Printer Friendly

Limitaciones para el serodiagnostico del virus del oeste del Nilo en zonas endemicas con co-circulacion de Flavivirus en el Caribe colombiano.

RESUMEN

Introduccion: Esta es la primera aproximacion sero-epidemiologica que se hace en Colombia sobre el virus del Oeste del Nilo (VON).

Objetivo: El proposito de este estudio fue el de establecer la presencia de anticuerpos IgG contra el VON en una poblacion de la costa atlantica utilizando dos pruebas comerciales y establecer su utilidad.

Materiales y metodo: Se analizaron de forma aleatoria 52 muestras de sueros de personas que trabajaban en labores agricolas desde hacia mas de 15 anos en el departamento de Sucre. Se utilizo la tecnica West Nile Virus IgG ELISA (Focus Technologies). Tambien se utilizo la prueba de inmunofluorescencia (PANBIO Columbia. Arbovirus IgG-IFA slides), donde se evaluo la deteccion de anticuerpos contra cinco antigenos diferentes de arbovirus (encefalitis equina venezolana, encefalitis japonesa, fiebre amarilla y dengue).

Resultados: Con la prueba de ELISA, de 52 sueros estudiados para la deteccion de anticuerpos contra VON, 38 (73%) resultaron positivos, los 14 (27%) restantes resultaron negativos. Con la prueba de IFA, 6 sueros (11.5%) resultaron seropositivos debiles para VON, 46 (88.5%) resultaron negativos para la deteccion de anticuerpos contra el VON. Utilizando IFA se presentaron reacciones cruzadas contra otros arbovirus como dengue, encefalitis venezolana y japonesa y fiebre amarilla. El estudio demostro la complejidad del serodiagnostico de Flavivirus en las zonas endemicas como la del Caribe colombiano.

Conclusion: Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que las pruebas de ELISA e IFA para humanos son de poca utilidad diagnostica contra el VON en las zonas colombianas donde se presentan circulacion de otros Flavivirus como dengue, fiebre amarilla o encefalitis equina.

Palabras clave: Virus del Nilo; Colombia; Serodiagnostico; Seroreacciones; Flavivirus; West Nile Virus.

Limitations for the serodiagnosis of the West of the Nile virus infection in endemic zones with co-circulation of Flavivirus in the Colombian Caribbean area

SUMMARY

Introduction: This is the first sero-epidemiologic approximation done in Colombia about West Nile virus (WNV).

Objective: The purpose of this study was to detect IgG antibodies against WNV in a population by using two commercial tests and to establish its utility in our medium.

Materials and methods: It was analyzed by random way 52 serum samples of people whom worked in agricultural practices 15 years ago in the department of Sucre. The technique West Nile Virus IgG ELISA (Focus Technologies) was used. Furthermore, the test IFA (PANBIO Columbia, Arbovirus IgG- IFA slides) which detect antibodies against five antigens (equine encephalitis, Japanese encephalitis, yellow fever and dengue) was hence used. With ELISA test of 52 serum samples studied for the detection of antibodies against WNV, 38 (73%) were positive, the remaining 14 (27%) were negatives. With IFA test, 6 sera (11.5%) showed weak seropositive reaction, 46 (88.5%) were seronegatives for the detection of antibodies against the WNV. By using IFA different cross reactions were observed against other arbovirus as dengue, Venezuelan encephalitis, Japanese encephalitis and yellow fever. The study showed the complexity of the serodiagnostic of the Flavivirus in the endemic zones as the Caribbean Colombian area.

Conclusion: The results obtained in this study show that the tests of ELISA and IFA are not of diagnostic utility against the WNV in Colombia, or at least in the zones where Flavivirus are actually in circulation as dengue, yellow fever or equine encephalitis.

Key words: West Nile Virus; Colombia; Serodiagnostic; Cross reaction; Flavivirus.

La fiebre por el virus del oeste del Nilo (VON), es una infeccion zoonotica transmitida por mosquitos vectores de varios generos a los vertebrados equinos, bovinos, caninos, aves y humanos. El VON es un microorganismo neurotropico y junto con el virus de la encefalitis japonesa, el dengue, el virus del Valle Murray y otros, estan incluidos en el genero Flavivirus, de la familia Flaviviridae (1-4). La transmision del virus se presenta en ciclos naturales que incluyen diferentes tipos de mosquitos ornitofilos del genero Culex. Los humanos, caballos y otros mamiferos, se consideran huespedes finales de la infeccion, pues la viremia que se alcanza en ellos no es suficiente para seguir contaminando otros mosquitos y el ciclo se detiene. La infeccion del VON en humanos y caballos es por lo general asintomatica, se caracteriza por procesos febriles, dolor de cabeza, erupcion, mialgias, artralgias y fatiga, sin embargo, la infeccion puede evolucionar hasta producir encefalitis o meningoencefalitis, llevando al paciente incluso hasta la muerte (1-5).

El VON fue aislado originalmente en Uganda en 1937 (1), de una mujer adulta que presentaba fiebre de origen desconocido; desde ese momento el virus se ha informado en Africa, Medio Oriente, Asia, el sur de Europa, Australia y Norte America. Recientemente se ha encontrado evidencia serologica en caballos y aves en la region norte de Mexico (5), Jamaica (6), Republica Dominicana (7) y Guadalupe (8). La identificacion del VON en el continente americano se llevo a cabo en Nueva York (2,3), luego de que se empezaran a presentar muertes de aves exoticas en los zoologicos, cuervos y caballos (1-4). La epidemia por VON se disemino rapido en los Estados Unidos; desde el ano 2003, el CDC de Atlanta ha informado cerca de 10.400 casos de infeccion por VON en humanos distribuidos en casi todos los estados de la union americana y alrededor de 666 han sido fatales (9).

De otro lado, es conocido que los arbovirus (Flaviviridae) pueden presentar reaccion cruzada entre ellos (1-3,10-13). Colombia posee zonas endemicas para dengue (DEN), fiebre amarilla (FA) y virus de la encefalitis equina venezolana (VEE). Se desconoce sobre la presencia del VON, virus de la encefalitis de San Luis (ESL), virus de la encefalitis japonesa (VEJ) y virus de la encefalitis de Valley (VEV). Por ello, el diagnostico compatible con la clinica y la diferenciacion de los virus infectantes es importante, sobre todo en areas donde existen Flavivirus circulantes como en la costa Caribe colombiana. Los estuches de diagnostico disponibles en EE.UU. y Europa teoricamente no presentan problemas de reaccion cruzada por la ausencia de DEN, FA, VEE, VEJ y VEV. Sin embargo, como Colombia posee regiones con altos indices de infeccion por diferentes Flavivirus, es importante la determinacion de anticuerpos y el diagnostico diferencial mediante el uso de las pruebas de diagnostico para VON.

De otro lado, el Instituto de Investigacion de Recursos Biologicos Alexander von Humboldt con Roselli (14) y Komar (15) del CDC han determinado que existe en Colombia aproximadamente 34 especies de aves migratorias procedentes de EE.UU. y Canada donde se ha encontrado la presencia del VON. Por tanto, existe el riesgo y una alta probabilidad de que el virus pueda llegar a Sur America, y consecuentemente a Colombia, a traves de las aves infectadas; se recomienda atencion especial a las zonas de grandes extensiones de agua como las cienagas en la costa atlantica, el sector del Darien, la costa pacifica y los Llanos. Ante esta evidencia, es importante alertar a los sistemas de vigilancia epidemiologica, la comunidad medica y los laboratorios especializados que requieren con urgencia pruebas de diagnostico confiables para estudiar posibles brotes en humanos y que hayan sido ensayadas en condiciones locales. El proposito de este estudio fue establecer la presencia de anticuerpos IgG contra el VON en una poblacion de la costa atlantica utilizando dos pruebas comerciales y establecer su utilidad en nuestro medio.

MATERIALES Y METODOS

Tipo de estudio y poblacion estudiada. Se llevo a cabo un trabajo de tipo descriptivo en donde se analizaron de forma aleatoria 52 muestras de sueros humanos de la seroteca existente en el Instituto de Investigaciones Biologicas del Tropico (IIBT), Monteria. Las muestras se recolectaron en enero de 2004 de personas que trabajaban en actividades agricolas desde hacia mas de 15 anos en el departamento de Sucre. Los sueros se congelaron a -70[grados]C hasta su evaluacion. Las actividades agricolas a las que se dedicaban estas personas eran las del manejo de ganado y desmonte de malezas en predios rurales de diferentes sitios del departamento. De cada paciente se obtuvieron datos como edad, sexo, origen, antecedentes de enfermedades infecciosas zoonoticas, presencia de agua potable en la vivienda, grado escolar, sintomas o signos generales como fiebre, fatiga, conjuntivitis, nauseas, dolor abdominal y toracico, cefalea, diarrea, amigdalitis y complicaciones respiratorias.

Lugar de obtencion de los sueros. Los sueros se obtuvieron en el departamento de Sucre en los municipios de Tolu, Sampues, Sincelejo, San Marcos, Morroa, San Onofre, Covenas, San Benito Abad, San Antonio de Palmitos, Corozal, Guaranda y San Pedro. Este departamento se encuentra localizado al noroeste de Colombia entre el rio Cauca y el mar Caribe. Tiene una superficie de 10.917 [km.sup.2], con una temperatura promedio anual de 30[grados]C; un poco mas de la tercera parte de su territorio es depresion inundable del bajo Magdalena-Cauca-San Jorge, caracterizada por numerosas cienagas donde anidan aves autoctonas y migratorias provenientes del hemisferio norte, sobre todo a lo largo del rio San Jorge al sudeste del departamento (Mapa 1).

[ILUSTRACION OMITIR]

Poblacion estudiada y calculo del tamano de la muestra. La poblacion aproximada del departamento de Sucre en 1993 era de 900.000 habitantes (51% mujeres y 49% hombres). Los trabajadores rurales se estiman cerca de 400.000, 70% de estos estan en el rango de edad productiva entre 16 y 65 anos. Se tomaron sueros de diferentes municipios del departamento; como se desconoce la prevalencia real de la infeccion por el VON en Colombia se asumio 50% de frecuencia esperada de la infeccion. El error maximo permisible fue de 1% y el intervalo de confianza escogido fue de 99.9%, lo que permitio analizar 16 sueros, sin embargo, se aumento el numero a 52, cifra cercana cuando se escogio un intervalo de 99% y una frecuencia de 12%. Esta ultima se podria asumir si se considerara que la infeccion en humanos es similar a la encontrada en los equinos de los departamentos de Cordoba y Sucre (16).

Aspectos eticos. Se siguieron las normas tecnicas, cientificas y administrativas para la investigacion en salud del Ministerio de Salud de Colombia Resolucion No 008430 del 4 de octubre de 1993. A lo largo del estudio siempre se protegio la privacidad e intimidad del individuo identificandolo con un numero interno. Los datos obtenidos de los analisis se incluyeron en una base de datos y se utilizaron de forma anonima y se categorizo mediante la asignacion de un numero. A todos los sujetos involucrados en la investigacion se les explico verbalmente el tipo de estudio y se obtuvo su consentimiento oral y escrito. El estudio fue aprobado por el Comite de Etica del Instituto de Investigaciones Biologicas del Tropico de la Universidad de Cordoba.

Pruebas de inmunoensayo ELISA. Se utilizo la tecnica West Nile Virus IgG ELISA (Focus Technologies, Cypress, California, USA) que usa un antigeno recombinante del virus del oeste del Nilo (11,12). Basicamente, la tecnica de ELISA IgG para el VON consiste en unos pozos recubiertos con un antigeno recombinante del virus del oeste del Nilo; las muestras, los controles positivo, negativo y calibradores se diluyeron y se incubaron a temperatura ambiente (23[grados]-26[grados]C) por 60 minutos para permitir que los anticuerpos IgG (si estan presentes), reaccionaran con el antigeno de la placa. Los sueros y controles se analizaron por duplicado. Los demas procedimientos de lavados e incubacion se realizaron de acuerdo con las instrucciones tecnicas descritas en el estuche. La lectura de las absorbancias se realizaron en un lector de ELISA (STAT-FAX[R], Awareness Technology, USA) usando un filtro de 450 nm y como filtro de referencia 600-630 nm. El analisis de resultado se hizo mediante el uso de un indice calculado como la division de la densidad optica (O[D.sub.450-630nm]) de la muestra o de los controles entre el promedio de la O[D.sub.450-630nm] de los calibradores. El control de calidad de la prueba se realizo mediante el analisis del indice para el control positivo (1.5-3.5) y el control negativo (<0.8). Si los controles se encontraban fuera de rango, los resultados de las muestras se consideraron invalidos.

Inmunofluorescencia indirecta. Para la realizacion de esta prueba se utilizo la IFA (PANBIO Columbia, USA, Arbovirus IFA slides). Las laminas de IFA se usaron para las determinaciones serologica y cualitativa de anticuerpos contra Arbovirus incluyendo antigenos diferentes contra virus del oeste del Nilo, virus de la encefalitis equina venezolana, virus de la encefalitis japonesa, virus de la fiebre amarilla y el virus del dengue. Basicamente la IFA utiliza un antigeno de los diferentes virus antes mencionados; en todos los analisis se uso un control positivo y negativo para Arbovirus y VON. Los resultados se evaluaron comparando la fluorescencia relativa de cada uno de los pozos contra la fluorescencia relativa de los controles positivos y negativos. Las fluorescencias se evaluaron como negativo (+), debil positivo (++), positivo (+++) y fuertemente positivo (++++). Primero se realizo un tamizaje de las muestras para determinar la positividad de cada una frente a los distintos antigenos y luego se procedio a realizar la titulacion de la muestra haciendo diluciones seriadas de 1:2, 1:4, 1:6 usando el buffer de lavado del estuche. Se consideraron positivos los sueros cuyos titulos fueron >1:120 como se ha descrito previamente (6,7). Tres investigadores realizaron la lectura de manera simultanea y se anotaron los resultados concordantes de 2 de las lecturas.

RESULTADOS

Determinacion de anticuerpos del VON por ELISA e IFA. Para determinar el control de calidad de la prueba de ELISA se usaron los valores de los controles positivos, negativos y calibradores. Los valores obtenidos estuvieron en el rango de los parametros de calidad indicados por el fabricante. Con la prueba de ELISA, de 52 sueros estudiados para establecer anticuerpos IgG contra el VON, 38 (73%) resultaron positivos. Con la prueba de IFA, 6 sueros (11.5%) resultaron seropositivos debiles determinados con fluorescencia relativa de una cruz (+) o dos cruces (++). El resto, 46 (88.5%), resultaron negativos.

Reacciones cruzadas encontradas contra otros arbovirus utilizando IFA. Ademas de los anticuerpos IgG encontrados contra el VON con la prueba de IFA, se determinaron anticuerpos contra otros arbovirus. Contra el virus del dengue 38 (73%) sueros fueron positivos, los 14 (27%) restantes resultaron negativos; en el caso del virus de la fiebre amarilla (FA) 1 (2%) suero resulto positivo y los 51 (98%) restantes no presentaron reaccion. Con el virus de la encefalitis japonesa (VEJ) 1 (2%) resulto positivo y los 51 (98%) sueros restantes negativos. Finalmente, para el caso del virus de la encefalitis equina (VEE) 1 (2%) suero resulto positivo y los 51 restantes (98%) resultaron negativos. De los 38 sueros seropositivos para dengue, 6 fueron simultaneamente seropositivos con VON y uno de estos seis resulto positivo para VEJ, DEN y VON; uno fue simultaneamente positivo con FA y DEN y otro suero mostro reactividad con VEE y DEN simultaneamente (Cuadro 1).

DISCUSION

Este trabajo es la primera aproximacion seroepidemiologica que se hace en Colombia sobre el virus del oeste del Nilo (VON). Con la introduccion en America del VON en 1999 y la infeccion de animales en Centroamerica y en algunas islas del Caribe (1-8), es importante vigilar en Colombia la presencia de este virus para anticipar posibles brotes en nuestras poblaciones. Los anticuerpos en poblaciones rurales cercanas a grandes extensiones de agua donde llegan aves migratorias indicarian la actividad y circulacion del VON en zonas de influencia como la costa atlantica. Si bien la mayoria de las infecciones en humanos por el VON son subclinicas, existe un amplio rango de sintomas que incluye fiebre, mialgia, dolor de cabeza, problemas gastrointestinales, brote hasta meningoencefalitis (2). La sintomatologia es muy similar a otras enfermedades infecciosas como dengue, malaria, leptospirosis, hantavirus, influenza, por eso es importante establecer la utilidad de ayudas diagnosticas comerciales disponibles en el mercado para garantizar un diagnostico oportuno y eficaz y asi tomar las medidas adecuadas.

Los Flavivirus contienen epitopes que ocasionan reacciones cruzadas y por tanto son un problema en el diagnostico serologico de estas enfermedades. En ese sentido, usando IFA ocho de los sueros estudiados presentaron reacciones cruzadas con DEN, VON, VEJ y VEE demostrando que es posible que existan anticuerpos especificos contra esos virus o reacciones cruzadas entre ellos (10-13) (Cuadro 1). La muestra numero 50, presento reacciones cruzadas entre DEN y FA. Es posible que esta persona haya sido vacunada contra FA, aunque en la amnanesis no lo recordo; se conoce que los anticuerpos postvacunacion contra FA persisten hasta tres decadas despues de la aplicacion (13). Este trabajador del agro no estuvo en zona endemica. En general, estos trabajadores del campo y campesinos permanecen en su area de trabajo todo el ano, la cual es circunscrita a su lugar de residencia. Con respecto a la serorreactividad del dengue de los ocho sueros, la costa Caribe es una zona endemica, por lo que la posibilidad de haber padecido dengue es muy alta (Cuadro 1).

Con respecto a los dos sueros de las personas serorreactivas al VEJ y al VEE, no se ha documentado la presencia de VEJ en Colombia, por lo que se considera como una reaccion cruzada entre estos virus. Sin embargo, se desconoce por que los otros sueros no presentaron serorreactividad ante el antigeno del VEJ. Quizas la debil positividad indicada con una cruz (+) demuestre una reaccion inespecifica de la prueba. Con respecto a la serorreactividad del VEE, la zona donde se realizo la recolecta de los sueros no es endemica para este virus, por lo que se presume que es otra reaccion cruzada entre estos Flavivirus o que exista probablemente una circulacion proxima del VEE con el area de estudio (Cuadro 1). En relacion con la serorreactividad de los seis sueros al VON con DEN y uno con VEJ por IFA, no se podria indicar circulacion del VON en Colombia, por lo expuesto antes en relacion con las reacciones cruzadas entre los Flavivirus y por la baja reactividad en la fluorescencia. Ademas, este trabajo tuvo como limitante que no se confirmo la seroreactividad de los casos por la prueba de neutralizacion en placa como recomienda el Center for Disease Control (CDC) y otros autores (11,12,16,17).

Es importante resaltar, que las muestras de suero de este estudio se obtuvieron en el departamento de Sucre que se caracteriza por presentar numerosas cienagas a lo largo del rio San Jorge. Estos cuerpos de agua son el sitio de preferencia del arribo de aves migratorias, presumiblemente culpables de la introduccion del VON en Norte America. Las cienagas de la costa Caribe colombiana son lugares donde descansan estas aves; estos humedales son propicios para la presencia de vectores que transmiten el virus desde la aves infectadas a sanas, de las aves a los mosquitos y desde ahi hacia los humanos y animales sanos que se encuentran en los alrededores de estas amplias fuentes de agua. Aunque esto es una hipotesis interesante, falta por demostrar tal relacion en Colombia.

Al respecto nuestro grupo ha comenzado la busqueda de anticuerpos especificos contra VON en caballos, bovinos y otros animales domesticos por la tecnica de neutralizacion en placa (PRNT). Se logro establecer una seroprevalencia de 12% en equinos de Cordoba y Sucre (18).

La busqueda de anticuerpos contra el VON en aves se debe realizar en aves indigenas de traspatio, porque es posible identificar los huespedes intermediarios del virus. Encontrar anticuerpos en aves exoticas migratorias en esta zona costena dificulta su interpretacion, porque no se conoce la historia y rutas exactas de su desplazamiento. Actualmente en el estado incipiente en que se encuentra la investigacion del VON en Colombia, seria importante buscarlo en las aves comunes de la costa Atlantica que popularmente aqui se denominan <<maria mulata>> o <<cocineras>> (Corvus brachyrhynchos) (14,15) quienes son los mas susceptibles de padecer la infeccion por VON y serian las centinelas precisas para observar la introduccion del virus a Colombia, aunque se ha descrito en otras aves como gavilanes (Accipitridae) aves acuaticas y playeras de las familias de los correlimos (Scolopacidae), chorlos (Charadridae), gaviotas y charranes (Laridae), patos (Anatidae), y algunas golondrinas (Hirundinidae) (14,15). Los departamentos de Sucre y Cordoba presentan grupos densos de estas aves en las zonas humedas.

La ultima opcion es la busqueda del VON en mosquitos por RT-PCR, aunque este procedimiento resulta costoso (10 dolares americanos por muestra), es la forma preliminar mas eficaz para demostrar la presencia del virus en Colombia (19). No obstante, existe un prueba preliminar para la busqueda de antigenos denominada VecTest[TM] (Medical Analysis Systems, Camarillo CA, USA) que posee una buena sensibilidad entre 70% y 80% (20). En estudios preliminares nuestro grupo ha analizado 3.000 mosquitos Culex spp por esta tecnica y no se ha encontrado el VON (datos no publicados).

La prueba de ELISA usada en este estudio, con antigeno recombinante para establecer la presencia de anticuerpos contra el VON, aumenta posiblemente la sensibilidad, pero disminuye la especificidad en este estudio por la presencia de las reacciones cruzadas con el virus del dengue. Estos resultados contrastan con los de IFA, en los que se utilizan celulas infectadas con los arbovirus (VON, VEE, VEJ, FA y DEN) en la cual se observaron menos reacciones cruzadas aunque tampoco se tenian sueros conocidos de casos de infeccion por VON, para establecer su valor diagnostico.

Los resultados de este estudio coinciden con otros trabajos donde demuestran la existencia de reacciones cruzadas con este virus que pertenecen al mismo grupo antigenico, como el caso de VEJ y el VON; incluso, a pesar de pertenecer a serogrupos antigenicos diferentes como el caso de DEN y FA, tambien pueden presentar reacciones cruzadas (10-13,16-18). Es cierto que estas reacciones cruzadas son frecuentes en la determinacion de anticuerpos tipo IgG; sin embargo, son menores para establecer anticuerpos tipo IgM contra los Flavivirus (11,13). No obstante, el uso de la IgG en estas encuestas seroepidemiologicas no se podria decir que posee un sesgo, porque para VON los anticuerpos permanecen hasta mas de 3 meses elevados despues del comienzo de la infeccion (13). Solo en los casos de encefalitis se recomienda la confirmacion de los resultados con ensayos de neutralizacion en placa o usando IgM en liquido cefaloraquideo (11,17).

De otro lado, este trabajo no evaluo sueros de zonas andinas u otras regiones no endemicas para DEN, FA y VEE, con el objeto de establecer su utilidad en el area geografica seleccionada. Es posible que las pruebas aqui evaluadas tengan algun valor diagnostico para otras zonas, aunque la historia clinica debe ser muy cuidadosa sobre todo en los aspectos epidemiologicos y de medicina geografica. Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que la prueba comercial de ELISA que usa un antigeno recombinante del virus del oeste del Nilo puede que no sea el medio de diagnostico mas adecuado contra el VON en Colombia, o por lo menos en las zonas en donde se presentan circulacion de Flavivirus como dengue, fiebre amarilla o encefalitis equina. La prueba de IFA analizada en este trabajo, que emplea celulas infectadas con varios arbovirus (VON, VEE, VEJ, FA, DEN) al parecer resultaria eficiente para el diagnostico del VON en Colombia, pero se deben realizar estudios complementarios con sueros humanos seropositivos y sueros de zonas no endemicas para evaluar la sensibilidad y especificidad de esta prueba en nuestras condiciones. Tambien es importante tener en cuenta su alto costo y el alto impacto economico que tendria en los sistemas de salud o de vigilancia epidemiologica.

De otra parte, este trabajo aporta informacion sobre el posible problema de salud publica en los bancos de sangre de la region si el VON se incluye a los programas de tamizacion en estos centros. La tamizacion tendra que hacerse una vez se demuestre el VON en el territorio. EE.UU. ya lo hace y en el informe del Centro para el Control y Prevencion de Enfermedades de los Estados Unidos (CDC) (21) se habian notificado 124 donadores con niveles viremicos de VON (21). El riesgo en EE.UU. es mayor en los estados surenos como Arizona, California y Texas; sin embargo, 124 casos no es dramatico para un pais no situado en el tropico. En contraste, una vez el VON este circulando en un ambiente tropical tan propicio como el del Caribe colombiano, podria producir un patron endemico de infeccion en la poblacion costena. Bajo las condiciones geograficas de esta region, la amplificacion de la transmision del VON pasara sin problema al area urbana, donde existe una poblacion susceptible y ademas una abundancia de mosquitos vectores y otros huespedes aviares intermediarios que proveerian las condiciones para la introduccion de una nueva etiologia infecciosa.

En conclusion, el estudio demostro la complejidad del serodiagnostico de los Flavivirus en las zonas endemicas como la del Caribe colombiano. Los resultados obtenidos en este trabajo, necesariamente implican que una vez se demuestre la llegada del VON a Colombia, habra que realizar un diagnostico serologico diferencial entre los diferentes Flavivirus circulantes para proporcionar un diagnostico confiable al medico tratante. Desde ahora hay que abordar el problema del inminente arribo del VON a traves de estudios centinelas en mosquitos, aves nativas, cuervos autoctonos (Corvus brachyrhynchos), equinos, bovinos y otros animales domesticos.

AGRADECIMIENTOS

Al doctor Nelson Alvis por sus valiosos comentarios epidemiologicos; al doctor Jose Laguado (microbiologo) por la revision del manuscrito y sus aportes tecnicos; a la Universidad de Cordoba y al Instituto de Investigaciones Biologicas del Tropico, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, al CIUC y al Consejo Superior Universitario por su apoyo a esta investigacion

REFERENCIAS

(1.) Krauss H, Weber A, Appel M, Enders B, Isenberg H, Schiefer H, et al. Zoonoses, infectious diseases transmissible from animals to humans. 3rd ed. Washington DC: ASM Press; 2003. p. 2-171.

(2.) Sampathkumar P. West Nile virus: Epidemiology, clinical presentation, diagnosis and prevention. Mayo Clin Proc 2003; 78: 1137-1144.

(3.) Zeller H, Schuffenecker I. West Nile virus: An overview of its spread in Europe and mediterranean basin in contrast to its spread in the Americas. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2004; 23: 147-156.

(4.) Ministerio de Salud. Virus del Nilo occidental (NO), en las Americas. Alerta sobre su vigilancia en Colombia. SIVIGILA 2002 [en linea] [fecha de acceso enero 8 de 2004]. URL disponible en http://www.col.ops-oms.org/sivigila/2002/BOLE33_02.htm

(5.) Lorono-Pino M, Blitvich BJ, Farfan-Ale JA, Puerto FI, Blanco JM, Marlenee NL, et al. Serologic evidence of West Nile virus infection in horses, Yucatan state, Mexico. Emerg Infect Dis 2003; 9: 857-859.

(6.) Dupuis A, Marra P, Kramer L. Serologic evidence of West Nile virus transmission, Jamaica, West Indias. Emerg Infect Dis 2003; 9: 860-863.

(7.) Komar O, Robbins MB, Klenk K, Blitvich BJ, Marlenee NL, Burkhalter KL, Gubler DJ, et al. West Nile virus transmission in resident birds, Dominican Republic. Emerg Infect Dis 2003; 9: 1299-1302.

(8.) Quirin R, Salas M, Zientara S, Zeller H, Labie J, Murri S, et al. West Nile virus, Guadeloupe. Emerg Infect Dis 2004; 10: 706-708.

(9.) Hayes EB. Epidemiology and transmission dynamics of West Nile virus disease. Emerg Infect Dis. 2005; 11: 1167-1173.

(10.) Prince H, Nixon M, Moore R, Hogrefe W. Utility of the focus technologies West Nile virus immunoglobulin M capture enzyme linked immunosorbent assy for testing CSF. J Clin Microbiol 2004; 42: 12-15.

(11.) Koraka P, Zeller H, Niedrig M, Osteerhaus A, Green J. Reactivity of serum samples from patients with Flavivirus infections measured by immunefluorescense assay and ELISA. Microbes Infect 2002; 4: 1209-1215.

(12.) Malan A, Martins T, Hill H, Litwin C. Evaluation of commercial West Nile virus immunoglobulin G (IgG) and IgM enzyme immunoassays show the value of continuous validation. J Clin Microbiol 2004; 42: 727-733.

(13.) Tardei G, Ruta S, Chitu V, Rossi C, Tsai T, Cernescu C. Evaluation of immunoglobulin M (IgM) and IgG enzyme immunoassays in serologic diagnosis of West Nile virus infection. J Clin Microbiol 2000; 38: 2232-2239.

(14.) Rosselli L. Aves de Colombia y el virus del Nilo occidental. Instituto de Investigacion de Recursos Biologicos Alexander von Humboldt. [en linea] 2004 [fecha de acceso febrero 18 de 2005] URL disponible en: http://www.ornitologiacolombiana.org/boletinespdf/west_nile.pdf.

(15.) Komar N. West Nile virus: Epidemiology and ecology in North America. Adv Virus Res 2004; 61: 185-233.

(16.) Martin D, Biggerstaff B, Allen B, Johnson A, Lanciotti R, Roehrig J. Use of immunoglobulin M cross-reactions in differential diagnosis of human Flaviviral encephalitis infections in the United States. Clin Lab Inmunol 2002; 9: 544-549.

(17.) Martin D, Muth D, Brown T, Johnson A, Karabatsos N, Roehrig J. Standarization of inmunoglobulim M capture enzyme-linked inmunosorbent assay for routine diagnosis of arboviral infections. J Clin Microbiol 2000; 38: 1823-1826.

(18.) Mattar S, Edwards E, Laguado J, Gonzalez M, Alvarez J, Komar N. West Nile virus antibodies in Colombian horses. Emerg Infect Dis 2005; 11: 1497-1498.

(19.) Lanciotti R, Kerst A, Nasci R, Godsey M, Mitchell C, Savege H, et al. Rapid detection of west Nile virus from human clinical specimens, field-collected Mosquitoes, and avian samples by a TaqMan reverse transcriptase-PCR assay. J Clin Microbiol 2000; 38: 4066-4071.

(20.) Stone W, Okoniewski J, Therrien J, Kramer L, Kauffman E, Eidson M. VecTest as a diagnostic and surveillance tool for west Nile virus in dead birds. Emerg Infect Dis 2004; 10: 2175-2181.

(21.) Centers for Disease Control and Prevention. West Nile virus viremic blood donor. Activity in the United States, Statistics, Surveillance, and Control. [en linea] 2004 [fecha de acceso Septiembre 14 de 2004] URL disponible en: http://www.cdc.gov/ncidod/dvbid/westnile/surv&control04Maps_Viremicpdfhtm

Salim Mattar, Ph.D. (1), Miguel Parra, M.Sc. (2), Jose Torres, Microbiol. (3)

(1.) Profesor Titular, Microbiologia e Infectologia, Facultad de Medicina Veterinaria, Director Instituto de Investigaciones Biologicas del Tropico, Universidad de Cordoba, Monteria, Colombia. e-mail:smattar@escarsa.net.co,mattarsalim@hotmail.com

(2.) Profesor Asociado, Departamento de Microbiologia, Facultad de Ciencias Basicas, Universidad Javeriana, Bogota, Colombia. e-mail: miguelnando@yahoo.com

(3.) Microbiologo, Instituto de Investigaciones Biologicas del Tropico, Universidad de Cordoba, Monteria, Colombia. Recibido para publicacion septiembre 29, 2004 Aprobado para publicacion junio 27, 2005
Cuadro 1
Reactividad cruzada entre los antigenos de VON, DEN,
FA, VEJ y VEE usando la tecnica de IFA y ELISA *

                   Antigeno de Flavivirus

Suero *     VON     DEN      FA     VEJ     VEE

1           +       +++      -      -       -
18          +       +++      -      -       -
50          -       +++      +      -       -
312         -       +        -      -       ++
326         +       ++++     -      -       -
331         +       +++      -      +       -
333         +       ++++     -      -       -
335         +       +++      -      -       -
COPYRIGHT 2005 Facultad de Salud-Universidad de Valle
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2005 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Mattar, Salim; Parra, Miguel; Torres, Jose
Publication:Colombia Medica
Date:Jul 1, 2005
Words:5364
Previous Article:Estudio descriptivo sobre bloqueos atrio-ventriculares en infartos posteroinferiores en el Hospital de Caldas ESE.
Next Article:Prevalencia de trastornos psiquiatricos en pacientes medicoquirurgicos hospitalizados en la Clinica Universitaria Bolivariana de Medellin, Colombia.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2019 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters