Printer Friendly

Interferencia causada por hemolisis en la determinacion de 25 constituyentes bioquimicos en el autoanalizador ADVIA 1800.

Hemolysis interference in the determination of 25 biochemical constituents using ADVIA 1800 autoanalyzer

INTRODUCCION

Las interferencias analiticas pueden causar errores clinicamente significativos en los resultados de una magnitud biologica, las cuales conducen a diagnosticos equivocados, analisis o exploraciones adicionales inapropiadas y tratamientos innecesarios o potencialmente desfavorables para los pacientes.

Se define la interferencia analitica como el efecto de un constituyente en la exactitud de medida de otro constituyente o el efecto que se produce en cualquier etapa de su determinacion (1,2).

La interferencia por hemolisis es la principal causa de rechazo preanalitico de muestras de suero, el cual conlleva a un gasto extra de reactivos, un mayor desgaste de los equipos y demora en la emision de resultados (3).

La prevalencia de muestras hemolizadas en diversos estudios es muy variable, oscila entre 0,05 y 3,3%. Esta variabilidad puede deberse a las distintas formas de realizar el ensayo para investigar interferencia por hemolisis y a los varios criterios para establecer el limite de error maximo admisible para este tipo de interferencia (4,5).

La calidad analitica de los resultados de un laboratorio se puede estimar por medio de indicadores como la imprecision, el error sistematico (ES) y el error total (ET), comparandolos con las especificaciones de la calidad establecidas. El grado de cumplimiento de dichas especificaciones no solo asegura la calidad de los resultados sino que tambien es esencial para asegurar la interpretacion y utilizacion de los datos de laboratorio por los clinicos.

La Organizacion Mundial de la Salud, con sustentacion en las recomendaciones de la Sociedad Alemana de Quimica Clinica, define interferencia clinicamente relevante cuando se supera el error sistematico deseable (6).

La hemolisis es el proceso de destruccion de los hematies con la consiguiente liberacion del contenido intracelular en el plasma, alterando su composicion. La principal molecula intracelular es la hemoglobina, que tiene un espectro de absorcion caracteristico del grupo Hem, con un pico de 400 nm y varios picos entre 500 y 600 nm, lo que produce un color rojizo en el plasma proporcional a la cantidad de hemoglobina liberada. La hemolisis puede haber sido originada in vivo por diversas alteraciones en los hematies u otras causas, o in vitro por una extraccion o manejo de la muestra de sangre inadecuada. Solo la hemolisis in vitro es considerada como interferencia (7,8).

La hemolisis tiene un marcado efecto en aquellos analitos de elevada concentracion intracelular, los cuales pueden mostrar un sesgo positivo como resultado de la liberacion de estos constituyentes desde el compartimento intracelular hasta el plasma sanguineo.

En el proceso de hemolisis tambien se libera liquido intracelular hacia el espacio extracelular, lo cual puede originar un sesgo negativo en ciertos constituyentes como resultado del proceso de dilucion.

La hemolisis tambien puede producir interferencia espectral cuando la absorbancia de la hemoglobina y del cromogeno producido en la reaccion se solapan, debido a que la hemoglobina tiene una elevada absorbancia, entre 400 y 600 nm, por lo que puede interferir en procedimientos con lecturas en esa region del espectro.

Ademas, el grupo hemo, el hierro, la adenilato cinasa, las proteasas y otros componentes intracelulares liberados en el proceso de hemolisis, pueden interferir en diversas reacciones quimicas [7,8].

El objetivo del presente estudio es conocer y cuantificar la posible interferencia producida por la hemolisis en la medicion rutinaria de 25 constituyentes bioquimicos en el autoanalizador ADVIA 1800, empleando para ello el criterio de interferencia clinicamente relevante, cuando se supera el maximo error sistematico deseable.

METODOS

Los 25 constituyentes investigados fueron valorados en el analizador ADVIA 1800 con reactivos y calibra dores de Siemens[R]. Para la medicion de hemoglobina se utilizo un contador de celulas sanguineas SYSMEX XE-2100 de Roche Diagnostics[R], mediante el metodo SLS (sulfato laurico de sodio).

Ambos analizadores fueron calibrados previamente de acuerdo a las recomendaciones del fabricante. El programa de control de calidad interno incluyo la evaluacion de sueros controles BIO-RAD[R] de 2 niveles de decision, que se procesaron diariamente, y una muestra quincenal de control de calidad externo internacional (RIQAS).

En la tabla 1 se muestra los constituyentes analizados, los metodos en los que se basan las mediciones de los distintos analitos y la concentracion serica basal (sin interferente) de los constituyentes en estudio.

El estudio es descriptivo comparativo, donde se compara el valor medido de la magnitud en una muestra sin interferente con los valores obtenidos cuando se adicionan a la muestra concentraciones conocidas del interferente. Para lo cual se ha seguido el protocolo de la Comision de Metrologia y Sistemas Analiticos de la Sociedad Espanola de Quimica Clinica (8).

Para la preparacion del hemolizado, se centrifugo a 1 200 g durante 10 minutos 5 mL de sangre total heparinizada. Posteriormente se elimino el plasma y se reemplazo con 10 mL de solucion salina (NaCl 154 mmol/L) ; se invirtio el tubo varias veces, se centrifugo por 10 minutos a 1 200 x g y se decanto el sobrenadante. Este proceso de lavado con solucion salina se repitio 2 veces mas. En el ultimo lavado se desecho el sobrenadante y se adiciono al paquete globular 2,5 mL de agua desionizada. Se mezclo invirtiendo el tubo varias veces. La solucion asi preparada fue congelada a -20 [grados]C por 13 horas, al cabo de lo cual se descongelo, agito y centrifugo 30 minutos a 1 200 x g. Se descarto el sedimento (eliminacion de estromas celulares) y se cuantifico en el sobrenadante la concentracion de hemoglobina libre por el metodo de sulfato laurico de sodio. La concentracion de hemoglobina de la solucion de partida fue 10,5 g/dL.

Para la preparacion del suero base, se recolecto 25 mL de un pool de sueros libre de hemolisis, lipemia o ictericia, proveniente de sujetos voluntarios de ambos sexos, sin importar la edad, y sin patologias conocidas.

Para conseguir varios grados de hemolisis, se anadio cantidades crecientes del hemolizado a siete diferentes alicuotas del pool de sueros (suero base). En esta preparacion, la mezcla libre de hemolizado se igualo en volumen a las alicuotas con interferente, utilizando agua destilada. Se obtuvo siete muestras con concentraciones crecientes de hemoglobina y una basal sin interferente.

Se pudo medir la hemoglobina en las tres ultimas diluciones ([6.sup.a], [7.sup.a], [8.sup.a]) y se determino la concentracion de hemoglobina teorica en las soluciones [1.sup.a], [2.sup.a], [3.sup.a], [4.sup.a] y [5.sup.a], ya que estos valores estuvieron por debajo del limite de deteccion del analizador hematologico. Las concentraciones resultantes de las alicuotas fueron: [1.sup.a] 0 g/L, [2.sup.a] 0,26 g/L, [3.sup.a] 0,53 g/L, [4.sup.a] 1,05 g/L, [5.sup.a] 2,10 g/L, [6.sup.a] 3,25 g/L, [7.sup.a] 4,30 g/L y [8.sup.a] 5,25 g/L (figura 1).

Cada una de las diluciones se analizo por duplicado de forma independiente, y pudo determinarse asi el porcentaje de variacion en la concentracion de cada analito ensayado en funcion del incremento en el grado de hemolisis de las muestras.

La evaluacion de las interferencias se realizo mediante el metodo de Glick y col (9), expresandose los resultados como un porcentaje del resultado original. Para ello, se hace una representacion grafica de esta relacion mediante un interferograma, en el que se representa (C/[C.sub.O]) x 100 frente a la concentracion de hemoglobina de cada alicuota, donde ([C.sub.O]) es la concentracion inicial sin interferente y (C) la concentracion medida experimentalmente del constituyente en estudio. Las interferencias se compararon con las actuales especificaciones de calidad analitica para el maximo error sistematico deseable (MESD), derivada de la variacion biologica intraindividual. Se considero a la interferencia como clinicamente relevante cuando era superior al MESD (10,11).

Para el caso puntual de la bilirrubina total, esta se trata de una variable que primero disminuye su valor y luego, a medida que aumenta la concentracion del interferente, aumenta. Es decir, existe una relacion de no linealidad, lo que indica que la interferencia en este caso depende no solo de la cantidad de hemoglobina sino tambien de la concentracion de bilirrubina. Para tal efecto se procedio a realizar un ensayo, basado en el modelo de Kroll (12), que utiliza una regresion multiple con tres variables independientes: la concentracion del constituyente, la concentracion del interferente y el producto de los dos o la interaccion constituyente-interferente:

[FIGURA 1 OMITIR]

C = [[beta].sub.0] + [[beta].sub.1] [C.sub.O] + [[beta].sub.2] I+[[beta].sub.3][C.sub.O] I

Donde [C.sub.O] = concentracion inicial o teorica del constituyente en estudio, C = concentracion experimental o medida, e I = concentracion del interferente; el coeficiente [[beta].sub.0] representa el intercepto de la regresion multiple y ha de ser proximo a cero; el coeficiente [[beta].sub.1] indica si el metodo es o no valido para dicho analito y ha de ser proximo a la unidad. Los coeficientes [[beta].sub.2] y [[beta].sub.3] representan la interferencia independiente y dependiente de la concentracion del constituyente, respectivamente; el valor de cada uno de estos coeficientes esta relacionado con la magnitud de la interferencia y su signo con la direccion de la interferencia, ya sea positiva o negativa.

El diseno del experimento para este modelo es una matriz ortogonal con concentraciones progresivamente crecientes del constituyente (0,2 mg/dL, 0,5 mg/dL, 1,0 mg/dL y 2 mg/dL de bilirrubina) y del interferente (0 g/L, 0,26 g/L, 0,53 g/L, 1,05 g/L, 2,1 g/L, 3,25 g/L, 4,3 g/L, 5,25 g/L de hemoglobina). Es decir, se preparo 32 muestras diferentes, logrando conformar una matriz de cuatro concentraciones del constituyente y ocho concentraciones de hemoglobina.

Si los coeficientes [[beta].sub.2] o [[beta].sub.3] son distintos de cero, existe interferencia independiente o dependiente de la concentracion del constituyente respectivamente. En algunos casos, ambos coeficientes son distintos de cero debido a una interferencia mixta dependiente e independiente de la concentracion del constituyente. Si dichos coeficientes no son distintos de cero, no existen tales interferencias.

Con relacion al analisis estadistico, se determino el promedio y la imprecision (coeficiente de variacion) de los duplicados de la concentracion de los constituyentes estudiados para cada alicuota. Para el caso particular de la bilirrubina, se realizo el analisis de regresion multiple, el calculo de los coeficientes de dicha regresion y la probabilidad de que los coeficientes fueran significativamente diferentes de cero, para p< 0,05. Para el analisis estadistico se empleo el software SPSS version 21 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.).

[FIGURA 2 OMITIR]

RESULTADOS

Utilizando el criterio de maximo error sistematico deseable, basados en estudios de variabilidad biologica (10,11), en el presente estudio se encontro interferencia clinicamente relevante en 16 constituyentes de los 25 estudiados.

Los constituyentes urea, creatinina, acido urico, bilirrubina total, colesterol HDL, colesterol LDL, trigliceridos, calcio y gammaglutamil transferasa no presentaron interferencia debida a hemolisis en todas las alicuotas con concentraciones crecientes de hemoglobina empleadas en el ensayo.

Se observo interferencia para glucosa, proteinas, albumina, colesterol, potasio, fosforo, magnesio, deshidrogenasa lactica, creatinfosfoquinasa, aspartato aminotransferasa, alanino aminotransferasa, lipasa, sodio, cloro, fosfatasa alcalina y amilasa.

La imprecision expresada en terminos de coeficiente de variacion presento un valor minimo de 0% y maximo de 3,6% para todos los constituyentes analizados por duplicado.

En la tabla 2 se expone los porcentajes relativos de desviacion de la concentracion del constituyente con respecto al resultado inicial, las especificaciones de calidad analitica para el maximo error sistematico deseable y las alicuotas donde se detecta la interferencia clinicamente relevante para cada uno de los constituyentes.

En la figura 2 se representa los interferogramas (9), donde se aprecia el efecto de la adicion de cantidades crecientes del interferente (hemoglobina) sobre la concentracion de los analitos estudiados.

Para el caso de la bilirrubina, se obtuvo la siguiente ecuacion de regresion multiple:

C= -0,014 + 0,944[C.sub.O] - 0,06 I + 0,04 [C.sub.O]I

En nuestro estudio, el valor del coeficiente [[beta].sub.0] = -0,014 estuvo proximo a cero, mientras que el coeficiente [[beta].sub.1] = 0,944 se acerco a la unidad, por lo que puede decirse que este metodo es valido para la evaluacion de esta tecnica analitica. Los coeficientes [[beta].sub.2] y [[beta].sub.3] no resultaron significativamente distintos de cero (p>0,05), lo que confirma la no interferencia de hemoglobina hasta una concentracion de 5,25 g/L para la determinacion de bilirrubina total. Resultados que son detallados en la tabla 3.

DISCUSION

La interferencia analitica por hemolisis es un problema que afecta a todos los laboratorios. Siempre se cuestiona la exactitud de los resultados cuando se analiza este tipo de muestras. La solucion no esta en solo anadir comentarios como 'muestra hemolizada' a los reportes de laboratorio; es importante tambien conocer la cantidad y el signo posible de dicha interferencia.

Los primeros estudios publicados sobre el efecto de la hemolisis consideraban como interferencia significativa un 10% de variacion sobre el resultado de la muestra sin interferente. Este criterio, utilizado por muchos fabricantes en sus estudios de evaluacion, es mas permisivo en las magnitudes con pequena variabilidad biologica y puede ser menos permisivo en aquellas con elevada variabilidad intraindividual o interindividual (1,6).

Nuestros resultados indican que, si hubieramos utilizado el criterio anteriormente mencionado, algunos constituyentes no hubieran sido detectados como sensibles a la presencia del interferente. Lo que sugiere que la significacion del efecto de la hemolisis debe establecerse en cada laboratorio y para cada magnitud de acuerdo con sus propias especificaciones de calidad.

Ante la presencia de hemolisis con una concentracion de hemoglobina igual o mayor a 0,53 g/L, los resultados de potasio, deshidrogenasa lactica y aspartato aminotransferasa se vieron afectados, lo que se traduce en una perdida de fiabilidad en los resultados obtenidos para los analitos, inclusive cuando se presenta hemolisis ligera. Diversos estudios han encontrado que dicha interferencia es debida a las mayores concentraciones de estos constituyentes en el interior del hematie que en el suero (5,14,15).

En cuanto al colesterol, que usa la reaccion de Trinder como reaccion indicadora, hemos obtenido interferencia al igual que otros estudios (14,15), lo cual parece logico dado las propiedades seudoperoxidasa de la hemoglobina.

En el caso de los trigliceridos y el acido urico que tambien usan la reaccion de Trinder como reaccion indicadora, no hemos obtenido interferencia significativa, resultado que concuerda con Lippi y Caballero (5,14), pero que discrepan con Steen y Castano, que obtuvieron interferencia para ambos constituyentes (15,16).

Para el caso de las lipoproteinas de alta densidad (HDL) y de baja densidad (LDL) determinadas mediante el metodo directo, se advirtio interferencia nula para ambos casos, resultado similar a lo citado por Aguilar (12).

En similitud con los resultados de otros estudios (5,14,15,17), encontramos interferencia debida a la hemolisis en la medicion de la actividad de la enzima fosfatasa alcalina, que se detecta a una concentracion igual o mayor de 1,05 g/L de hemoglobina, atribuida a una interferencia espectral.

Para el caso concreto de la amilasa, esta presento interferencia en la ultima alicuota, correspondiente a una concentracion de hemoglobina de 5,25 g/L, resultado que no coincide con Aguilar, quien determino interferencia no significativa para dicho analito en el autoanalizador Sistema Modular Roche/ Hitachi SWA. Sin embargo, en este estudio se utilizo como ultima alicuota una concentracion de hemoglobina de 5,11 g/L (13).

En el caso de los electrolitos, el unico que presento efecto nulo por hemolisis fue el calcio, resultado que coincide con otros estudios (5,13-15,17).

Nuestros resultados para la albumina y las proteinas coinciden con los de Steen (15), pero no con los publicados por Aguilar (13). Hay que considerar que el principio del metodo para dosar proteinas se basa en la formacion de un complejo morado como consecuencia de la interaccion de los enlaces peptidicos de las proteinas con los iones de cobre del reactivo de Biuret, que se mide a 545 nanometros (nm) como reaccion de punto final, longitud de onda que coincide con los puntos de maxima absorbancia de la hemoglobina, lo cual parece ser la causa para dicha interferencia.

Al igual que otros estudios (5,13,14), encontramos una sobreestimacion en los resultados de actividad de la enzima creatinfosfoquinasa, interferencia que ha sido atribuida a la liberacion de la adenilatoquinasa intracelular, como consecuencia de la hemolisis.

La gammaglutamiltransferasa no se vio afectada por la hemolisis en todas las alicuotas empleadas en el estudio, resultado semejante a lo obtenido por Aguilar, quien empleo la misma metodologia pero diferente autoanalizador (13).

Destaca en nuestros resultados la interferencia para glucosa a concentraciones de hemoglobina igual o mayor de 4,30 g/L, dato que discrepa con Aguilar y Caballero (13,14), quienes en diferentes analizadores no encontraron interferencia, a pesar que en estos dos estudios emplearon la misma metodologia (hexocinasa).

Para la determinacion de creatinina se uso la tecnica enzimatica de creatininasa, la cual presento interferencia nula para hemolisis en todas las diluciones de hemoglobina empleadas en nuestro estudio, resultados que concuerdan con Aguilar, quien utilizo la misma metodologia pero diferente analizador (13). Es importante senalar que Murray reporta interferencia a partir de una concentracion de hemoglobina de 1g/L para esta determinacion, utilizando la metodologia de Jaffe cinetico (7,19).

El estudio de valoracion de interferencia por hemolisis debe realizarse con una muestra que tenga una concentracion del analito proxima a los valores de decision clinica. En algunos casos, el efecto de la interferencia no solo depende de la concentracion de la sustancia interferente, sino tambien de la concentracion del constituyente, como fue el caso de la bilirrubina. En nuestro estudio nos ha resultado imposible obtener un pool de sueros cuyas concentraciones esten todas proximas a los valores de decision clinica.

La interferencia espectral por hemolisis se produce cuando el espectro de absorcion del interferente y la del cromogeno producido en la reaccion se solapan; muchos instrumentos de uso corriente emplean diferentes tecnicas para la correccion de las interferencias espectrales. Estas tecnicas involucran el uso de un blanco de muestra, el analisis bicromaticos o mediante la correccion de Allen (7), todo esto sumado a las diferentes metodologias o reactivos que se emplean para medir los diferentes constituyentes, ademas del empleo de diferentes criterios para establecer el limite de error maximo admisible para establecer interferencia significativa, pueden ser causas de la discordancia de resultados en los diferentes estudios para este tipo de interferencia.

Es interesante notar que metodologias teoricamente identicas o muy semejantes brindan resultados distintos ante la presencia de hemolisis, lo que nos indicaria que el analisis de interferencia aqui realizado no puede ser generalizado para otros reactivos o equipos. Es recomendable que cada laboratorio investigue los efectos de dicha interferencia empleando sus propios reactivos, metodos o instrumentos.

La mayoria de los actuales autoanalizadores tiene la capacidad de detectar la hemolisis en las muestras de suero mediante indices sericos que se correlacionan linealmente con las concentraciones del interferente. Los indices pueden ser usados para detectar la interferencia generando tablas de tolerancia, con indices de decision que indican cuando hay una interferencia. En nuestro medio, a pesar de contar con estos equipos, no se hace uso de esta tecnologia por desconocimiento o por la excusa de consumo de tiempo de proceso del analizador y necesidad de reactivos especificos en algun caso (6,8,13).

Podemos concluir que las muestras hemolizadas son un problema importante en todos los laboratorios. Las principales causas que la originan son la extraccion o manejo de la muestra de sangre de forma inadecuada, especialmente en areas de alta presion asistencial como en las unidades de cuidados intensivos y los servicios de emergencia.

Los laboratorios deben asegurar la deteccion de la hemolisis y tener establecidas las acciones que se van a tomar frente a estas muestras.

http://dx.doi.org/10.15381/anales.v76i4.11407

AGRADECIMIENTOS

Al Licenciado Tecnologo Medico Arturo Arzapalo Poma por su tiempo y aportes durante el desarrollo del presente trabajo.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

(1.) Castano JL. Estudio de las interferencias analiticas endogenas en quimica clinica. Quim Clin. 1994;13:84-92.

(2.) Castano JL. Criterios para la valoracion de la significacion analitica y clinica de las interferencias en bioquimica clinica. Quim Clin. 1995;14:107-9.

(3.) Clinical and Laboratory Standards Institute. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline-Second Edition. EP7-A2. USA 2010.

(4.) Lippi G, Blanckaert N, Bonini P, Green S, Kitchen S, Palicka V, et al. Haemolysis: an overview of the leading cause of unsuitable specimens in clinical laboratories. Clin Chem Lab Med. 2008;46:764-72. doi: 10.1515/CCLM.2008.

(5.) Lippi G, Salvagno GL, Montagnana M, Brocco G, Guidi GC. Influence of hemolysis on routine clinical chemistry testing. Clin Chem Lab Med. 2006;44:311-6.

(6.) Gomez Rioja R, Alsina Kirchner MJ, Alvarez Funes V, Barba Meseguer N, Cortes Rius M, 345 Llopis Diaz MA, Martinez Bru C. Hemolisis en las muestras para diagnostico. Rev Lab Clin. 2009; 2(4): 18595. doi: 10.1016/j.labcli.2009.08.002

(7.) Kaplan L, Pesce A. Interferencias en el analisis espectral. En: Kaplan L, Pesce A. Quimica Clinica, teoria, analisis y correlacion. Buenos Aires: Ed. Medica Panamericana; 1988:1 163-76.

(8.) Sociedad Espanola de Bioquimica Clinica y Patologia Molecular. Procedimiento para el estudio de la interferencia por hemolisis, bilirrubina y turbidez y para la verificacion de los indices de hemolisis, ictericia y lipemia. Comision de Metrologia y Sistemas Analiticos. Documento Tecnico 2013.

(9.) Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical comparisons of interferences in clinical chemistry instrumentation. Clin Chem. 1986;32:470-5.

(10.) Ricos C, Garcia Lario JV, Alvarez V, Cava F, Domenech MV, Hernandez A, et al. Biological variation database. The 2014 update. [Consultado 8/7/2014]. Disponible en: http://www. westgard. com/biodatabase1.htm.

(11.) Sociedad Espanola de Bioquimica Clinica y Patologia Molecular. Comite de garantia de la Calidad y Acreditacion de Laboratorios. Comision de calidad Analitica. Base de datos De variacion biologica. Actualizacion del ano 2014: Disponible en http:// www.seqc.es/es/Sociedad/51/102.

(12.) Castano J, Ventura S. Recomendaciones para el estudio de las interferencias dependientes de la concentracion del constituyente. Quim Clin. 2001 ;20(4):257-60.

(13.) Garcia Aguilar GD, Pico Picos MA, Quintana Hidalgo L, Cabrera Argany A, Lorenzo Medina M, Aguilar Doreste JA. Utilidad de los indices sericos para la valoracion de las interferencias causadas por la hemolisis y la bilirrubina en la medicion de distintos constituyentes bioquimicos. Quim Clin. 2007;26:196-201.

(14.) Caballero Sarmiento R. Estudio de las interferencias producidas por la hemolisis en la medicion de 18 constituyentes sericos en un ADVIA 2400. Quim Clin. 2007;26:20-2.

(15.) Steen G, Vermeer HJ, Naus AJ, Goevaerts B, Agricola PT, Schoenmakers CH. Multicenter evaluation of the interference of hemoglobin, bilirubin and lipids on Synchron LX-20 assays. Clin Chem Lab Med. 2006;44:413-9.

(16.) Castano JL, Araquistain JL Interferencias causadas por la bilirrubina, hemoglobina y hemolisis en la determinacion de 15 constituyentes sericos. Quim Clin. 1989;8:47-55.

(17.) Ji JZ, Meng QH. Evaluation of the interference of hemoglobin, bilirubin, and lipids on Roche Cobas 6000 assays. Clin Chim Acta. 2011 Aug 17;412(171 8):1 550-3. doi: 10.101 6/j.cca.2011.04.034.

(18.) Grafmeyer D, Bondon M, Manchon M, Levillain P. The influence of bilirubin, hemolysis and turbidity on 20 analytical tests performed on automatic analysers. Results of an interlaboratory study. Eur J Clin Chem Clin Biochem. 1995;33:31-52.

(19.) Murray RL. Creatinina. En Kaplan L, Pesce A, Quimica Clinica, teoria, analisis y correlacion. Buenos Aires: Ed. Medica Panamericana; 1988.

Articulo recibido el 3 de marzo de 2015 y aceptado para publicacion el 6 de junio de 2015.

Conflicto de intereses: El autor declara no tener ningun conflicto de intereses.

Correspondencia:

Italo Moises Saldana Orejon

Departamento de Patologia Clinica, Servicio de

Bioquimica, Hospital Nacional Edgardo Rebagliati

Martins, EsSalud, Lima, Peru

imso_biochemical@yahoo.es

Italo Moises Saldana O [1], (a)

[1] Departamento de Patologia Clinica, Servicio de Bioquimica, Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins, EsSalud, Lima, Peru.

(a) Tecnologo Medico- Quimico farmaceutico.
Tabla 1. Metodos y concentracion serica de los constituyentes
investigados.

Constituyente       Metodo

Glucosa             Hexocinasa
Urea                Ureasa con GLDH
Creatinina          Creatininasa
Acido urico         Uricasa/peroxidasa
Proteinas           Biuret
Albumina            Verde de bromocresol
Bilirrubina total   Oxidacion por vanadato
Colesterol total    CHOD,Trinder
HDL colesterol      Eliminacion/catalasa. Directo
LDL colesterol      Eliminacion/catalasa. Directo
Trigliceridos       GPO, Trinder sin blanco de suero
Sodio               Potenciometria indirecta
Potasio             Potenciometria indirecta
Cloro               Potenciometria indirecta
Calcio              o-cresolftaleina complexona
Fosforo             Fosfomolibdato UV
Magnesio            Azul de xilidilo
LDH                 Lactato/NAD
CK                  IFCC, activado con NAC
AST                 IFCC modificado
ALT                 IFCC modificado
FAL                 IFCC modificado
GGT                 IFCC modificado
Amilasa             pNPG7 bloqueado con etilideno
Lipasa              Cinetica colorimetrica

Constituyente       Concentracion serica
                    del constituyente
                    en estudio

Glucosa             6,66 mmol/L (120 mg/dL)
Urea                10,79 mmol/L (65 mg/dL)
Creatinina          128,18 [micron]mol/L (1,45 mg/dL)
Acido urico         255,76 [micron]mol/L (4,3 mg/dL)
Proteinas           58,1 g/L (5,81 g/dL)
Albumina            28 g/L (2,8 g/dL)
Bilirrubina total   10,43 [micron]mol/L (0,61 mg/dL)
Colesterol total    3,57 mmol/L (138 mg/dL)
HDL colesterol      0,85 mmol/L (32,75 mg/dL)
LDL colesterol      2,25 mmol/L (87 mg/dL)
Trigliceridos       1,55 mmol/L (137 mg/dL)
Sodio               133 mmol/L (133 mEq/L)
Potasio             3,79 mmol/L (3,79 mEq/L)
Cloro               100 mmol/L (100mEq/L)
Calcio              1,91 mmol/L (7,62 mg/dL)
Fosforo             1,13 mmol/L (3,50 mg/dL)
Magnesio            0,76 mmol/L (1,86 mg/dL)
LDH                 235 U/L
CK                  182 U/L
AST                 42 U/L
ALT                 32,5 U/L
FAL                 127,5 U/L
GGT                 123,5 U/L
Amilasa             93,5 U/L
Lipasa              45,5 U/L

* GLDH: glutamato deshidrogenasa, CHOD: colesterol-oxidasa, GPO:
glicerol fosfato oxidasa, UV: ultravioleta, LDH: lactato
deshidrogenasa, CK: creatina cinasa, IFCC: Federacion Internacional
de Quimica Clinica, NAC:N-acetil-L-cisteina, AST: aspartato
aminotransferasa, ALT: alanina aminotransferasa, FAL: fosfatasa
alcalina, GGT: gammaglutamiltransferasa, pNPG7: p-nitrofenil-
maltoheptaosido.

Tabla 2. Porcentaje relativo de desviacion de la concentracion del
constituyente con respecto al resultado inicial por influencia de la
hemolisis y especificaciones para el maximo error sistematico
deseable.
                                             emoglobina (g/L)

Constituyente        Error sistematico
                     deseable % (+/-)    0,0   0,26   0,53   1,05

Glucosa *                  2,34          0,0   0,4    1,3     1,3
Urea                       5,57          0,0   0,0    0,0     0,0
Creatinina                 3,96          0,0   -0,3   -0,3   -0,3
Acido urico                4,87          0,0   -1,2   -1,2   -3,5
Proteinas *                1,36          0,0   0.5    0.3     0,9
Albumina *                 1,43          0,0   0,4    0,5     0,9
Bilirrubina total          8,95          0,0   -5,0   -5,8   -8,3
Colesterol total *         4,10          0,0   1,8    1,8     2,2
HDL colesterol             5,61          0,0   0,0    0,0     0,0
LDL colesterol             5,46          0,0   0,6    0,0     0,6
Trigliceridos              9,57          0,0   0,4    1,5     2,6
Sodio *                    0,23          0,0   0,0    0,0     0,0
Potasio *                  1,81          0,0   2,1    5,3     9,3
Cloro *                    0,47          0.0   0,0    0,0    -1,0
Calcio                     0,82          0,0   0,2    0,2     0,1
Fosforo *                  3,38          0,0   0,9    1,6     2,7
Magnesio *                 1,84          0,0   1,6    1,1     1,9
LDH *                      4,26          0,0   16,4   32,3   58,3
CK *                       11,51         0,0   2,8    6,3    10,5
AST *                      6,54          0,0   2,4    10,7   20,2
ALT *                      11,48         0,0   4,6    9,2    10,8
FAL *                      6,72          0,0   -5,1   -5,1   -8,2
GGT                        11,06         0,0   -1,2   -2,0   -3,2
[alfa]-Amilasa *           7,40          0,0   1,1    0,5    -0,53
Lipasa *                   11,31         0,0   0,0    1,1     5,5

                           Hemoglobina (g/L)

Constituyente        2,10    3,25    4,30    5,25

Glucosa *             1,7     1,7     2,5     3,8
Urea                  0,0     0,0     1,5     1,5
Creatinina           -0,3     0,3     0,3     0,7
Acido urico          -3,5    -4,7    -4,7    -4,7
Proteinas *           1,6     2,8     5,2     6,1
Albumina *            1,3     3,8     5,9     7,5
Bilirrubina total    -0,8     0,0     0,8    1,65
Colesterol total *    5,1     5,1     6,9     8,3
HDL colesterol        0,0     0,0     0,0     0,0
LDL colesterol        2,3     2,3     3,4     3,4
Trigliceridos         4,4     4,7     6,6     7,7
Sodio *              -0,38   -0,38   -0,38   -0,38
Potasio *            18,0    25,5    32,0    41,1
Cloro *              -0,8    -0,5    -0,5    -0,5
Calcio                0,5     0,0     0,7     0,2
Fosforo *             4,0     6,6     8,6    10,9
Magnesio *            1,9     3,8     7,5     5,4
LDH *                 112     156     192     240
CK *                 20,7    31,4    39,7    46,8
AST *                33,3    50,0    63,1    82,1
ALT *                12,3    20,0    20,0    23,1
FAL *                -11,0   -15,3   -17,6   -25,5
GGT                  -2,0    -1,2    -2,4    -4,0
[alfa]-Amilasa *     -1,6    -3,2    -4,8    -9,1
Lipasa *             12,1    18,7    25,3    30,8

Los resultados son comparados con las especificaciones de
inexactitud deseable, los que exceden dichas especificaciones estan
marcados en negrita y cursiva.

(*) Constituyentes en las que se encuentra interferencia.

Tabla 3. Analisis de los coeficientes de regresion
multiple resultantes de la interferencia de la
hemoglobina con bilirrubina total (R2 = 0,994).

Variable                            Coeficiente   Valor del     Nivel
                                                  coeficiente     p *

Intercepto                            [beta]0       -0,014      0,578
Bilirrubina total                     [beta]1        0,944      0,000
Interferente (hemoglobina)            [beta]2       -0,006      0,498
Bilirrubina total--Interferente       [beta]3        0,004      0,650

* Valores de p < 0,05 son considerados
significativamente diferentes de cero.
COPYRIGHT 2015 Universidad Nacional Mayor de San Marcos
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2015 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Saldana O, Italo Moises
Publication:Anales de la facultad de medicina
Date:Dec 22, 2015
Words:5495
Previous Article:Conocimiento y practicas de prevencion sobre el virus del papiloma humano (VPH) en universitarios de la Sierra Sur, Oaxaca.
Next Article:Infeccion urinaria alta comunitaria por E.coli resistente a ciprofloxacino: caracteristicas asociadas en pacientes de un hospital nacional en peru.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2019 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters