatoesplenico

--Linfoma de celulas T hepatocitotropico

--Linfoma de celulas T periferico no especificado

* Linfoma cutaneo de celulas T

--Linfoma cutaneo epiteliotropico de celulas T

** Micosis fungoide

** Reticulosis pagetoide

** Sindrome de Sezary

--Linfoma cutaneo de celulas T no epiteliotropico

** Linfoma periferico de celulas T no especificado.

** Linfoma de celulas T subcutaneo "panniculitis-like"

** Linfoma de celula grande anaplasico de celulas T

* Leucemia linfocitica celulas grandes tipo T granular

--Leucemia linfocitica granular aguda de celulas grande tipo T

--Leucemia linfocitica granular cronica de celulas grande tipo T

MALT, mucosa-associated lymphoid tissue; NK, natural killer.

Tabla 2. ResuLtados de La Inmunomarcacion. Fuente: autores.

Marcadores          Tipo      Origen         Tejido
empleados para
el analisis

CD45             Monoclonal   Raton    Nodulo linfatico,
                                       piel y medula osea
CD3              Policlonal   Conejo   Nodulo linfatico,
                                       piel y medula osea
CD79a            Monoclonal   Raton    Nodulo linfatico,
                                       piel y medula osea

Marcadores       Inmunomarcacion
empleados para
el analisis

CD45                    +
CD3                    + +
CD79a                  + +

+ Leve inmunomarcacion, ++ moderada inmunomarcacion

Figura 1. Esquema de diagnostico de los linfomas mas comunes
en caninos. Fuente: modificado de Jubb, Kennedy, and Palmers.
2016 (11).

Folicular

Hiperplasia folicular benigna
Retencion de manto: cumulos de
celulas pequenas fuertemente
tenidas.
Las celulas tienen polaridad
relacionada con el antigeno:
zona profunda oscura y zona
clara superficial, de mejor
observacion en los foliculos
cercanos a la capsula.
Cuerpo folicular tenible
Numerosos macrofagos.

Linfoma folicular de celulas B

Ningun manguito del manto, con los
vasos comprimidos entre los foliculos.
Proporcion uniforme de celulas
grandes a intermedias (centroblastos a
centrocitos)
en todos los foliculos.
Cuerpo folicular tenible
Macrofagos ausentes
Grado basado en los centroblastos

en 400 x: FL grado 1 = 0-5;
FL grado 2 = 6-15; FL grado 3 >15.

Linfoma nodal de zona T

Etapas iniciales: nucleos pequenos sin mitosis, cromatina densa sin
detalle nuclear. Casos avanzados: nucleos de tamano intermedio,
cromatina densa, nucleolos debiles, citoplasma luminoso abundante,
pocas mitosis, ectasia sinusal. A pesar que se encuentran ocupado
el paracortex por cordones, no se pierde la arquitectura medular
ni del seno subcapsular, prominentes venulas postcapilares, los
foliculos B se comprimen contra trabeculas. (Nota: hay
hiperplasia de celulas dendriticas).

Linfoma de zona marginal (celulas tipo B)

Sitio primario bazo o nodulo.
Los de origen esplenico son localmente extensivos
originandose y coalesciendo en las arteriolas.
Los de nodulos y foliculos esplenicos, se originan en las
celulas de los centros germinales. Son redondeadas de
tamano medio. Nucleo con la cromatina periferica, nucleolo
prominente de ubicacion central levemente tenidos,
citoplasma con limites definidos. Mitosis ausentes en
estadios iniciales. (hiperplasia--mixta de celulas de manto)

Linfoma de manto de celulas B

Principalmente localizado en bazo, raro en el nodulo. Nucleos de
tamano intermedio, mas pequeno que MZL: redondo, cromatina
densa, nucleolos pequenos o no aparentes, poco citoplasma,
sin mitosis en los primeros casos. Nucleos mas grandes con
nucleolos en casos blastoides. Se asemejan a celulas germinales
grandes que se desvanecen.
Rodeado por un numero variable de celulas MZL y celulas
plasmaticas.

Tamano nuclear (vs. tamano
del eritrocito RBC)

Grande ([major que o iqual a] 2 x RBC)

Intermedio (1.5 x RBC)

pequeno (1-1.25 x RBC

Difuso

Linfoma de linfocitos B difuso de
celula grande

Nucleos uniformes redondeados o
hendidos.

Centroblastico Nucleos de forma
uniforme, nucleolos multiples que
inciden en la membrana nuclear,
citoplasma escaso.

Inmunoblastico > 90% de las
celulas tienen nucleos redondos
u ovales uniformes con nucleolo
unico central.

Linfoma de linfocitos B de celula
grande rico en celulas T.
Pocas celulas B grandes en
medio de pequenas celulas T no
neoplasicas. Estroma abundante con
necrosis isquemica focal.

Linfoma linfoblastico

Nucleos de tamano intermedio,
redondos a ovales, con
moderada anisocariosis.
Cromatina densa y dispersa,
multiples nucleolos pequenos,
escaso citoplasma basofilo. Tasa
mitotica alta con cromosomas
que no estan claramente
definidos. Celula B o celula T (la
mayoria son celulas T).

Linfoma anaplasico de
celula grande

Poco comun.
Se observan algunas celulas
multinucleadas, nucleos muy
irregulares
(Herradura o alargados);
A menudo citoplasma
vacuolado.
Principalmente de celula T,
pero puede ser de celula B.
Diferenciar del Sarcoma
histiocitico.

Linfoma periferico de celula T
Anisocariosis y poiquilocitosis

Linfoma linfoplasmocitico Raro.
Nodal, de nucleo pequeno, citoplasma
intensamente rojo, escasas mitosis.

Linfoma linfocitico de celula
pequena / leucemia cronica
linfocitica (CLL) Raro. Nucleo
pequeno, escasas figuras mitoticas.

Tasa mitotica por campo a
400 X

Bajo (0-5/HPF)

Medio (6-10/HPF)

Alto (> 10/HPF)
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Title Annotation:Reporte de caso
Author:Benavides Melo, Carmenza Janneth; Chaves Velasquez, Carlos Alberto; Astaiza Martinez, Juan Manuel; V
Publication:Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia
Date:Jan 1, 2017
Words:6899
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