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First report of Trypanosoma vixax in bovines in the State of Rio Grande do Sul, Brazil/Primeiro registro de Trypanosoma vivax em bovinos no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil.

A tripanossomose causada por Trypanosoma vivax e de grande importancia economica no continente africano, onde esse parasita e transmitido pela mosca tsetse para ruminantes, ocasionando infeccoes agudas e cronicas, que podem acarretar alteracoes hematologicas severas e mortalidade dos animais (ANOSA, 1983; GARDINER, 1989). Na America do Sul, a transmissao da infeccao por T. vivax e mecanica e atribuida, principalmente, a tabanideos. Esta tripanossomose e altamente prevalente nas regioes Norte e Central (Pantanal) do Brasil, onde e, geralmente, assintomatica (SHAW & LAINSON, 1972; PAIVA et al., 2000; JONES & DAVILA, 2001; CORTEZ et al., 2006). Entretanto, alteracoes hematologicas e nervosas, que podem levar a morte, alem de abortos e alteracoes na reproducao, foram descritas em bovinos, ovinos e caprinos infectados por T. vivax (SILVA et al., 1996; BATISTA et al., 2006; 2007; 2008a,b).

O curso da infeccao por T. vivax varia entre as cepas de parasitos isolados, bem como as especies e racas de ruminantes hospedeiros (CORTEZ et al., 2006; BATISTA et al., 2006; 2007; 2008). Em bovinos infectados naturalmente com T. vivax no Brasil (Pantanal), foram observados sinais clinicos como anemia, leucopenia, lacrimejamento e fraqueza progressiva, marcada por perda de peso e abortos (SILVA et al., 1999). No primeiro surto no Nordeste do Brasil (Paraiba), em gado leiteiro, com diagnostico de T. vivax, os animais infectados apresentaram febre, anemia e perda de peso. Todos os bovinos com sinais nervosos morreram, e outros abortaram ou pariram um bezerro que morreu logo apos o parto (BATISTA et al., 2007). Antes deste estudo, nenhum caso de infeccao causada por T. vivax havia sido descrito no Sul do Brasil. Dessa forma, o registro do primeiro caso deste flagelado em bovino do Estado do Rio Grande do Sul se faz oportuno.

No municipio de Sao Pedro, Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, foi avaliado um bovino, femea, sem raca definida, com 2,5 anos de idade, que se encontrava no quinto mes de gestacao. No exame clinico, o animal apresentou sinais clinicos inespecificos como hiporexia, hipertermia, fraqueza, desidratacao, mucosas ictericas, secrecao vaginal, agressividade, atrofia muscular dos membros pelvicos, incoordenacao motora, dificuldade em levantar-se e manter-se em pe, alem de adotar a posicao de "cao sentado" (Figura 1). Segundo o proprietario, o animal era mantido em area com vegetacao nativa e proxima a aguadas, junto a outros bovinos. Amostras de sangue de quatro bovinos que compartilhavam a mesma area foram utilizadas para esfregacos sanguineos, hemograma e analises bioquimicas. As amostras de sangue colhidas com anticoagulante tambem foram preservadas em etanol (v/v) e utilizadas para extracao de DNA. As preparacoes de DNA foram submetidas a um ensaio de PCR (reacao em cadeia da polimerase) especifico para T. vivax e altamente sensivel, padronizado por CORTEZ et al. (2009). Esse metodo de PCR, que distingue T. vivax de T. evansi, T. theileri e de outros tripanossomas de bovinos, tem como alvo sequencias repetitivas de genes que codificam cisteino-proteases (Catepsina L) e foi realizado utilizando como iniciadores os oligonucleotideos TviCatL1 e DTO155 em condicoes de reacao descritas em CORTEZ et al. (2009).

Os seguintes parametros hematologicos foram analisados: numero de hemacias, hematocrito (Ht), concentracao de hemoglobina (Hb), volume corpuscular medio (VCM), concentracao de hemoglobina corpuscular media (CHCM), proteinas plasmaticas totais e leucocitos totais. A contagem de hemacias e a determinacao da concentracao de hemoglobina foram realizadas em aparelho de contagem celular eletronico, marca CELM - modelo CC 550. Nas analises bioquimicas, foram realizadas a dosagem de alanino aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST), gama glutamil transferase (GGT), creatina quinase (CK), proteina total, albumina, globulinas, creatinina e ureia. Para as dosagens bioquimicas, foram utilizados o analisador semiautomatico BioPlus (Bio-200) e kits comerciais.

O diagnostico inicial de T. vivax foi baseado na analise morfologica de formas tripomastigotas em esfregacos de sangue corados com Giemsa. Embora tenham sido observadas poucas formas tripomastigotas, foi possivel observar caracteristicas morfologicas de T. vivax, tais como o tamanho do corpo e da membrana ondulante e a presenca e posicao do cinetoplasto na porcao final da extremidade posterior, que permitem distinguir essa especie de T. evansi e T. theileri (VENTURA et al., 2000; RODRIGUES et al., 2003). A confirmacao do diagnostico foi realizada por PCR (CORTEZ et al., 2009), com a amplificacao de um fragmento de DNA de ~177bp, tambem observado em DNA de T. vivax (isolado do Pantanal) utilizado como controle positivo. Esse fragmento de DNA nao e amplificado com DNA de T. evansi e T. theileri. Como controles negativos da PCR, foram testadas amostras de DNA de sangue de bovinos nao infectados previamente selecionadas (CORTEZ et al., 2009).

Sessenta dias apos o diagnostico, o animal infectado por T. vivax, que nao foi medicado, foi reexaminado. O animal, embora em bom estado nutricional e sem parasitemia detectavel em esfregacos, apresentava dificuldade de locomocao. Aos nove meses de gestacao, nasceu um bezerro fraco que morreu dois dias apos o parto. A femea voltou a apresentar hipertermia, fraqueza muscular, e esfregacos sanguineos revelaram o retorno da parasitemia por T. vivax (Figura 1D). Os sinais clinicos observados no bovino analisado neste estudo, inclusive incoordenacao motora e o nascimento de bezerro que morreu logo apos o parto, sao compativeis com os descritos em estudos experimentais, assim como em outros casos de tripanossomose por T. vivax ocorridos no Brasil (BATISTA et al., 2007; 2008b; CARVALHO et al., 2008). Alteracoes neurologicas sao tambem descritas em bovinos e equinos infectados com T. evansi (RODRIGUES et al., 2005; DA SILVA et al., 2007). Esta especie e mais comum no Pantanal, mas tem sido encontrada no Sul do Brasil, onde foram descritos casos de infeccao em caes e equinos (COLPO et al., 2005; RODRIGUES et al., 2005). Bovinos infectados com T. evansi foram diagnosticados recentemente no Estado de Santa Catarina, Sul do Brasil (DA SILVA et al., 2007). Uma vez confirmada a infeccao por T. vivax e a ausencia de T. evansi no animal examinado, suspeitou-se de um surto com infeccao assintomatica ou com sintomatologia inespecifica. Porem, essa suspeita nao se confirmou devido aos resultados negativos de PCR dos demais animais da mesma propriedade.

[FIGURA 1 OMITTED]

O hemograma do animal infectado nao apresentou alteracoes, diferindo, portanto, dos casos de infeccao sintomatica descritos no Brasil, que revelaram anemia e leucopenia em ruminantes parasitados por T. vivax (SILVA et al., 1996; 1999; BATISTA et al., 2006; 2007; 2008a,b; CARVALHO et al., 2008). As funcoes hepaticas, renais e a atividade enzimatica muscular nao foram afetadas pela infeccao por esse protozoario. Porem, foi observado aumento dos niveis de proteinas totais e globulinas e, concomitantemente, reducao na albumina.

A fim de esclarecer a origem do caso de infeccao por T. vivax descrito neste estudo no RS, foi realizada uma investigacao epidemiologica na propriedade onde o animal infectado vivia. Foi constatado que a area e muito propicia ao desenvolvimento de tabanideos e outras moscas hematofagas, que sao encontrados em grande numero proximo a um rio da propriedade. Segundo o fazendeiro, o bovino parasitado nunca havia saido da propriedade, nos ultimos dois anos nenhum outro animal havia sido introduzido no rebanho e os ruminates da propriedade haviam sido adquiridos no mesmo municipio, area onde nunca havia sido descrita infeccao por T. vivax. Entretanto, nada se sabe sobre os animais das propriedades vizinhas. Na propriedade estudada, nao sao criados cabras e bufalos, conhecidos reservatorios assintomaticos, nem ovelhas, que sao bastante suscetiveis a infeccao por T. vivax. Cervideos silvestres, observados na regiao central do Estado do RS, podem ser reservatorios naturais de T. vivax (BATISTA et al., 2006; 2008; RODRIGUES et al., 2008). A deteccao desse caso isolado de T. vivax no centro do RS, distante das areas endemicas do Brasil, sugere que esse parasita pode ter sido introduzido e estar distribuido nessa regiao ha muito tempo, nao tendo sido previamente diagnosticado devido ao desenvolvimento, ate esse estudo, apenas de quadros clinicos assintomaticos.

Ate recentemente, os estudos sobre T. vivax no Brasil foram conduzidos somente em areas endemicas, principalmente apos surtos de doenca aguda, como ocorridos no Pantanal (SILVA et al., 1996; VENTURA et al., 2001; MADRUGA et al., 2006; CORTEZ et al., 2006). Porem, os relatos recentes de infeccao por T. vivax em bovinos da Paraiba (BATISTA et al., 2007), Maranhao (GUERRA et al., 2008) e Minas Gerais (CARVALHO et al., 2008) demonstraram que os veterinarios estao mais atentos aos sinais clinicos, que podem ser muito variados, e preparados para fazer o diagnostico de tripanossomoses. Entretanto, muito cuidado deve ser tomado no diagnostico diferencial de especies baseado apenas na morfologia de formas do sangue, uma vez que tres especies de Trypanosoma podem ser encontradas com frequencia em ruminantes no Brasil, muitas vezes em infeccoes mistas: T. vivax, T. evansi e T. theileri. Outro fator bastante limitante no diagnostico de tripanossomoses em bovinos e o numero reduzido desses parasitas no sangue, exigindo a utilizacao de metodos sensiveis e especificos como a PCR para a deteccao desses parasitas (VENTURA et al., 2001; DAVILA et al., 2003; RODRIGUES et al., 2003; CORTEZ et al., 2009).

Devido a total falta de estudos na regiao, somente um estudo epidemiologico mais aprofundado, a fim de avaliar a ocorrencia de T. vivax em areas vizinhas, poderia ajudar a esclarecer o primeiro caso de infeccao por esse protozoario no RS descrito neste estudo.

AGRADECIMENTOS

Ao doutorando Herakles Antonio Garcia Perez, da Universidade Federal de Sao Paulo, pelo auxilio do diagnostico por PCR da tripanossomose.

REFERENCIA

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Aleksandro Schafer da Silva (I) Marcio Machado Costa (I) Mauro Flores Polenz (II) Carlos Henrique Polenz (III) Marta Maria Geraldes Teixeira (IV) Sonia Terezinha Dos Anjos Lopes (V) Silvia Gonzalez Monteiro (V*)

(I) Programa de Pos-graduacao em Medicina Veterinaria, Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), Santa Maria, RS, Brasil.

(II) Curso de Medicina Veterinaria, UFSM, Santa Maria, RS, Brasil.

(III) Medico Veterinario autonomo, Videira, SC, Brasil.

(IV) Departamento de Parasitologia, Universidade de Sao Paulo (USP), Sao Paulo, SP, Brasil.

(V) Departamento de Microbiologia e Parasitologia, UFSM, Santa Maria, Campus Universitario, Camobi, Km 9, Predio 20, sala 4232, 97105-900, Santa Maria, RS, Brasil. E-mail: sgmonteiro@uol.com.br. * Autor para correspondencia.
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Author:da Silva, Aleksandro Schafer; Costa, Marcio Machado; Polenz, Mauro Flores; Polenz, Carlos Henrique;
Publication:Ciencia Rural
Article Type:Report
Date:Nov 1, 2009
Words:3023
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