Printer Friendly

Evaluacion de la dinamica del crecimiento in vitro en callos de Ipomoea batatas.

Evaluation of the dynamics of the growth in vitro callus of Ipomoea batatas

Introduccion

El boniato (Ipomoea batatas [L.] Lam.) es de alto consuo, siendo uno de los cinco cultivos alimenticios mas importantes del mundo y se adapta a diferentes condiciones edafoclimaticas, de ciclo corto, y permite varias cosechas al ano (Estuardo, 2008). Segun Arencibia y Cornide (1999), la aplicacion de las tecnicas de cultivo in vitro abren una amplia perspectiva para su empleo en la micropropagacion de especies vegetales y en especial para el cultivo del boniato. En trabajos realizados por Lopez et al. (2002), plantearon que la importancia del mismo esta dada por su habito de consumo y ciclo vegetativo corto, lo cual permite la multiplicacion rapida en un periodo breve de tiempo.

Los avances biotecnologicos marcan nuevas pautas en las investigaciones y en la busqueda de nuevas vias de propagacion acelerada de diversos cultivos; ademas, constituyen una herramienta mas de la cual es posible obtener mayor provecho, partiendo de la obtencion de callos potencialmente embriogenicos. Por otro lado, las tecnicas de cultivo de tejidos vegetales sirven para identificar las especies, posibilitando la conservacion y multiplicacion de la biodiversidad vegetal (Alvarado, 1998).

Los callos (caracterizados por el crecimiento celular), de acuerdo con sus caracteristicas morfologicas y citologicas, pueden ser empleados para buscar diferencias en los patrones de expresion en la formacion de embriones somaticos, como una via de multiplicacion acelerada de las especies vegetales.

Los resultados obtenidos en el presente trabajo, en la evaluacion de los callos y su comportamiento, serviran de base a otros estudios, permitiendo evaluar, controlar y desarrollar estrategias para la conservacion y el uso de los recursos naturales, posibilitando lograr avances en la preservacion integral de los mismos.

Es por ello que el objetivo planteado en el presente trabajo fue estudiar la dinamica del crecimiento de callos potencialmente embriogenicos de Ipomoea batatas.

Materiales y metodos

El trabajo fue realizado en el Departamento de Genetica y Mejoramiento de las Plantas, del Instituto Nacional de Ciencias Agricolas (INCA), La Habana, y el Centro de Estudios de Biotecnologia Vegetal (Cebveg), perteneciente a la Facultad de Ciencias Agricolas de la Universidad de Granma.

Para la obtencion de los callos se recolectaron raices tuberosas correspondientes al clon Inivit B 93-1, trasladadas al laboratorio y colocadas en frascos con agua. A los 25 dias de emitidos los brotes se procedio al corte de los explantes de limbos foliares, sembrados en el medio compuesto por las sales de Murashige y Skoog (1962), mioinositol (100 mg/[L.sup.-1]), vitaminas MS (10,0 ml/[L.sup.-1]), sacarosa (3,0%) y gelrite (0,2%). Al medio de cultivo se le anadio acido diclorofenoxiacetico (2,4-D) a 1,0 mg/[L.sup.-1] y 6-bencilaminopurina (6-BAP) a 0,50 mg/[L.sup.-1], segun Cantliffe (1993). El pH del medio de cultivo fue ajustado a 5,8 [+ o -] 0,01 e incubados en la oscuridad permanente.

Estudio del limbo foliar en la formacion de callos potencialmente embriogenicos

Se colocaron explantes pertenecientes a la zona basal del limbo foliar en frascos con 20 ml de medio de cultivo con diferentes combinaciones de 2,4-D (0,25; 0,50; 1,0; 2,0 y 2,5 mg/[L.sup.-1]) y 6-BAP (0,25; 0,50 y 1,0 mg/[L.sup.-1]), descritas por Jarret (1989) y Cantliffe (1993).

A los 30 dias se evaluo el porcentaje de formacion de callos de grado 3 segun la escala propuesta por Santana (1982), y el porcentaje de callos potencialmente embriogenicos. Ademas, se realizo una evaluacion cualitativa del callo en cuanto a color (amarillo, crema y blanco) y consistencia (compacto, friable y esponjoso).

Dinamica del crecimiento de los callos potencialmente embriogenicos

Se realizaron muestreos de los callos a partir de los 20 hasta los 40 dias, y se evaluo el porcentaje de callos potencialmente embriogenicos determinando el momento optimo de efectuar el subcultivo de los mismos, para lo cual se determino inicialmente el peso del explante de limbo foliar (1 [cm.sup.2]) y se llevo a cabo la pesada (g) cada dos dias, tomando en cada muestreo tres callos al azar.

Los datos obtenidos en la formacion de callos, pertenecientes al grado 3 de la escala propuesta por Santana (1982), fueron procesados mediante un analisis de comparacion de proporciones. Por otro lado, los resultados obtenidos en la dinamica del crecimiento de los callos se ajustaron a la funcion matematica a traves del programa SigmaPlot 2000.

Resultados y discusion

Estudio del limbo foliar en la formacion de callos potencialmente embriogenicos

En la tabla 1 se muestran los resultados obtenidos con el empleo de diferentes concentraciones de los reguladores del crecimiento, donde el medio con 2,4-D (0,50 mg/L1) y 6-BAP (0,25 mg/[L.sup.-1]) resulto superior en la formacion de callos desde el punto de vista cuantitativo (total de callos formados) con valores de 100% y cualitativo (callos potencialmente embriogenicos), con valores entre 90,0 y 96,0%, formandose callos pertenecientes al grado 3, de color crema y amarillo, nodulares y friables (figura 1), existiendo diferencias significativas con los demas tratamientos evaluados; el resultado alcanzado indico el efecto positivo del 2,4-D y el 6-BAP en el indicador evaluado.

[FIGURA 1 OMITIR]

Segun Benavides (2008), existen varios trabajos investigativos del cultivo del camote o las batatas a partir del empleo de diferentes explantes en la formacion de callos potencialmente embriogenicos, entre los que se encuentran los limbos foliares y existe una gran dependencia del genotipo utilizado en la respuesta encontrada.

Aunque no se obtuvieron diferencias significativas entre la concentracion antes mencionada y algunas de las restantes concentraciones empleadas, si se apreciaron diferencias en las caracteristicas morfologicas en los callos formados.

El hecho de que haya existido un comportamiento diferente en las caracteristicas morfologicas de los callos puede estar dado por el balance de los reguladores del crecimiento empleados, que a pesar de favorecer la formacion de callos de grado 3 de manera similar en el material vegetal en algunos medios evaluados, difieren en sus caracteristicas morfologicas que se encuentran intimamente relacionadas con la composicion celular de los mismos y esto a su vez influye en su capacidad morfogenetica.

Al respecto, Garcia (1998) senalo la importancia del balance hormonal en los medios de cultivo para la formacion de callos, planteando que la obtencion de un medio de cultivo optimo requiere de mayor profundidad en las investigaciones para que los analisis cuantitativos y cualitativos contribuyan de forma esclarecedora en la mejor interpretacion de los resultados, enfatizando que diversos autores han realizado estudios en la formacion de callos en diferentes cultivos de interes.

Trabajos relacionados con la composicion del medio de cultivo han sido abordados por Santana (1982) en el cultivo del cafeto (Coffea sp), senalando que la accion del 2,4-D en la formacion de callos fue nula al ser empleado de manera independiente en el medio de cultivo, pero al ser combinado con 6-BAP, esta fue posible. Mientras, que Collado et al. (2005), indicaron que no solo el 2,4-D combinado con una citoquinina juega un papel importante en la formacion de callos; sino que influye en las caracteristicas de los mismos. Por otra parte, Capote et al. (2000) plantearon que cuando se analiza la respuesta en el crecimiento, se observa que la adicion de 2,4-D, combinado con una citoquinina, estimula la formacion de callos.

Segun Gonzalez (2003), el balance de los reguladores del crecimiento en el medio de cultivo, en especial el tipo y la concentracion, pueden llegar a determinar las caracteristicas de los callos en el proceso embriogenico, siendo el resultado de un adecuado balance de los reguladores del crecimiento, donde pueden formarse gran cantidad de callos con el empleo de diversas combinaciones y estos diferir en sus caracteristicas morfologicas, lo cual determina posteriormente la formacion de los embriones somaticos; mientras que su presencia y concentracion se encuentran en dependencia del tipo de tejido y del genotipo donante, de ahi la importancia del material vegetal estudiado (Santana et al., 1998).

Un comportamiento similar con relacion al balance de los reguladores del crecimiento en respuesta a la callogenesis fue observado por Garcia y Menendez (1987), para conocer los requerimientos de la embriogenesis somatica a partir de callos en Coffea arabica, disenando experimentos con combinaciones de 2,4-D y AIB con cinetina y 6-BAP, encontrando que se formaron gran cantidad de callos en diversas de estas combinaciones y solo con el empleo del 2,4-D (1,0 mg/[L.sup.-1]) y 6-BAP (0,8 mg/[L.sup.-1]) se favorecio la formacion de callos potencialmente embriogenicos.

Garcia et al. (2002), plantearon que resulta indiscutible que el manejo de los reguladores del crecimiento constituye un factor fundamental en los sistemas in vitro. Sin embargo, tambien es necesario conocer la accion que dichos reguladores ejercen a diferentes niveles, asi como su interrelacion con el complejo hormonal endogeno del explante que sin dudas es muy diferente a la planta en condiciones naturales, pues no existe una regulacion centralizada y organizada (Piferrer et al., 2001).

Dinamica del crecimiento de los callos potencialmente embriogenicos

Al analizar el efecto de la edad del callo en las caracteristicas morfologicas de los mismos se encontro que el momento optimo para realizar el subcultivo de estos se encuentra entre los 28 y 32 dias (tabla 2), mostrando un color crema y amarillo, nodulares y friables, caracteristicas coincidentes con las senaladas por Jarret (1989) y Cantliffe (1993) en la formacion de callos en la especie objeto de estudio en el presente trabajo. Antes de este momento los callos presentaban un color amarillo y eran compactos, lo cual demuestra que requieren de un tiempo mas prolongado en el medio de cultivo para expresar las caracteristicas morfologicas relacionadas con los procesos morfogeneticos.

El analisis del crecimiento de los callos ha sido utilizado para evaluar el comportamiento de los mismos, a traves de los cuales se explica la accion del empleo de los reguladores del crecimiento, lo que abre nuevas vias para el establecimiento in vitro de estos procesos. Al respecto, la edad del callo constituye un aspecto de gran importancia en el proceso de callogenesis en las diferentes especies vegetales, ya que el tiempo de permanencia en el medio de cultivo define el posterior comportamiento de estos (Garcia, 1998).

Los resultados obtenidos senalan que en las condiciones experimentales descritas, el momento adecuado para el subcultivo de los callos al medio de formacion de embriones somaticos estuvo comprendido entre los 28 y 32 dias. Hasta los 36 dias los callos mantuvieron el color crema y amarillo, pero menos friables y nodulares, y posteriormente alcanzaron un color crema y oscuro, lo cual indica la perdida de potencialidades embriogenicas en los mismos.

De los resultados mostrados anteriormente se infiere que el estudio de la edad del callo resulta de gran importancia ya que determina el momento en el que este requiere ser subcultivado en el medio inductor de embriones somaticos, porque conjuntamente con el tiempo de sembrado y los estudios morfologicos analizados pueden constituir un marcador visual de gran utilidad practica para determinar el momento del subcultivo de los mismos con la mayor eficiencia posible.

Los resultados obtenidos permiten senalar que es evidente la marcada influencia que ejerce la composicion hormonal endogena del explante empleado y los reguladores en el medio de cultivo en el crecimiento de la masa fresca de los callos, reflejado en la edad de los mismos y se manifiesta en las diferentes caracteristicas morfologicas, sirviendo de base para estudios en la dinamica del crecimiento de los callos al evaluar su comportamiento en el medio de cultivo durante la formacion, y constituye a su vez un importante indicador del potencial embriogenico ya que a partir de estos se originan los embriones somaticos los cuales, segun Lee (2010), en determinadas especies vegetales, como la batata o boniato, resultan de gran importancia para su propagacion.

En la figura 2 se muestra la dinamica del crecimiento de los callos, desde el momento de efectuada la siembra de los explantes, hasta los 87 dias, y se observa que al determinar el crecimiento, mediante el comportamiento biologico descrito por los mismos, se obtuvo una curva semejante a la de otras especies, en la que se distinguen tres fases: periodo inicial o de latencia, el cual tuvo una duracion de siete dias, caracterizandose por un crecimiento lento dado que el explante se encuentra en un proceso de adaptacion a las condiciones de cultivo in vitro, y se determino el comportamiento biologico en el crecimiento de los callos en funcion de la masa fresca; la decision de realizar posteriormente el subcultivo para la formacion de los embriones somaticos se tomo sobre la base del tiempo y las caracteristicas morfologicas de los callos en el proceso de crecimiento.

[FIGURA 2 OMITIR]

A partir de los ocho dias se inicio la fase de crecimiento exponencial hasta aproximadamente los 30 dias, donde se produjo un aumento acelerado en la masa fresca y el volumen de los callos. A partir de los 30 hasta los 65 dias se presento una fase de crecimiento lineal. Despues de los 66 dias, el crecimiento de la masa callogena ceso y comenzo el necrosado y la senescencia del callo, y se produjo un decrecimiento brusco en la masa fresca a partir de este momento, lo cual pudo ser causado por el agotamiento de los nutrientes y el agua como constituyentes del medio de cultivo; se muestra la curva de crecimiento ajustada para tener una referencia del comportamiento de la masa fresca de los callos segun la aplicacion de un modelo matematico que permite valorar y correlacionar el crecimiento de los mismos en correspondencia con su comportamiento biologico. Los resultados citados demuestran que es posible relacionar el desarrollo de los callos (momento de la curva) con el ajuste matematico realizado, a partir de lo cual se infiere que a los 30 dias de formados los callos, en este momento coincidio con la maxima intensidad de crecimiento de los mismos, reflejada en el inicio de la fase de crecimiento lineal segun el ajuste matematico.

En este sentido, es bueno destacar que la curva obtenida se ajusta en gran medida a la curva sigmoide caracteristica del crecimiento, mediante la cual puede ser evaluado el mismo. Por otra parte, los estudios de los callos como material vegetal de partida permiten conocer, a partir de las especies estudiadas, la informacion que las mismas ofrecen de su composicion celular especifica, crecimiento, morfologia, caracteristicas y actividad, lo cual puede ser empleado en futuros estudios ofreciendo posibles vias y soluciones que permitan la proteccion, conservacion y estudio de la biodiversidad.

Los resultados logrados en el presente trabajo demuestran que a los 30 dias los callos con potencialidades embriogenicas alcanzaron un desarrollo que les permitio expresar caracteristicas morfologicas favorables para la formacion futura de los embriones somaticos, segun lo descrito por Cantliffe (1993), las cuales persisten hasta los 32 dias del cultivo; ademas, la curva de la ecuacion matematica ajustada coincidio con el momento de maxima intensidad del crecimiento de los callos, lo cual sugiere que existe la posibilidad de que teoricamente este constituye el momento optimo para realizar el subcultivo de los mismos y el punto preciso para cambiar de medio de cultivo, con la finalidad de llevar a cabo la formacion de los embriones somaticos, alcanzando la maxima masa de crecimiento de los callos a los 66 dias, y no presentaron caracteristicas morfologicas favorables para formar posteriormente los embriones somaticos, momento en que el callo ha completado su desarrollo. Al respecto, es necesario senalar que, segun Garcia (1998), se requiere ganar claridad entre los aspectos cuantitativos (ganancia en masa fresca) y cualitativos (caracteristicas morfologicas), pues el resultado en la formacion de callos potencialmente embriogenicos depende de ellos.

Es por esto que esta investigacion sirve de base a los estudios que se realizan para evaluar el comportamiento del material vegetal en condiciones naturales, y los mismos no pueden ser observados en esas condiciones y se requiere de estudios de laboratorios. En este sentido, la callogenesis puede desarrollar un papel importante porque permite conocer la composicion celular y el comportamiento morfologico de los materiales estudiados.

En el cultivo del boniato, con el empleo de la callogenesis, se abren nuevas areas para la investigacion cientifica y el estudio de la biodiversidad vegetal, representando una herramienta de gran utilidad para el estudio y la multiplicacion de especies de interes, siendo un aspecto de gran importancia en la agricultura moderna. Con el presente trabajo como referencia, se puede estudiar el comportamiento de las especies en la fase de callogenesis, garantizando asi la eficiencia en esta etapa del proceso, que a la vez se revierte en fundamento cientifico basado en optimizacion del tiempo. Los resultados anteriores demuestran que el proceso de formacion de callos es de gran importancia, y su aplicacion resulta de interes en los programas de investigacion en la rama biotecnologica, constituyendo una herramienta para monitorear el comportamiento del material vegetal.

El comportamiento del programa de desarrollo de la biotecnologia vegetal en Cuba muestra resultados positivos, teniendo presentes los logros alcanzados en cultivos de interes agricola, ornamental, de plantas medicinales y de alimentacion animal, satisfaciendo sus intereses, necesidades y posibilidades en la mayoria de los casos; segun Mustelier (2007), en el desarrollo de las investigaciones cientificas se deben conseguir resultados en el plano instructivo y formativo, lo que se logra fundamentalmente con la aplicacion del pensamiento, y el conocimiento cientifico y tecnologico para enfrentar determinadas situaciones.

Conclusiones

Los mejores resultados en la formacion de callos potencialmente embriogenicos, a partir del limbo foliar, se obtuvieron con el empleo de 2,4-D (0,50 mg/[L.sup.-1]) y 6-BAP (0,25 mg/[L.sup.-1]).

Los callos formados a los 28 y 32 dias presentaron la mejor respuesta, expresada en el color, la textura y la nodulacion de los mismos, destacandose los callos con esta edad como los mas favorables para realizar el subcultivo y lograr posteriormente la formacion de los embriones somaticos.

Agradecimientos

A los trabajadores del Instituto Nacional de Ciencias Agricolas de La Habana (INCA), en especial a los miembros del Departamento de Genetica y Mejoramiento de las Plantas, por las sugerencias realizadas en el tema y la ayuda brindada en la ejecucion de este trabajo; a los miembros del Instituto Nacional de Viandas Tropicales (Inivit), Santo Domingo, Villa Clara, por el material suministrado y las sugerencias realizadas.

Recibido: enero 4 de 2010 Aprobado: mayo 31 de 2011

Referencias bibliograficas

Arencibia, D. A., Cornide, M. T. 1999. Biodiversidad y biotecnologia de la cana de azucar. Elfos. La Habana, 168 p.

Alvarado, Y. 1998. Contaminacion microbiana en el cultivo in vitro de plantas. En: J. Perez (ed.). Propagacion y mejora genetica de plantas por biotecnologia. Cap. 5, Vol. I. IBP. Santa Clara. pp. 82-104.

Benavides, J.R. 2008. Aplicaciondetecnicasbiotecnologicasencamote: regeneracion y transformacion genetica. Centro Internacional de la Papa (CIP), Lima, Peru. p. 3.

Cantliffe, D. J. 1993. Somatic Embryos in Sweet Potato. En: W. A. Hill, C. K. Bonci y P. A. Loretan (eds.). Sweetpotato Technology for the 21st Century. Tuskegee. pp. 38-46.

Capote A., Rodriguez Z. y Perez O. 2000. Estudio de la variabilidad inducida en celulas y plantulas de cebolla (Allium cepa, L.) cv Caribe-71 regeneradas in vitro. Biotecnologia Aplicada, 17(4): 241-246.

Collado, R., Barbon R., Agramonte, D., Jimenez, F., Perez, M., Gutierrez, O., Ramirez, D. 2005. Diferenciacion de embriones somaticos de Switenia macrophylla King en medio de cultivo semisolido. Taller Internacional sobre Biotecnologia Vegetal y Agricultura Sostenible (BioVeg 2005). Centro de Bioplantas. Ciego de Avila. CD-ROM. p. 24.

Estuardo, A. S. 2008. Induccion de embriogenesis somatica a partir de vitrosegmentos nodales y vitrolaminas foliares durante el establecimiento in vitro de camote (Ipomoea batatas). Proyecto especial presentado como requisito parcial para optar al titulo de ingeniero agronomo en el grado academico de Licenciatura. Zamorano. Honduras.

Garcia, E., Menendez, A. 1987. Embriogenesis somatica de explantes foliares de cafeto "Catimor". Cafe, Cacao, The 31 (2): 15-21.

Garcia, L., Padron, Y., Perez, J., Bermudez, C., Orellana, P., Veitia, R., Romero, C. 2002. Regeneracion de plantas a partir de yemas adventicias en banano cv. gran enano (AAA). Jornada XXXV Aniversario del Inivit, Santo Domingo, Villa Clara.

Garcia, O. D. 1998. Actividad biologica de analogos de brasinoesteroides sobre la formacion de callos embriogenicos en cafeto (Coffea canephora Pierre). Tesis de Maestria (Master en Biologia Vegetal). INCA, La Habana.

Gonzalez, M. E. 2003. Micropropagacion de cafeto (Coffea canephora P. var. Robusta) mediante la embriogenesis somatica con el empleo de metabolitos de origen bacteriano. Tesis de Grado (Dr. en Ciencias Agricolas). INCA, La Habana.

Jarret, R. L. 1989. Somatic Embryogenesis in Sweet Potato. Hort Science 19: 397-398.

Lee, L. H., Murguia, J. G., Laguna, A. C., Garcia, B. R., Gamez, M. R., Galindo et al. 2010. Desarrollo de semillas artificiales. Chapingo Serie Horticultura.

Lopez, J., Torrez, M., Borroto, C., Trujillo, T., Daquinta, M., Gomez, R. et al. 2002. Metodologia para la propagacion in vitro del boniato. Jornada XXXV Aniversario del INIVIT, Santo Domingo, Villa Clara.

Mustelier, F. C. 2007. Propuesta de sistema de conocimientos de la asignatura "Medicina Interna de la carrera de Medicina". Tesis para optar por el titulo de Master en Educacion Medica. Hospital Clinico-Quirurgico "Celia Sanchez Manduley", Ciudad de Manzanillo, Provincia de Granma, Cuba.

Murashige, T., Skoog, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiol. Plantar 15: 473-497.

Santana, N. 1982. Determinacion de un medio adecuado para la obtencion de callos en variedades de cana de azucar (Saccharum sp.) in vitro. Cultivos Tropicales 4 (3): 35-40.

Santana, N., Martinez, O., Gonzalez, M. 1998. Embriogenesis somatica en el cultivo del cafeto (Coffea arabica). Cultivos Tropicales 10 (2): 36-43.

Piferrer, A., Rosalez, Y., Reyes, Z. 2001. Descripcion morfohistologica de la callogenesis en pina cabezona (Ananas comosus (L.) Merr.). Taller Internacional de Biotecnologia Vegetal (BioVeg 2001). Centro de Bioplantas. Ciego de Avila.

Orlando S. Gonzalez Paneque, Doctor en Ciencias Agricolas. Profesor Titular, Universidad de Granma, Centro de Estudios de Biotecnologia Vegetal, Granma, Cuba. ogonzalezp@udg.co.cu

Margarita Hernandez Espinosa, Doctora en Ciencias Agricolas, Instituto Nacional de Ciencias Agricolas, Departamento de Genetica y Mejoramiento de las Plantas, San Jose de Las Lajas, La Habana, Cuba.

Juan J. Silva Pupo, Doctor en Ciencias Agricolas. Profesor Titular, Universidad de Granma, Centro de Estudios de Biotecnologia Vegetal, Granma, Cuba.

Angel Espinosa Reyes, Magister en Ciencias Agricolas. Profesor Auxiliar, Universidad de Granma, Centro de Estudios de Biotecnologia Vegetal, Granma, Cuba.
Tabla 1. Efecto de diferentes concentraciones de 2,4-D
y 6-BAP en la formacion de callos potencialmente
embriogenicos

Composicion     Formacion de callos
del medio de      de grado 3 (%)
  cultivo       Genotipo evaluado:
                clon Inivit B 93-1

   2,4/D         TCF        CPE
 6/BAP (mg/
 [L.sup.1])

 0,25 0,25     100,0 a     70,0 c
 0,50 0,25     100,0 a      100 a
  1,0 0,25     100,0 a    90,0 bc
  2,0 0,25     100,0 a     90,0 b
  2,5 0,25     100,0 a     64,0 f
 0,25 0,50       100 a     90,0 b
 0,50 0,50      94,0 b     90,0 b
  1,0 0,50     100,0 a     78,0 d
  2,0 0,50     100,0 a     90,0 b
  2,5 0,50      96,0 b     84,0 c
  0,25 1,0     100,0 a     90,0 b
  0,50 1,0     100,0 a     84,0 c
  1,0 1,0       88,0 c     80,0 d
  2,0 1,0      100,0 a     70,0 e
  2,5 1,0      100,0 a     54,0 g
     F         4 12 ***   5,42 ***

Medias con letras iguales no difieren significativamente
entre si segun la prueba de Duncan, p < 0,05.

TCF: total de callos formados. CPE: callos potencialmente
embrio-genicos.

Tabla 2. Caracteristicas del callo potencialmente embriogenico
en diferentes edades. Genotipo evaluado: clon Inivit B 93-1

Edad del   Caracteristicas de los callos formados
 callo
  Dias      Callos         Color         Nodular   Friable   Compacto
           formados

   20         +           Amarillo          -         -         *
   22         +           Amarillo          -         -         *
   24         ++          Amarillo          *         -         *
   26         ++          Amarillo          *         -
   28        +++      Crema y Amarillo     **        **         --
   30        +++      Crema y Amarillo     **        **         --
   32        +++      Crema y Amarillo     **        **         --
   34        +++      Crema y Amarillo      *         *         --
   36        +++      Crema y Amarillo      *                   --
   38        +++       Crema y Oscuro       *         -         *
   40        +++       Crema y Oscuro       *         -

Cantidad de callos formados: nodular, friable, compacto.
(-): No formacion. (-): No nodular. (-): No friable. (-): No compacto
(+): Ligera formacion. (*): Poco nodular. (*): Poco friable.
(*): Compacto. (++): Media formacion. (**): Nodular. (**): Friable.
(+++): Abundante formacion.
COPYRIGHT 2011 Universidad Nacional de Colombia, Instituto de Biotecnologia
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2011 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Title Annotation:ARTICULO CORTO
Author:Gonzalez Paneque, Orlando S.; Hernandez Espinosa, Margarita; Silva Pupo, Juan J.; Espinosa Reyes, An
Publication:Revista Colombiana de Biotecnologia
Date:Jul 1, 2011
Words:4422
Previous Article:Primer reporte de susceptibilidad del clon de caucho natural FX-3864 a Microcyclus ulei en la altillanura colombiana.
Next Article:Perspectivas del uso de bacterias rizosfericas en el control de Pyricuiaria grisea (Cooke Sacc.) en el cultivo del arroz (Oryza sativa L.).
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2020 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters