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Evaluacion de una mezcla de Cipermetrina + Clorpirifos sobre la garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus en pruebas de campo y de laboratorio en el predio Esteban Jaramillo Roman Gomez del Politecnico Colombiano de Marinilla, Antioquia.

EFFECT OF CIPERMETRINA + CLORPIRIFOS AGAINTS Rhipicephalus(Boophilus) microplus ON CATTLE AND INVITRO TESTING IN THE FARM ESTEBAN JARAMILLO ROMAN GOMEZ DEL POLITECNICO COLOMBIANAO IN MARINILLA, ANTIOQUIA.

Introduccion

La garrapata Rhipicephalus(Boophilus) microplus esta considerada como uno de los mas importantes ectoparasitos del ganado bovino en los paises tropicales, debido a los danos directos que ocasiona y a los agentes infecciosos que transmite y que causan enfermedades como anaplasmosis y babesiosis (9, 14).

Las garrapatas se encuentran distribuidas en diferentes zonas en todo el mundo pero es principalmente en Centro y Sur America y el occidente de Africa donde generan las mas grandes perdidas economicas, las cuales en anos anteriores fueron calculadas entre US$ 13.9 y 18.7 billones debido a que causan disminucion en la produccion de leche y carne, mortalidad del ganado; ademas del costo derivado de su control (6, 18).

El control de las garrapatas se realiza comunmente mediante sustancias acaricidas, aplicadas por los sistemas de inmersion, aspersion, aplicacion dorsal (pour on) o por inyeccion parenteral, pero debido al desarrollo de resistencia a la mayoria de los productos, a la demanda de alimentos libres de residuos quimicos y por el cuidado del ambiente, se sugiere investigar sistemas alternativos de control entre los que se pueden contar: uso de mezclas de acaricidas, el empleo de nematodos (16), vacunas (17); bacterias (15) y hongos entomopatogenos como Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae (1, 3 5 9 14, 18).

Teniendo en cuenta que los parasiticidas quimicos son un recurso no renovable y su uso continuara siendo el metodo mas importante de control de artropodos (2, 19, 27) se constituye en una herramienta que debe ser utilizada prudentemente para alcanzar el mayor beneficio posible con mayor durabilidad de la efectividad. (12).

Los programas de control de garrapatas y de las enfermedades que transmiten, deben ser adaptados en cada pais, de acuerdo con sus circunstancias particulares y objetivos nacionales y se deben tener en cuenta algunos principios basicos que por lo general pueden aplicarse a cualquier esfuerzo bien definido y coordinado (7).

Estudios realizados por Lopez y col., (1986, 1989), concluyen que en Colombia existe una gran variedad de ixodicidas y sistemas de aplicacion; sin embargo, no existen criterios claros para el uso de los productos en cuanto a: concentraciones adecuadas, conocimiento sobre especies y su bioecologia, intervalo entre banos y rotacion de compuestos (20 , 21, 22).

El mal manejo del problema se ha reflejado en el alto costo de los tratamientos, presencia de resistencia del parasito a la mayoria de los quimicos utilizados, aumento de poblaciones de garrapatas, ineficacia de los programas de control y aparicion de nuevas especies en lugares donde antes no habian sido reportadas (22).

Los trabajos realizados con cepas de Rhipicephalus(Boophilus) microplus de varias partes de Colombia han mostrado grados diversos de resistencia a compuestos piretroides (Deltametrina, Cipermetrina;Flumetrina; Alfacipermetrina; y Lambdacialotrina); al Metilcarbamato y a uno o varios de los compuestos organoclorados y fosforados (4, 5).

La situacion descrita no solo ha planteado la necesidad de ampliar el conocimiento sobre el espectro de los compuestos quimicos a los cuales las garrapatas va desarrollando resistencia, sino sobre las cepas del parasito afectadas por el fenomeno en diferentes regiones. Asi mismo se requiere, la evaluacion de nuevas estrategias de control de garrapatas y el examen de compuestos no quimicos de manera que puedan ser recomendadas como alternativas de solucion al problema (5).

Ante la ineficacia de la mayoria de los compuestos quimicos para el control de garrapatas, varios paises mencionan el uso de mezclas de principios activos para buscar sinergismo entre ellos y eliminar las cepas resistentes (Martins et al; 2008).

El empleo de mezclas de diferentes compuestos, ha sido mencionado en la literatura como una posibilidad de manejar el fenomeno de quimioresistencia de los artropodos desde 1979, se refiere a esta estrategia dentro de lo llamado manejo por ataque multiple (5, 8 13, 26).

El unico estudio reportado en Colombia fue realizado por Betancourt y col. 1999 (5). En el estudio se utilizaron cuatro cepas procedentes de igual numero de fincas de diferentes regiones, Se utilizaron las mezclas: Diazinon + Cyalotrina; Ethion + Cyalotrina; Ethion + Deltametrina; Amitraz + Cyalotrina y Amitraz + Deltametrina, con mas del 97% de efectividad en todas las pruebas.

El uso de mezclas de productos quimicos se presenta como la mas seria alternativa para el control de cepas de garrapatas resistentes en todos los paises que enfrentan el problema (26). Por tal motivo, el objeto del estudio fue determinar el efecto de una mezcla de Cipermetrina + Clorpirifos para el control de la garrapata Rhipicephalus(Boophilus) microplus en condiciones de campo y de laboratorio.

Materiales y metodos

LOCALIZACION:

El trabajo se llevo a cabo en la Granja Roman Gomez de propiedad del Politecnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid, localizada en el Municipio de Marinilla; departamento de Antioquia: La Granja se encuentra a una altura sobre el nivel del mar de 2.050 metros y registra una temperatura media de 20[grados]C y una humedad relativa entre 60 y 70%.

Animales experimentales:

Se utilizaron 19 vacas Holstein, con infestacion natural de garrapatas. Los animales no habian recibido tratamientos acaricidas en los ultimos 90 dias, esperando alta infestacion y se dividieron en dos grupos tratado (10 animales) y control con 9 animales. Al iniciar la investigacion los recuentos de garrapatas oscilaron entre 16 y 235 por animal.

Procedimiento:

Antes del tratamiento los grupos se formaron alternativamente buscando uniformidad en el numero de garrapatas por animal. El recuento de garrapatas se hizo en todo el animal y considerando solo hembra adultas con medicion entre 4 y 8 milimetros de longitud de acuerdo con la tecnica descrita por Roulston y col, 1969 para el estudio de garrapatas.

Para el estudio se utilizo una mezcla de cipermetrina + clorpirifos de acuerdo con la siguiente composicion:
Cada 100 ml contiene:

Cipermetrina        15.0 g
Clorpiriphos        25.0 g
Citronela             1.0g
Vehiculo c.b.p   1000 ml


El grupo tratado recibio el tratamiento con la mezcla del producto en dilucion 1:800 y aplicado con bomba de aspersion con una presion de 40 lb por pulgada cuadrada y con una de cantidad de 1L de la dilucion por cada 100 k de peso corporal. El grupo control no recibio tratamiento y solo se hicieron los recuentos de garrapatas.

Los recuentos de garrapatas se hicieron el dia 0 y a los 7, 14 y 21 dias post tratamiento y se consideraron solamente las que tenian entre 4 y 8 milimetros de longitud, de acuerdo con la tecnica descrita por Roulston y Col (1968) para este tipo de estudio.

Aanalisis estadistico:

Para el analisis de los resultados se utilizo la formula de Roulston y col (1968) la cual permite determinar el porcentaje de eficacia de un producto sobre garrapatas, de acuerdo al siguiente esquema:

% de supervivencia = [(a x d) (b x c)] x 100; en donde:

a = numero de garrapatas del control antes del tratamiento

b = numero de garrapatas del control despues del tratamiento

c = numero de garrapatas del grupo tratado antes de la aplicacion

d = numero de garrapatas del grupo tratado despues de la aplicacion.

Eficacia (%) = 100- % de supervivencia

PRUEBA IN-VITRO

Determinacion del Indice de la Eficiencia Reproductiva: IER

Para determinar el indice de la eficiencia reproductiva se recolectaron 10 garrapatas completamente ingurgitadas de sangre de los grupos tratado y control y luego de estimar el peso se sometieron a incubacion en condiciones temperatura del laboratorio durante treinta dias para determinar el numero de huevos ovipositados en cada grupo y luego estimar el porcentaje de eclosion larvaria y determinar asi la eficiencia reproductiva, de acuerdo con la formula descrita por Drummond y col (1970), en donde:.

IER = peso de los huevos X % eclosion X 20.000

peso de las teleoginas

Los huevos de cada lote se colocaron en tubos de ensayo con tapon de gasa y se llevaron nuevamente a incubacion durante 30 dias para determinar el porcentaje de eclosion.

Calculado el Indice reproductivo del grupo tratado y control se calculo la Eficiencia reproductiva en la siguiente forma:

ER = (IR control - IR tratado) X 100 = % efectividad

IR control

CONSIDERACIONES ETICAS

Aspectos eticos. Los procedimientos realizados para los tratamientos en el ganado bovino se rigio de acuerdo a la Ley 84 de 1989, capitulo VI, articulos 23 (literales a, b, c) y 24 del estatuto nacional de proteccion de los animales y que regula el uso de animales vivos en experimentos e investigacion.

Asi mismo para el cuidado, manejo y mantenimiento de animales se tuvieron en cuenta los protocolos y recomendaciones del IACUC (Institucional Animal Care and Use Committe) de la Universidad de Minnesota, en AVMA (American Veterinary Medical Association), para la eutanasia y las recomendaciones sobre las buenas practicas en la administracion de sustancias y sangria de animales expuestas en el articulo EFPIA(the European Federation of Pharmaceutical IndustriesAssociations /ECVAM (the European Center for the Validation of Alternative Methods) (Anexo Concepto del Comite de etica).

En esta investigacion no se trabajo con muestras biologicas humanas por lo tanto no se determinaron las categorias de riesgo en humanos y se rigio de acuerdo a la resolucion No. 008430 de 1993 emanada del Ministerio de Salud de la Republica de Colombia Titulo IV, en su Capitulo I, sobre La Bioseguridad de las Investigacion y el manejo de material biologico que pueda contener microorganismos patogenos en los Articulos 63, 65, 66, 67 (literal c) y 69.

La investigacion debe cumplir con los aspectos eticos que figuran en la resolucion 008430 de 1993 emanada del Ministerio de Salud en la cual en el Titulo II Capitulo 1, se establecen las normas eticas para la investigacion en animales.

Una vez finalizado el experimento, los animales del grupo control recibieron tratamiento con el producto experimental y se hicieron observaciones durante tres semanas para diagnosticar la presencia de hemoparasitos, pero no se presentaron casos clinicos de enfermedad infecciosa

Resultados

En las tablas 1 y 2, se presentan los recuentos de garrapatas en el grupo tratado y control durante los 21 dias experimentales.

El total de garrapatas para el grupo tratado en el dia 0 fue de 780 para un promedio por animal de 78; El total para el dia 7 fue de 3 garrapatas para un promedio por animal de 0,3; en el dia 14 se contabilizaron en total de 55 garrapatas para un promedio de 5,5 y el dia 21 el total de garrapatas para el grupo fue de 18 para un promedio por animal de 1,8 (ver tabla 1).

En el grupo control el total de garrapata contabilizadas el dia 0 fue de 786, para un promedio por animal de 87,3; para el dia 7 el total fue de 345 para un promedio por animal de 38,3; el total de garrapatas para el grupo en el dia 14 fue de 565 para un promedio por animal de 63 y el total de garrapatas el dia 21 fue de 554 para un promedio por animal de 62 garrapatas (ver tabla 2).

Determinacion del porcentaje de Eficacia

Aplicacion de la formula de Roulston

% supervivencia = a x d/ b x c x 100 =

786 x 3/345x780 = 2358/269100 x 100 = 0,876

Efectividad del producto para el dia 7 = 100 -0,876 = 99,12%

% supervivencia dia 14

786 x 55/565 x 780 = 43230 --/440700 = 9, 809

Efectividad del producto para el dia 14

100 - 9,809 = 90,19 %

% supervivencia dia 21

786 x 18 /554 x 780 = 3,274

Efectividad del producto dia 21

100 - 3,274 = 96,726%

Determinacion de la Eficiencia Reproductiva

ER tratado= peso huevos/ Peso teleognas x % eclosion x 20.000 = 0,30/5,4 x 0 x 20.000 = 0

ER control = 2,010/5,0 x 90 x 20.000 = 723600

Prueba in vitro

Efectividad del producto sobre la reproduccion de las garrapatas

ER control - ER tratado/ ER control x 100 = 723600/723600 = 100 %

Discusion

Los resultados demuestran que en las condiciones del trabajo la mezcla de cipermterina + Clorpirifos tuvo una efectividad sobre garrapatas del ganado Rhipicephalus(Boophilus) microplus del 99,12 % a los 7 dias de aplicado el producto, a los 14 dias la efectividad fue del 90,19% y finalmente a los 21 de aplicado el producto la efectividad fue del 96, 72%.

En los estudios in vitro, la efectividad del producto sobre la oviposicion y fertilidad de los huevos fue del 100% situacion que permite concluir que el producto es muy promisorio en Colombia donde existe resistencia a la mayoria de los productos.

El hecho de la reduccion gradual de garrapatas en el grupo control puede obedecer al ciclo biologico de las garrapatas que no alcanzaron a reinfestar los animales en el periodo experimental y ademas por cuanto despues del Tratamiento los dos grupos estuvieron pastando en el mismo potrero por las condiciones experimentales y pudo existir contacto entre animales tratados y controles.

Los resultados obtenidos al aplicar la mezcla de Cipermetrina + Clorpirifos sobre bovinos naturalmente infestados con garrapatas Rhipicephalus (Boophilus) microplus permitieron observar una disminucion en el numero de garrapatas de mas del 99% a los 7 dias de haber aplicado el producto. Resultados similares de efectividad fueron reportados por Betancourt et al (1999) y por da Costa et al (2001) cuando aplicaron formulaciones de mezclas de organofosforados y piretroides y de Cipermetrina y Clorpirifos respectivamente en cepas de garrapatas resistentes a cada producto individualmente.

Con respecto al efecto de la mezcla Cipermetrina + Clorpirifos sobre la reproduccion de las garrapatas, en el presente estudio se observo una efectividad del 100%, es decir, la mezcla inhibe la oviposicion y en caso de no ser completa la inhibicion se presenta infertilidad de los pocos huevos ovipositados. Resultados similares fueron obtenidos por Betancourt, 1999 cuando utilizo diferentes mezclas de organofosforados como ethion y Piretroides.

Conclusiones

Los resultados obtenidos con la mezcla de Cipermetrina +Clorpirifos demostraron que se redujo la poblacion de garrapatas en mas del 99% despues de 7 dias de tratamiento de bovinos por aspersion y las pruebas in vitro lograron una eficacia del 100%, situacion que permite concluir que en paises donde se ha demostrado resistencia de R(Boophilus) microplus a la mayoria de los compuestos quimicos, las mezclas de piretroides y organofosforados pueden ser la alternativa para un control efectivo y por tanto es recomendable sugerir la realizacion de otros experimentos en diferentes regiones del pais antes de recomendar las mezclas de productos para el control de garrapatas

El hecho de la reduccion gradual de garrapatas en el grupo control puede obedecer al ciclo biologico de las garrapatas que no alcanzaron a reinfestar los animales en el periodo experimental.

Recibido el 29 de abril de 2009 y aceptado el 20 de noviembre de 2009

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Gustavo Lopez Valencia [1], Cristiano Grisi do Nacimento [2], Jorge Gomez Oquendo [3], Luis Alfonso Valencia Agudelo [4]; Diego Gonzalez Carrasquilla [4]

[1] Medico Veterinario, MSc. Instituto Colombiano de Medicina Tropical. E mail: glopez@ces.edu.co;

[2] Medico Veterinario. Laboratorios Ourofino Animal Health Gerente de Marketing / Marketing Manager.;

[3] Medico Veterinario Politecnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid.,

[4] Tecnologo Agropecuario, Politecnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid.; Medico Veterinario Laboratorios Ourofino.
Tabla 1. Recuento de garrapatas estandar en el grupo tratado.

GRUPO TRATADO      DIA 0        DIA 7        Dia 14       DIA 21

                 Numero de    Numero de    Numero de    Numero de
Identificacion   garrapatas   garrapatas   garrapatas   garrapatas

255                 151           0            6            1
18                  169           1            10           3
236                 114           2            9            1
240                 107           0            14           6
254                  41           0            1            2
45                   75           0            6            2
253                  55           0            3            0
262                  33           0            3            1
259                  14           0            2            0
234                  21           0            1            2

Tabla 2. Recuento de garrapatas estandar en el grupo control.

RUPO CONTROL       DIA 0        DIA 7        Dia 14       DIA 21

                 Numero de    Numero de    Numero de    Numero de
Identificacion   garrapatas   garrapatas   garrapatas   garrapatas

17                  175           64          130          130
34                  117           38           62           68
237                 113           34           52           80
16                   95           39           45           46
43                   70           35           68           70
251                  65           21           62           30
42                   90           95           75           68
265                  20            4           43           32
252                  41           15           28           30
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Author:Lopez Valencia, Gustavo; Grisi do Nacimento, Cristiano; Gomez Oquendo, Jorge; Valencia Agudelo, Luis
Publication:Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia
Date:Jul 1, 2009
Words:3759
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