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Impacto de los residuos de ivermectina en los procesos tecnologicos de la leche y sus derivados.

INTRODUCCION

Actualmente se conocen numerosos farmacos veterinarios capaces de dejar residuos en leche y practicamente no existen animales que no hayan recibido algun tipo de producto quimioterapico en alguna etapa de su vida. Por lo tanto, los consumidores estan potencialmente expuestos a ingerir residuos de sustancias que pueden inducir cierto grado de toxicidad aguda o cronica (12).

La presencia de residuos de medicamentos en leche puede tener efectos negativos sobre la salud publica (3). Por otra parte, los residuos quimicos, particularmente compuestos antimicrobianos (penicilina, cloxacilina, clorhidrato de tetraciclina y estreptomicina) pueden retrasar o alterar los procesos bacteriologicos utilizados en la fabricacion de determinados productos lacteos como el yogur y el queso (2).

Las bacterias acido lacticas son germenes Gram positivos que producen acido lactico como resultado de la fermentacion de hidratos de carbono. Estan normalmente presentes en la leche y tambien se utilizan como cultivos iniciadores en la elaboracion de productos lacteos fermentados como el yogur. Las bacterias acido lacticas juegan un papel crucial en la produccion de alimentos fermentados como verduras, carnes y--especialmente--productos lacteos.

Los farmacos antiparasitarios son agentes quimioterapeuticos utilizados ampliamente en la practica veterinaria para controlar los parasitos del ganado (11). Las ventajas productivas del tratamiento de animales productores de leche con antihelminticos, ha sido ampliamente documentada (8,10). Entre estos compuestos, solo un numero limitado esta autorizado para ser utilizado durante el periodo de lactancia (6).

La ivermectina (IVM) es una lactona macrociclica de amplio espectro que posee caracteristicas farmacologicas ideales para el control de las parasitosis internas y externas. Si bien su empleo no esta recomendada para animales en periodo de lactancia, su uso "extra marbete" para el tratamiento de parasitosis en bovinos y ovinos lecheros es una practica muchas veces utilizada en diferentes explotaciones. Esta situacion plantea la necesidad de estudiar si las ventajas de utilizacion de este farmaco en el tratamiento de las parasitosis en animales en lactacion son compatibles con la calidad higienico-sanitaria de la leche y la seguridad del consumidor.

Son pocos los estudios realizados sobre las concentraciones de residuos de farmacos en alimentos sometidos a procesos tecnologicos de elaboracion como pasteurizacion, congelacion y coccion. La estabilidad termica de las lactonas macrociclicas fue evaluada en leche ovina sometida a diferentes temperaturas (4). Sin embargo, resulta importante profundizar los conocimientos sobre el impacto de estos farmacos sobre los procesos de fermentacion acido lactica, especialmente cuando la industrializacion de la leche se basa en la calidad de los procesos de fermentacion acida. Por otra parte, resulta necesario indagar el efecto que pueden tener estas drogas sobre la cantidad y morfologia de las bacterias acido lacticas.

En consecuencia, los objetivos de este trabajo fueron: a) evaluar la estabilidad de las concentraciones residuales de IVM en leche cruda de vaca y oveja sometidas a pasteurizacion a baja temperatura/largo tiempo y a alta temperatura/corto tiempo; b) evaluar los efectos de diferentes concentraciones de IVM sobre la fermentacion acido lactica de las bacterias en leches de vaca y oveja mediante el test de la prueba de yogur, y c) evaluar la viabilidad de las bacterias lacticas obtenidas de yogures elaborados a partir de leches de vaca y oveja con residuos de IVM, realizando un recuento en placa de las bacterias lacticas y evaluando la morfologia de las bacterias por microscopia electronica de barrido.

MATERIAL Y METODOS

Evaluacion de la estabilidad termica de los residuos de IVM en leche. Para la preparacion de la leche sin tratamiento termico, muestras sin residuos del farmaco (1 ml) fueron obtenidas de vacas y ovejas lactantes y fueron fortificadas con IVM (1, 5 y 10 ng/ml patron de referencia), siendo utilizadas para validar el metodo de cromatografia liquida de alta performance (HPLC). Soluciones patron de IVM se prepararon por diluciones sucesivas en metanol a partir de una solucion madre de 1 mg/ml. Las muestras de leche fortificadas fueron adicionadas con abamectina (ABM) como estandar interno de IVM.

Preparacion de muestras con tratamientos termicos. Muestras de leche de vaca y oveja sin residuos del farmaco fueron fortificadas con IVM (1-10 ng/ml) y sometidas a tratamiento termico (pasteurizacion) a baja temperatura/largo tiempo (65[grados]C, 30 min, LTLT) o a alta temperatura/corto tiempo (75[grados]C, 15 s, HTST) en un bano termico de laboratorio. En cada procedimiento la temperatura de las muestras fue monitoreada durante todo el proceso, con un termometro de mercurio inmerso en el interior de la muestra de leche. Finalizado el tiempo de exposicion, la temperatura de las muestras fue reducida rapidamente en bano de agua fria a 4[grados]C. Las muestras tratadas termicamente y no tratadas, fueron suplementados con estandar interno y analizadas por HPLC.

Tambien se prepararon controles (muestras de leche sin droga), los cuales fueron sometidos a la misma temperatura que las muestras experimentales con el fin de descartar la posibilidad de la presencia de interferencias endogenas en el tiempo de retencion de IVM durante la corrida cromatografica.

Analisis de las concentraciones de IVM en leche por HPLC. Los procedimientos de extraccion y las condiciones cromatograficas para la cuantificacion de IVM en muestras de leche de vaca y oveja se llevaron a cabo siguiendo tecnicas propias descritas previamente (J Agrie Food Chem 52: 6205-6211, 2004). Antes de analizar las muestras experimentales se realizo una validacion completa de los procedimientos analiticos para la extraccion y cuantificacion de IVM en leche de vaca y oveja.

Las concentraciones del farmaco en las muestras experimentales se determinaron por HPLC calculando la relacion entre las areas bajo los picos de IVM y su estandar interno (ABM) usando el Software de Clase LC 10, version 1.2, y la interpolacion de estas areas en las lineas de calibracion realizadas en leche. Se utilizo el programa estadistico Instat 3,0 (Graph Pad Software Inc., San Diego, CA, EE.UU.) para el analisis de regresion lineal y pruebas de linealidad. Se empleo la prueba t de Student para estimar las diferencias entre las concentraciones de farmaco obtenidas en muestras de leche sin tratar y tratadas termicamente. Un p<0,05 fue considerado como estadisticamente significativo.

Evaluacion de los procesos defermentacion acido lactica. La "prueba del yogur" o test de inhibicion del yogur (7) se utilizo para determinar cualitativamente la presencia de sustancias inhibidoras en leche. Esta prueba se basa en la coagulacion acida, donde la produccion de acido lactico a partir de la fermentacion bacteriana (bacterias lacticas) se traduce en acidificacion del medio. La prueba pone de manifiesto la capacidad de ciertas sustancias (inhibidoras) para suprimir parcial o totalmente la actividad normal de las bacterias lacticas, lo cual se traduce en ausencia de aumento de acidez de la leche.

Preparacion de muestras experimentales--Muestras de leche. Leche en polvo (La Serenisima[R], Argentina, lote 4128) fue reconstituida antes de ser utilizada con 10% de agua destilada esteril. La leche reconstituida libre de sustancias inhibitorias (leche blanco) fue fraccionada (10 ml) en tubos esteriles.

Cultivo bacteriano. El cultivo iniciador fue preparado en condiciones de esterilidad, inoculando la leche reconstituida con un 2-3% de cultivo activo de yogur (mezcla de Steptococcus thermophilus y Lactobacillus bulgaricus) e incubandolo en un bano de agua a 45[grados]C durante 2 h 30 min. Luego del periodo de incubacion y para verificar que el cultivo fuese activo, se procedio a medir la acidez. El cultivo bacteriano fue considerado activo con un valor de acidez entre 18 y 25 grados Soxhlet-Henkel (SH).

Este aumento de acidez favorece la coagulacion de la leche en el tiempo establecido y a una temperatura adecuada. Una vez confirmada la actividad del cultivo, fue diluido con agua esteril (1:1, v/v), homogeneizado y adicionado a las muestras control (sin droga) y experimentales de leche bovina/ovina (adicionadas con IVM).

Procedimiento experimental. Diez (10) ml de leche bovina/ovina blanco (sin droga) con 0,5 ml de cultivo bacteriano activo diluido, fueron adicionadas con diferentes concentraciones de IVM (5, 20, 50, 100 y 1000 ng/ml) (n=3). Para corroborar si el solvente metanol (utilizado para preparar las soluciones estandares de IVM) actuaba como inhibidor del crecimiento bacteriano de la leche, fue necesario adicionar metanol (volumen semejante al utilizado) a las muestras que contenian 10 ml de leche bovina/ovina blanco y 0,5 ml de cultivo activo de yogurt diluido (n=3).

La acidez de las muestras de leche (SH) se determino por metodo colorimetrico. Se anadio una solucion alcoholica 2% de fenolftaleina a la muestra de leche. Luego se adiciono NaOH y se agito hasta visualizar un color rosado en la muestra lo que se tomo como una indicacion de neutralidad. El calculo de SH se hizo dividiendo el volumen (ml) de NaOH necesario para alcanzar la neutralidad por un factor de 0,25 de la siguiente manera: SH = ml de NaOH / 0,25.

Antes y despues de la incubacion, se midio la acidez de cada muestra. El valor de incremento de acidez (en SH) fue utilizado como indicador de la actividad del cultivo bacteriano. Este valor fue estimado restando al valor de acidez final el valor de acidez inicial obtenido para cada muestra de leche. Posteriormente los valores de incremento de acidez obtenidos en las muestras experimentales (con droga) fueron comparados con los obtenidos en las muestras de leche control (sin droga).

Si el incremento de la acidez de las muestras de ensayo estaba por encima de la mitad del aumento de la acidez de las muestras control, despues del tiempo de incubacion (2 h 30 min), se considero que la presencia de las sustancia bajo evaluacion (IVM y metanol) no poseian actividad inhibidora. Se utilizo la prueba t de Student para estimar las diferencias entre los incrementos de acidez obtenidos en el control y las muestras de leche enriquecidas (p<0,05 valor fue considerado como estadisticamente significativo).

Recuento microbiologico y aislamiento de bacterias lacticas. Leches bovina y ovina fueron sometidas a pasteurizacion LTLT, enfriadas (45[grados]C) y se les anadio cultivo activo diluido (0,5 ml). Luego se adicionaron diferentes concentraciones de IVM (rango 5-1000 ng/ ml). Por otra parte muestras de leche blanco (10 [micron]l) se enriquecieron con metanol (rango de 50 a 200 pl) mas 0,5 ml de cultivo activo diluido, para corroborar al igual que lo realizado en la prueba de yogur, si el solvente metanol (utilizado para preparar las soluciones estandares de IVM) actuaba como inhibidor del crecimiento bacteriano de la leche. La totalidad de las muestras se incubo en bano de agua a 45[grados]C, 2 h 30 min.

Las muestras de yogur obtenidas se conservaron entre 4 y 8[grados]C durante 12 h antes del cultivo en placas. Posteriormente se realizo el recuento de bacterias lacticas termofilas presentes en los yogures controles, yogures adicionados con IVM y yogures adicionados con metanol en placa de agar leche despues de 48 h de incubacion a 37[grados]C en condiciones de microaerofilia, segun tecnica convencional (9). Los recuentos se realizaron por triplicado.

Por otra parte, se realizo un recuento de bacterias coliformes en agar VRB (violeta rojo bilis, FIL-IDF 1966) (7), verificando de esta manera la correcta pasteurizacion de las muestras de leche. Las caracteristicas fenotipicas de las bacterias se examinaron por microscopia de contraste de fase. Se utilizo la prueba t de Student para estimar la diferencia entre el numero de colonias de las muestra control y las muestras de yogur adicionadas con IVM y metanol. Fue considerado como valor estadisticamente significativo p<0,05.

Observacion de bacterias lacticas por microscopia electronica de barrido. Adicionalmente, se realizaron estudios de ultraestructura de las bacterias lacticas con microscopio electronico de barrido. Se estudiaron bacterias obtenidas de muestras de yogur elaborados a partir de leche bovina y ovina sin farmaco (control) y con IVM (100 ng/ml). Despues de 48 h de incubacion en agar leche a 37[grados]C en condiciones de microaerofilia, se recogieron las colonias de bacterias lacticas y se evaluaron a traves de un microscopio electronico de barrido EVO 40VP con un voltaje de aceleracion de 7 kV. Las muestras de yogur obtenidas se procesaron siguiendo una tecnica de preparado para observacion en microscopia electronica de barrido modificando las etapas de deshidratacion (1). Los criterios para la evaluacion de la viabilidad de bacterias lacticas incluyeron la observacion ultraestructural de la pared de bacterias acido lacticas obtenidas de una muestra de yogur elaborado con leche adicionada con IVM comparando con una muestra de control (yogur elaborado con leche sin residuos del farmaco).

RESULTADOS

Despues de someter las muestras de leche a los tratamientos termicos, en los cromatogramas de las muestras de leche adicionadas con IVM y de leche blanco, no se observaron productos metabolicos de la degradacion de IVM, descartando cualquier posible interferencia endogena en sus tiempos de retencion.

Los resultados para cada tratamiento termico se enunciaron como la diferencia expresada como porcentaje entre la concentracion promedio de IVM recuperada en leche despues del tratamiento termico, respecto de la concentracion promedio de IVM recuperada en muestras de leche sin tratamiento termico.

Los porcentajes obtenidos a partir de estas diferencias se ubicaron en el rango de -3,21 a 3,45% (Tabla 1). Sin embargo. estas variaciones no fueron estadisticamente significativas (p>0,05) y estuvieron dentro del rango de variacion del metodo analitico empleado. Tampoco se observaron diferencias entre los resultados obtenidos para las leches de ambas especies de rumiantes.

Ningun producto metabolico ni de degradacion fue detectado en las corridas cromatograficas correspondientes a las muestras sometidas a tratamiento termico. Estos resultados demuestran que no hubo cambios quimicos, que dieran origen a nuevos compuestos tras la exposicion de la leche con IVM a los tratamientos termicos empleados.

El incremento de la acidez de las muestras de leches bovina y ovina adicionadas con IVM (rango: 5 a 1000 ng/ml) estuvieron por encima de la mitad del valor de incremento de acidez observada en las muestras de leche control (sin residuos). Ademas, se evaluo la influencia de los diferentes volumenes de metanol (rango de 50 a 200 [micron]l) sobre la fermentacion acido lactica en leches bovina y ovina. A partir de esta evaluacion, se determino que un volumen de metanol > a 100 [micron]l afecta a la coagulacion de la leche incubandola a 45[grados]C durante 2 h 30 min. Por lo tanto, la cantidad de solucion de farmaco anadido a una muestra de leche nunca excedio un volumen de 100 [micron]l de metanol.

Por otra parte, se elaboro yogur bovino y ovino con cultivos de bacterias acido lacticas como Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus y Streptococcus thermophilus con leche adicionada con IVM (rango de 5-1000 ng/ml) por triplicado. El recuento de bacterias lacticas de muestras de yogures se realizo en medio agar leche luego de la incubacion microaerofila a 37[grados]C durante 48 h. Los recuentos de bacterias lacticas a partir de muestras de yogures bovino y ovino elaborados con leche adicionada con IVM oscilaron entre 6,93x[10.sup.8] y 8,37x[10.sup.8] unidades formadoras de colonias / mililitro (UFC/ml), con un promedio de 7,73x[10.sup.8] [+ o -] 0,81 (yogur bovino) y 8,01x[10.sup.8] [+ o -] 0,62 UFC/ml (yogur ovino), como indica la Figura 1.

Los recuentos de bacterias lacticas a partir de muestras de yogures elaborados con residuos de IVM no fueron estadisticamente diferentes a las muestras control. Ademas, las muestras de yogur de control positivo adicionadas con penicilina (4 [micron]g/l) dio como resultado un recuento inferior de bacterias lacticas (3,4x[10.sup.8] UFC/ml) y estadisticamente diferentes (p<0,05) a la muestra de control libre de drogas (6,6x[10.sup.8] UFC/ml).

[FIGURA 1 OMITIR]

[FIGURA 2 OMITIR]

La integridad estructural de las bacterias lacticas se evaluo por microscopia electronica de barrido de muestras de yogur control, yogur elaborado a partir de leche bovina con residuos de IVM (100 ng/ml) y yogur elaborado a partir de leche ovina con residuos de IVM (100 ng/ml). Los estudios ultraestructurales no revelaron cambio en la estructura de las bacterias lacticas de ambas muestras (Figura 2).

DISCUSION

En los estudios de la estabilidad termica de IVM en leches bovina y ovina, las concentraciones adicionadas en leche fueron las detectadas en bovinos y ovinos tratados con IVM, en estudios in vivo realizados anteriormente (14). Ademas, los procesos termicos estudiados en este trabajo son los mas utilizados en la industria lactea: 75[grados]C durante 15 s (HTST) y 65[grados]C durante 30 min (LTLT). Del mismo modo que se demostro en este estudio, otros investigadores demostraron que los diferentes procesos de calentamiento estudiados (74[grados]C 40 s, 80[grados]C 1 min, 100[grados]C 10 s, 65[grados]C 30 min, y 75[grados]C 15 s) no afectaron las concentraciones de IVM en leche de oveja (4).

Por otra parte, los residuos de IVM en diferentes tejidos de animales, tales como musculos e higado, tambien fueron estables bajo condiciones de coccion (horno de microondas, freido, hervido) y las perdidas de IVM observadas fueron detectadas en el fluido de coccion (5,13).

Los resultados aqui obtenidos mediante la prueba de yogur (7) determinaron que la presencia de IVM en leches bovina y ovina no tiene un efecto sobre la actividad de las bacterias lacticas, incluso despues de evaluar concentraciones superiores a las medidas en anteriores estudios propios in vivo (J Agrie Food Chem 52: 6205-6211, 2004). Esto tiene trascendencia teniendo en cuenta la existencia en el mercado farmaceutico veterinario de formulaciones concentradas que se aplican a dosis superiores. Por lo tanto la presencia de mayores residuos en leche no afectan el procesamiento industrial, llegando intactas al consumidor.

Como se demuestra en la Figura 2, la morfologia de las bacterias lacticas no se vio afectada por la presencia de residuos de IVM. Datos previos disponibles muestran un efecto diferente del farmaco en la estructura de parasitos como Echinoccoccus granulosus incubados con IVM (1 mg/ml). Se observaron alteraciones a nivel del tegumento y la presencia de grandes vacuolas a nivel citoplasmatico. Sin embargo, las bacterias lacticas no se vieron afectadas por la presencia de IVM, verificando lo corroborado en la prueba de fermentacion y los recuentos de bacterias.

En el sistema actual de produccion de ganado, la optimizacion de la productividad depende en gran medida de la utilizacion de compuestos farmacologicamente activos. El uso de medicamentos en animales productores de alimentos es importante para la salud de los animales, pero las ventajas de la utilizacion de los compuestos quimicos en la produccion ganadera siempre deben evaluarse en funcion de su riesgo para los consumidores. Muchos compuestos antiparasitarios estan aprobados para el tratamiento de enfermedades parasitarias en los animales productores de alimentos. Sin embargo, solo un numero limitado de formulaciones comerciales estan autorizados para el tratamiento de los animales durante el periodo de lactancia.

La resistencia generalizada de los nematodos a diferentes grupos antihelminticos ha llevado a situaciones de un uso extra-marbete por parte de los productores de compuestos antiparasitarios en explotaciones lecheras ovina y bovina. Por lo tanto, existe una preocupacion por la posible presencia de residuos de medicamentos detectables en la leche y productos lacteos. Esta inquietud involucra no solamente a los riesgos para la salud, sino tambien a las restricciones en el comercio internacional.

En la leche de bovinos y ovinos, los residuos de IVM son estables a los tratamientos termicos convencionales mas utilizados en la industria lactea. Los procesos industriales basados en la fermentacion acido lactica no se ven afectados por la presencia de estos residuos en la leche, lo que indica que la prueba de yogur no es adecuada para detectar cualitativamente concentraciones residuales de estas moleculas.

El uso racional de los medicamentos antiparasitarios en los sistemas de produccion de leche es esencial para un suministro de alimentos mas seguros para el consumo global. De acuerdo con los organismos mundiales de referencia, la presencia de residuos de farmacos en alimentos de origen animal son considerados como un factor de riesgo en la salud publica y como limitante en el desarrollo economico de cualquier pais.

REFERENCIAS

(1.) Alippi A. 1992. Deteccion de Bacillus larvae en poblaciones mixtas de esporas bacterianas a partir de restos larvales. Microbiologia 8: 115-118.

(2.) Berruga MI, Noves B, Molina MP, Roman M, Molina A. 2008. Influence of cephalosporins on the coagulation time of yogurt made from ewes'milk. Int J Dairy Tech 61: 372-378.

(3.) Botsoglou NA, Fletouris DJ. 2001. Consumer perceptions and concerns, drug residues in food. In: Pharmacology, food safety and analysis (Marcel Dekker Ed.), Amazon, New York, p.541-548.

(4.) Cerkvenik V, Doganoc DZ, Skubic V, Beek MJ, Keukens HJ. 2001. Thermal and long-term freezing stability of ivermectin residues in sheep milk. Eur Food Res Tech 213: 72-76.

(5.) Cooper KM, Whelan M, Danaher M, Kennedy DG. 2011. Stability during cooking of anti-helminthic veterinary drug residues in beef. Food Add Contam 28: 155-165.

(6.) European Commission Regulation. 2010. Reg. No 37 concerning on pharmacologically active substances and their classification regarding maximum residue limits in foodstuffs of animal origin. url http://www.ema.europa. eu/ema/index

(7.) FIL-IDF No 040/1966: Standard method for the count of coliform bacteria in pasteurized milk y No 258/1991: Detection and confirmation of inhibitors in milk and milk products. url http://www.fil-idf.org/public/pubUcationspage

(8.) Fthenakis GC, Papadopoulos E, Himonas C. 2005. Effects of three anthelmintic regimes on milk yield of ewes and growth of lambs. J Vet Med 52: 78-82.

(9.) Harrigan WF, McCance ME. 1976. Laboratory methods in food and dairy microbiology, Academic Press, London, 452 p.

(10.) Juste Jordan R, Garcia A. 1991. Effect of treatment with netobimin on milk production of sheep. Vet Parasit 38: 173-183.

(11.) McKellar QA, Benchaoui HA. 1996. Avermectins and milbemycins. J Vet Pharm Ther 19: 331-351.

(12.) Riviere JE, Spoo JW. 1995. Chemical residues in tissue of food animals. In: Veterinary Pharmacology and Therapeutics (Adams HR Ed), Iowa State Univ. Press, Ames (USA), p.1148-1157.

(13.) Rose MD, Farrington WH, Shearer G. 1998. The effect of cooking on veterinary drug residues in food: 7. Ivermectin. FoodAddit Contam 15: 157-161.

(14.) Toutain PL, Campan M, Galtier P, Alvinerie M. 1988. Kinetic and insecticidal propieties of ivermectin residues in the milk of dairy cows. J Vet Pharm Ther 11: 288-291.

Iezzi, S.; Lifschitz, A.; Sallovitz, J.M.; Lanusse, C.; Imperiale, F.

Laboratorio de Farmacologia, CIVETAN-CONICET, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA, (7000) Tandil, Argentina, T 0249-4439850. Mail: siezzi@vet.unicen.edu.ar

Recibido: 21 mayo 2015 / Aceptado: 30 junio 2015
Tabla 1. Efecto del tratamiento termico sobre la es-
tabilidad de los residuos de ivermectina en leche de
ambas especies.

especie    tratamiento           concentracion   diferencias
           termico                  (ng/ml)       (en %) *

leche      65[grados]C, 30 min         1            2,73
bovina     LTLT                        5            -0,14
                                      10            0,10
                                    [bar.x]         0,90

           75[grados]C, 15 s           1            -2,11
           HTST                        5            -1,26
                                      10            0,43
                                    [bar.x]         -0,98

leche      65[grados]C, 30 min         1            3,45
ovina      LTLT                        5            1,03
                                      10            1,05
                                    [bar.x]         1,84

           75[grados]C, 15 s           1            -3,10
           HTST                        5            0,32
                                      10            -3,21
                                    [bar.x]         -2,00

x = media aritmetica. LTLT: pasteurizacion a baja tempera-
tura/largo tiempo; HTST: pasteurizacion a alta temperatura/
corto tiempo. (*) diferencias de las concentraciones resi-
duales de ivermectina-IVM (los valores se obtuvieron de la
diferencia entre la concentracion promedio de IVM recupe-
rada en leche despues del tratamiento termico respecto de la
concentracion promedio de IVM recuperada en muestras de
leche sin tratamiento termico.
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Author:Iezzi, S.; Lifschitz, A.; Sallovitz, J.M.; Lanusse, C.; Imperiale, F.
Publication:Revista Veterinaria
Date:Dec 1, 2015
Words:4229
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