Printer Friendly

Hiperinmunizacion de ovinos contra veneno de Crotalus durissus cumanensis del estado Zulia, Venezuela.

RESUMEN

En este trabajo se estudio el desarrollo de la respuesta inmune inducida por la aplicacion de un esquema de hiperinmunizacion preestablecido contra el veneno de Crotalus durissus cumanensis, a un grupo de cinco ovinos sanos, nunca antes expuestos a este veneno. Se colectaron muestras de sangre cada siete dias por un periodo de 70 dias. Con el suero obtenido, se realizaron pruebas de neutralizacion en ratones, utilizando una dosis reto de veneno de 3 [DL.sub.50]. Se determino la [DE.sub.50], la cual se expreso en [micron]g de veneno neutralizado por mi de suero. En los resultados se observaron variaciones individuales en la magnitud de la elevacion del titulo de anticuerpos y rasgos comunes en el comportamiento de las curvas desarrolladas. El titulo promedio optimo (602 [micron]g/ml), fue obtenido el dia 21 posterior a la primera inoculacion. Para ese momento el ovino con titulo mas alto fue de 978 [micron]g/ml y el mas bajo de 338 [micron]g/ml. El promedio mas bajo (115,2 [micron]g/ml) fue observado el dia 70. Se propone que cada ovino debe ser evaluado y seleccionado en base a una respuesta inmune satisfactoria, antes de ser utilizado para la produccion de antiveneno.

Palabras clave: Crotalus durissus cumanensis, ovinos, hiperinmunizacion, neutralizacion, [DL.sub.50], DE50, antiveneno, suero, veneno.

ABSTRACT

This research deals with the induced immune response by applying a pre-established hyperimmunization schedule against Crotalus durissus cumanensis venom to a group of five healthy ovines, which were not previously exposed to this venom. Blood samples were collected every 7 days during a period of 70 days. Sera obtained was used for neutralization test on mice, by using a challenge dosage of 3 [LD.sub.50]. The [ED.sub.50] was found and expressed as pg of the neutralized venom by each ml of sera. Results revealed individual variation in the magnitude of the antibody titers rise as well as, in common features on the curve pattern. The optimum average titer (602 [micro]g/ml), was found on day 21 after the first inoculation which corresponded with the third day after the last challenge. By this time the ovine with the highest titer reached 978 [micro]g/ml whereas the lowest was 338 [micro]g/ml. On the other hand, the lowest average (115.2 [micro]g/ml) was observed on day 70. Results suggest that each ovine must be evaluated and selected on the bases of a satisfactory immune response, before its utilization for antivenom production.

Key words: Crotalus durissus cumanensis, ovines, hyperimmunization, neutralization, [LD.sub.50], [ED.sub.50], antivenom, sera, venom.

Hyperinmunization of Ovines against Crotalus durissus cumanensis Venom from the Zulia State, Venezuela

INTRODUCCION

La produccion de suero antiofidico como unico tratamiento comprobadamente efectivo contra el accidente producido por la mordedura de serpientes venenosas, se ha venido realizando en equinos desde finales del siglo pasado [3]. En la actualidad, poco se conoce del porque de la escasez de investigaciones en otras especies y ademas relativamente, se ha hecho poco en terminos de conseguir una nueva manera de producir un antiveneno mas efectivo [16]; aunado a esto, existen escasos reportes sobre el desarrollo de la respuesta inmune en animales inoculados con veneno de serpiente para la produccion de antivenenos [8, 12].

Los sueros equinos usados para el tratamiento del accidente ofidico, con frecuencia producen reacciones adversas como la enfermedad del suero o en ocasiones, shock anafilactico [2, 16, 17, 23, 24, 26]. La necesidad de disminuir los efectos alergicos colaterales a la administracion de antivenenos, asi como el alto riesgo que representa una segunda exposicion del paciente a un suero heterologo cuyo origen sea la misma especie, ha obligado a buscar otras alternativas que minimicen estos efectos; habiendose incorporado recientemente al ovino como fuente de produccion de antivenenos, ya que ha mostrado una mejor compatibilidad con humanos, escasos problemas de seroreaccion y de muy buena respuesta inmunologica [2, 17, 22, 23, 26].

Una mejor respuesta a un antigeno ha sido demostrada, cuando este ha sido utilizado en la induccion de los anticuerpos correspondientes. Los venenos de serpientes de una misma especie difieren de una region a otra; lo cual obliga a la utilizacion de venenos de serpientes autoctonas para garantizar la especificidad del suero [3, 6, 9, 14, 15],

En los centros de produccion de sueros antiofidicos del mundo, los esquemas de inmunizacion difieren, ya que varian las condiciones ambientales, las caracteristicas del manejo de los animales sometidos a las inoculaciones, las especies de serpientes existentes y la composicion de sus venenos [15].

Venezuela ocupa el segundo lugar en lo referente al accidente ofidico, ocupando el primer lugar la India, el tercero Birmania y el cuarto Brasil [20].

La serpiente Crotalus durissus cumanensis (cascabel comun) es una de las mas distribuidas en el pais y es responsable de numerosos casos de mordeduras, [11, 19] con el 25% de las muertes como consecuencia de emponzonamientos fatales en el pais [20].

Todas las observaciones antes mencionadas orientan este trabajo hacia la produccion de antivenenos en ovinos, con venenos provenientes de serpientes Crotalus durissus cumanensis propias de la region.

MATERIALES Y METODOS

Ubicacion geografica

La presente investigacion fue realizada en la Unidad de Investigaciones Ofidiologicas (U.I.O.) de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad del Zulia en la ciudad de Maracaibo, estado Zulia, Venezuela. El clima es calido-humedo con una temperatura promedio de 26 a 30[grados]C [7],

Veneno

El veneno suministrado por la U.I.O. se obtuvo de un lote de 25 serpientes Crotalus durissus cumanensis, colectadas en diferentes regiones del Edo Zulia. Una vez obtenido, se congelo, liofilizo, se determino su [DL.sub.50] (15 [micron]g por raton de 18 a 20g) y se mantuvo a una temperatura de -20[grados]C [12],

Unidad experimental

Cinco ovinos adultos, de 12 a 17 meses de edad, machos, sanos, raza mestizo Criollo-West African, cuyos pesos oscilaron entre 30 y 40 kg, y que nunca habian sido inoculados con ningun tipo de veneno, fueron utilizados para el experimento. En dichos animales, la condicion general y parametros clinicos de salud eran excelentes. Previo a la inmunizacion, los ovejos se dejaron en un periodo de adaptacion de dos meses, sometiendose a un programa de control parasitario y de enfermedades infecciosas. Ademas, fueron evaluados clinicamente en varias ocasiones antes de ingresar al programa de inmunizacion. Su alimentacion consistio en pasto de corte picado (Buffle), heno y una mezcla de alimento concentrado en pellets, reforzado con vitaminas y minerales en proporciones y calidades adecuadas a sus necesidades nutricionales.

Inoculos

A partir de una solucion madre: 1% del veneno liofilizado en solucion salina fisiologica (0,85% NaCl) y esterilizada por filtracion (Millipore 0,22 [micron]n), se prepararon los inoculos. Aquellos correspondientes a las dos primeras inoculaciones fueron elaborados preparando emulsiones con adyuvante Completo de Freund para la primera inoculacion e Incompleto para la segunda; el inoculo fluido para las inoculaciones 3, 4, y 5, consistio en una mezcla de veneno mas solucion salina fisiologica. Las dosis administradas por animal se presentan en la TABLA I.

Inmunizacion y sangrias

Los ovejos fueron inoculados por via subcutanea, previo rasurado y desinfeccion, en la tabla del cuello y en la porcion dorso-lateral de la region costal y lumbar [8].

Las dosis aplicadas se basaron en los esquemas de inmunizacion empleados en el Instituto Butantan, Brasil [18] y en el Centro de Biotecnologia de la Universidad Central de Venezuela [25], modificados en el presente trabajo en los siguientes aspectos: 1) Se utilizo el ovino en sustitucion del equino; 2) Las dosis de veneno y cantidades de adyuvante fueron ajustadas de acuerdo al peso del ovino; 3) El veneno usado en el presente trabajo fue obtenido exclusivamente de serpientes procedentes del estado Zulia.

Antes de comenzar el esquema de inmunizacion, se extrajo una muestra de sangre a cada ovejo con el objeto de demostrar, en ratones, la ausencia de anticuerpos neutralizantes contra el veneno crotalico que se empleo, y su posterior inclusion en el programa de inmunizacion, TABLA I.

De cada ovino se obtuvo 100 mi de sangre de la vena yugular en 11 oportunidades. La misma fue recogida en Erlenmeyers esteriles, en solucion de citrato de sodio al 17,5%, en proporcion de 5 mi de citrato por cada 100 mi de sangre. Se agito suavemente durante la sangria. Luego, el plasma fue separado por centrifugacion a 3000 rpm por 30 minutos y colocado en bano maria a 56[grados]C por 30 minutos para eliminar el fibrinogeno y el complemento. Se filtro con Millipore 0,22 [micron]m y se preservo a una concentracion final de 0,4% con una solucion de eter-fenol al 50%, a razon de 0,8 ml de este preparado por cada 100 mi de suero [25], distribuido en alicuotas de 3 ml y mantenido a -20[grados]C hasta ser usado, [12].

Neutralizacion de la letalidad

La neutralizacion de la letalidad se determino calculando la [DE.sub.50] del suero de los ovinos hiperinmunizados utilizando el metodo de Spearman-Karber y se expreso en [micron]g de veneno neutralizado por mi de suero [5, 15, 25].

Se prepararon tubos de ensayo con una cantidad fija de veneno mas diluciones seriadas del suero problema y la dilucion control positivo, se incubaron durante 30 minutos a 37[grados]C. Luego, cada una de las diluciones fue evaluada por triplicado en una cantidad no mayor de 1 mi, conteniendo 3 [DL.sub.50] (45 [micron]g) por raton e inoculada intraperitonealmente [21] a grupos de 5 ratones albinos no isogeneticos de 18 a 20g de peso corporal, [1, 10, 13]. Los ratones muertos y sobrevivientes se registraron durante 48 horas [1] y la data se utilizo para la determinacion de la [DE.sub.50] Con la media correspondiente del triplicado de cada dilucion, se grafico el comportamiento de la respuesta inmunologica de cada uno de los ovejos del grupo experimental durante 70 dias.

Analisis estadistico

Se resume la informacion a traves de metodos estadisticos de posicion y dispersion, entre ellos: media geometrica, error standard geometrico, coeficiente de variacion y numero de muestras. Graficando, se obtiene la curva tiempo-respuesta para evidenciar el tiempo de aparicion del titulo neutralizante optimo.

Para analizar la relacion entre el titulo de anticuerpos y el tiempo expresado en dias, se ajusto un modelo de regresion no lineal. El paquete para estimar este modelo fue el "Curve Expert" en su version 1,2. Entre varios modelos probados, el de mejor ajuste resulto ser el conocido como "Funcion Racional" cuya expresion es:

y = [a + bx]/[1 + cx + dx]

donde a, b, c y d representan los parametros a ser estimados, "x" el tiempo en dias e "y" la tasa de neutralizacion expresada en pg de veneno neutralizado por mi de suero.

RESULTADOS

La produccion de anticuerpos contra el veneno de Crotalus durissus cumanensis del estado Zulia, determinada por su capacidad para neutralizar la letalidad en ratones, mostro diferencias individuales en la magnitud de la respuesta de los 5 ovinos sometidos al esquema de hiperinmunizacion, observandose un incremento paralelo de pg de veneno neutralizado por mi de suero antiofidico desde el dia cero 0 al dia 14 del esquema, TABLA II y FIG. 1; a partir de este momento, se notan marcadas diferencias individuales en el aumento de los niveles de respuesta. A pesar de esta variabilidad, se evidencian rasgos comunes en el comportamiento de las cinco curvas.

Segun el modelo utilizado, resulto una curva caracteristica mostrando un titulo promedio, maximo y optimo en las muestras, correspondientes al dia 21 posterior a la primera inoculacion; luego se observa un descenso paulatino del titulo neutralizante hasta el dia 70, ultima sangria, donde muestra el titulo promedio mas bajo, FIG. 2, con un coeficiente de determinacion [r.sup.2] = 0,6021, lo cual evidencia que aproximadamente el 60% de la variabilidad de la respuesta total (titulo de neutralizacion) se puede explicar por el tiempo en dias transcurridos desde el dia cero 0 al 70. El 40% restante de la variabilidad, puede estar representada por la zona geografica, razones climatologicas, raza, factores de especie, factores individuales, ambientales y esquemas de inmunizacion, incidiendo en forma definitiva sobre la respuesta; los mismos fueron estrictamente controlados en el presente trabajo, pero no se obtuvo reportes de observaciones de este tipo para poder comparar.

De acuerdo a la magnitud de las medias geometricas de las sangrias por dia, TABLA III, se aprecia que el titulo de anticuerpos optimo fue de 602 [micron]g/ml de suero, alcanzado en la sangria del dia 21, tres dias despues de la ultima inoculacion y la mas baja fue de 115,2 [micron]g/ml de suero en la sangria del dia 70.

DISCUSION

Frente a observaciones de investigadores que siguen la trayectoria de la produccion de antivenenos en equinos, con los mismos programas y esquemas de inmunizacion sin resolver los problemas adversos que con este producto manifiestan los pacientes [26], el resultado del presente estudio se considera como una alternativa para minimizar dichos efectos, asi como, una posibilidad de competencia contra los que tradicionalmente vienen trabajando con la produccion de suero en equinos.

Considerando que en el mundo hay muchos centros donde se producen antivenenos [4], existen muy pocas publi caciones relacionadas con el desarrollo de la respuesta inmune en animales inyectados con venenos de serpientes. En el presente trabajo, se monitoreo la produccion de anticuerpos contra los componentes responsables de la letalidad en el veneno, utilizando ovejos no expuestos con anterioridad a estos antigenos. Los resultados indican una notable variabilidad en la respuesta de anticuerpos de los cinco ovinos, aun cuando durante las primeras etapas del esquema de inmunizacion, fue homogenea, coincidiendo con los reportes de Estrada y col. y Gutierrez y col. [8, 12].

Inoculandose ovinos con veneno crotalico, se obtuvo un titulo neutralizante maximo a los 21 dias de iniciadas las inoculaciones, tres dias despues de la ultima inoculacion, lo que difiere con lo reportado por Rolim y col. [18] inoculando veneno crotalico y el Centro de Biotecnologia de la Universidad Central de Venezuela (U.C.V.) [25], inoculando un pool de veneno crotalico y bothropico, los que inmunizando equinos, encontraron respuestas maximas de anticuerpos a los 28 dias, diez dias despues de la ultima inoculacion. Estrada y col. [8] reportaron en equinos inoculados con un pool de veneno bothropico, crotalico y lachesico, titulos neutralizantes de la actividad de la fosfolipasa A maximos a los 110 dias. Bolanos y Cerdas [2] reportaron en ovinos y equinos, entre los 230 y 255 dias la obtencion de una respuesta maxima de anticuerpos neutralizantes del veneno crotalico para el caso de los ovinos, asi como para venenos crotalinae, en el caso de los equinos.

El titulo neutralizante optimo en suero crudo obtenido en el presente estudio fue de 602 [micron]g/ml de suero, mientras Bolanos y Cerdas [2] reportan que el suero crudo preparado en ovinos presenta una actividad neutralizante frente al veneno crotalico de 600 [micron]g/ml a 1200 [micron]g/ml y en equinos de 1000 a 2000 [micron]g/ml para venenos de la subfamilia crotalinae. Rolim y col. [18] reportan contra veneno crotalico 500 [micron]g/ml de suero de origen equino en 28 dias como titulos considerados satisfactorios en el Instituto Butantan en Brasil. Es probable que la diferencia de los resultados reportados se deba a que dichos autores han trabajado con otras especies animales, distintas zonas geograficas, diferentes venenos y/o esquemas de inmunizacion.

Es de hacer notar que, durante la ejecucion del presente trabajo, los ovejos no presentaron ningun tipo de alteracion aparente de salud, a excepcion de unos pequenos nodulos, que aparecieron a nivel del cuello en los puntos de inoculacion, cuando el preparado tenia el adyuvante, desapareciendo sin tratamiento alguno, lo que difiere de Estrada y col. [8], quienes reportan que, de los 8 equinos inmunizados en su trabajo, todos desarrollaron abscesos, fistulas y fibrosis en el sitio de la inoculacion del veneno y uno manifesto alteraciones generales moderadas, sugiriendo asi, una mayor resistencia del ovino cuando es sometido a inoculaciones de venenos de serpientes en comparacion con el equino.

CONCLUSIONES

Los resultados de la presente investigacion, constituyen el primer paso imprescindible para el desarrollo de la produccion, a escala comercial, de suero antiofidico especifico o autoctono, dado que en Venezuela no se ha reportado este tipo de investigacion. La inmunizacion de ovinos, con venenos procedentes de especies de serpientes autoctonas, garantiza la obtencion de un antiveneno de alta especificidad.

La variabilidad observada en la respuesta de animales inoculados por primera vez, demuestra la necesidad de evaluar individualmente el desarrollo del titulo neutralizante, lo que ayudaria en la seleccion de animales con un buen titulo de anticuerpos, con el proposito de sangrarlos y obtener un pool de plasma con altos niveles neutralizantes.

Los altos titulos de anticuerpos (600 pg/ml de suero crudo) alcanzados en un corto periodo, 21 dias, en condiciones climaticas adversas como lo son la temperatura y humedad relativa altas de la ciudad de Maracaibo, indican que el ovino es un animal cuya respuesta al esquema de inmunizacion basico contra veneno de Crotalus durissus cumanensis, es excelente.

RECOMENDACIONES

Se hace necesario realizar esfuerzos para la produccion de suero antiofidico con los venenos de las serpientes de las regiones donde se va a aplicar, ya que, por ser mas especifico reduce la cantidad del mismo a utilizar, disminuyendo los riesgos de seroreaccion, lo cual, se traduce en beneficios para la comunidad, contribuyendo a la solucion de problemas tanto de salud publica, como economicos a nivel de produccion animal ocasionados por este tipo de accidente.

Utilizar el ovino por constituir una especie mas economica, accesible, de facil manejo, no exigente en la calidad de alimento y de gran resistencia, lo que la favorece cuando se compara en los mismos aspectos con el equino.

La produccion de sueros antiofidicos debe obtenerse adecuando el esquema de inmunizacion para conseguir el mas apropiado, que se ajuste a las condiciones particulares de nuestra region con el fin de obtener inmunosueros dotados de titulos satisfactorios, con el menor gasto de antigeno y en el menor tiempo posible, mas especificos, con menos reacciones colaterales y mas economicos.

AGRADECIMIENTO

Los autores desean agradecer a la Corporacion de Desarrollo del Zulia (CORPOZULIA), por su apoyo financiero para la realizacion de esta investigacion, asi como tambien al personal de la Unidad de Investigaciones Ofidiologicas adscrita a la Division de Investigacion de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad del Zulia y al Centro de Biotecnologia de la Facultad de Farmacia de la Universidad Central de Venezuela.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

[1] BOLANOS, R. Toxicity of costa rican snake venoms for the white mouse. Am. J. Trop. Med. and Hig.. 21(3): 360-363. 1972.

[2] BOLANOS, R.; CERDAS, L. Produccion y control de sueros antiofidicos en Costa Rica. Boletin de la Oficina Sanitaria Panamericana. LXXXVIII(3): 188-196. 1980.

[3] BRAZIL, V. History of the primordia of snake-bite accident serotherapy. Memorias do Instituto Butantan. 49(1): 7-20. 1987.

[4] CHIPPAUX, J.; GOYFFON, M. Producers of antivenomous sera. Toxicon. 21: 739-752. 1983.

[5] COHEN, P.; BERKELEY, W.; SELINGMAN, E. Coral snake venoms. In vitro relation of neutralizing and precipitating antibodies. Am. J. Trop. Med. and Hyg. 8(4): 646-649. 1971

[6] COLIMODIO, H.; AGUILAR, M. Envenenamiento ofidico en Venezuela. Medicina Critica Venezolana. 8(1): 2338. 1993.

[7] COMISION DEL PLAN NACIONAL DE APROVECHAMIENTO DE LOS RECURSOS HIDRAULICOS. (CO PLANARH). Atlas Inventario Nacional de Tierras Region Lago de Maracaibo. Ministerio de Agricultura y Cria: 3-4. 1975.

[8] ESTRADA, R.; GUTIERREZ, J.; ALVARADO, J.; ROBLES, A.; AVILA, C.; GONZALEZ, N. Desarrollo de anticuerpos anti-fosfolipasa [A.sub.2] en caballos inoculados con veneno para la produccion de suero antiofidico polivalente en Costa Rica. Revista de Biologia Tropical. 37(2): 187-191. 1989.

[9] FERRI, V. El libro de las serpientes de todo el mundo. 1era. Edicion Editorial De Vecchi S.A. Balmes, Barcelona: 23-25, 55. 1992

[10] FURTADO, M.; COLLETO, G.; DA SILVA, W. Controle do qualidade dos venenos animales en dos correspondentes antivenenos. Memorias do Instituto Butantan. 53(2): 149-159. 1991.

[11] GRILLO, O.; SCANNONE, H. Fraccionation of Crotalus durissus cumanensis by gel filtration. Toxicon. 14: 400-403. 1976.

[12] GUTIERREZ, J.; CHAVEZ, F.; ELIZONDO, J.; AVILA, C.; CERDAS, L. Production of monovalent anti-Sofhrops asper antivenom: development of immune response in horses and neutralizing ability. Revista de Biologia Tropical. 36(2B): 511-517. 1988.

[13] GUTIERREZ, J.; ROJAS, G.; LOMONTE, B.; GENEN, J.; CHAVEZ, F. La evaluacion de la capacidad neutralizante de los antivenenos en America. Instituto Clodomiro Picado. Facultad de Microbiologia. Universidad de Costa Rica (Mimeo): 1-21. 1990.

[14] ORGANIZACION MUNDIAL DE LA SALUD. II Curso internacional sobre produccion y control de productos biologicos. Manual de Laboratorio. Mexico: 1-16. 1978.

[15] ORGANIZACION MUNDIAL DE LA SALUD. Progress in the characterization of venoms and standarization of antivenoms. Laboratory Mannual. Geneva: 5-44. 1981.

[16] QUANZHI, L.; CHARLOTTE, L. Evaluation of four different immunogenes for the production of snake antivenoms. Toxicon. 30(11): 1319-1330. 1992.

[17] RAWAT, S.; LAING, G.; SMITH, D.; THEAKSTON, D.; LANDOM, J. A new antivenom to treat Eastern coral snake (Micrurus fulvius fulvius) envenoming. Toxicon. 32(2): 185-190. 1994.

[18] ROLIM, R.; GOMEZ, E.; SILLES, M.; QUEIROGA, Y.; IIZUKA, H. Analise comparativa entre os diferentes esquemas de hiperinmunizacao empregados na producao de soros antiofidicos pelo Instituto Butantan (1957-1979). Memorias do Instituto Butantan. Vol. 44/45: 259-270. 1980-81.

[19] ROZE, J. La taxonomia y zoogeografia de los ofidios en Venezuela. Universidad Central de Venezuela, Ediciones De La Biblioteca. Caracas: 293-294. 1966.

[20] SANDNER, M. Manual de las serpientes ponzonosas de Venezuela. Talleres Tipograficos de Miguel Angel Garcia e Hijo. Caracas: 20-21. 1975.

[21] SILLES, M. Padronizacao da avaliacao da potencia de antivenenos bothropicos, em camundongos. Memorias do Instituto Butantan. Vol. 42/43: 325-336. 1978/79.

[22] SJOSTROM, L.; ABDULLA, I.; RAWAT, S.; SMITH, D.; LANDOM, J. A comparison of ovine and equine antivenoms. Toxicon. 32(4): 427-433. 1994.

[23] SMITH, D.; REDDI, K.; LAING, G.; THEAKSTON, D.; LANDOM, L. An affinity purified ovine antivenom for the treatment of Vipera berus envenoming. Toxicon. 30(8): 865-871. 1992.

[24] THALLEY, D.; CAROLL, S. Rattlesnake and scorpion antivenoms from the egg yolks of immunized hens. BioTechnology. 8(10): 934-938. 1990.

[25] UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA Manual "Suero antiescorpionico, elaboracion y control". Facultad de Farmacia. Centro de Biotecnologia: 7-24.1994.

[26] WEISS, R. Researchers foresee antivenin improvements. Science News. Vol.138: 360-362. 1990.

Juan R. Montilla F. (1), Maria V. Alvares de Montilla (1), Elvira Diaz Z. (2), Marcos Anez (1) y Jose Villavicencio (1)

(1) Unidad de Investigaciones Ofidioiogicas. (2) Catedra de Microbiologia. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia, Apartado 15252. Maracaibo 4005-A, Edo. Zulia, Venezuela

Recibido: 14 / 09 / 98. Aceptado: 13 / 05 / 99.

Leyenda: FIGURA 1. NIVELES DE ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES CONTRA VENENO CROTALICO.

Leyenda: FIGURA 2. NIVELES DE ANTICUERPOS EN OVINOS SOMETIDOS AL ESQUEMA DE INMUNIZACION.
TABLA I
ESQUEMA DE INMUNIZACION BASICO CON VENENO CROTALICO EN OVINOS

Dias   Veneno mg   Adyuvante   Sangrias   Titulacion de
                                          Anticuerpos

 0        0,5        F.C.         Si            Si
 7        0,5        F.I.         Si            Si
 14       0,2         SSF         Si            Si
 16       0,2         SSF         No            No
 18       0,2         SSF         No            No
 21       --          --          Si            Si
 28       --          --          Si            Si
 35       --          --          Si            Si
 42       --          --          Si            Si
 49       --          --          Si            Si
 56       --          --          Si            Si
 63       --          --          Si            Si
 70       --          --          Si            Si

F.C.: Adyuvante de Freund completo. F.I.: Adyuvante de Freund
incompleto. S.S.F.: Solucion Salina Fisiologica.

TABLA II
NEUTRALIZACION DEL VENENO DE Crotalus durissus cumanensis DEL
ESTADO ZULIA, EXPRESADO EN [micron]g/ml DE SUERO

               Ovejo 1   Ovejo 2   Ovejo 3   Ovejo 4   Ovejo 5

Sangria 0           0         0         0         0         0
Sangria 7          86        75        75        69        67
Sangria 14        145       131       134       129       112
Sangria 21        978       722       611       542       338
Sangria 28        624       424       404       349       219
Sangria 35        601       403       247       303       169
Sangria 42        432       367       236       236       135
Sangria 49        355       254       202       203        99
Sangria 56        272       218       152       186        92
Sangria 63        245       178       117       140        85
Sangria 70        212       154        85        92        80

TABLA III
RESUMEN DE LA ESTADISTICA DESCRIPTIVA

Dia de    [[barra.X]g          9       Cv      N
Sangria

   0        0 [micron]g/ml       0       0     5
   7      74,1 [micron]g/ml    9,55    12,88   5
  14      129,8 [micron]g/ml   10,99   8,47    5
  21      602,0 [micron]g/ml   15,09   2,50    5
  28      382,3 [micron]g/ml   13,7    3,58    5
  35      314,2 [micron]g/ml   13,1    4,17    5
  42      260,2 [micron]g/ml   12,6    4,84    5
  49      205,5 [micron]g/ml   11,9    5,78    5
  56      172,8 [micron]g/ml   11,5    6,64    5
  63      143,4 [micron]g/ml   10,9    7,61    5
  70      115,4 [micron]g/ml   10,4    9,00    5
COPYRIGHT 1999 Universidad del Zulia, Facultad de Ciencias Veterinarias
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 1999 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Montilla F., Juan R.; Alvares de Montilla, Maria V.; Diaz Z., Elvira; Anez, Marcos; Villavicencio, J
Publication:Revista Cientifica de la Facultad de Ciencias Veterinarias
Date:Sep 1, 1999
Words:4523
Previous Article:Factores de riesgo asociados con hematuria enzootica bovina en el municipio Campo Elias, estado Merida, Venezuela.
Next Article:Concentracion de progesterona plasmatica (P4) en hembras ovinas gestantes estabuladas reaccionantes a Trypanosoma vivax.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2020 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters