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El virus de la diarrea viral en bovinos criollos de la provincia de Melgar, Puno.

BOVINE VIRAL DIARREA VIRUS IN CRIOLLO CATTLE OF THE PROVINCE OF MELGAR, PUNO

INTRODUCCION

La provincia de Melgar, dentro del departamento de Puno, presenta una notable actividad pecuaria. Tiene una poblacion de 91,710 bovinos de tipo criollo y cruzados con Brown Swiss, constituyendo el 15.3% de la poblacion total de bovinos de la Region Puno. Los animales son criados en forma extensiva o semi extensiva, alimentados con pasturas naturales y en menor escala con pastos cultivados de alto valor forrajero. La zona tiene una produccion de leche de 10,015 TM/ano; y como en todas las zonas altoandinas, el desarrollo de la ganaderia se encuentra afectado por la falta de adecuada tecnologia de manejo y programas sanitarios que en conjunto repercuten en la produccion y productividad (MINAG-OIA, 2003).

La diarrea viral bovina (DVB) es una enfermedad de distribucion mundial y endemica en la mayoria de las poblaciones bovinas (Houe, 1995, 1999). Es causado por el virus de la diarrea viral bovina (VDVB), antigenicamente relacionado a los virus de la Peste Porcina Clasica (PPC) y Enfermedad de la Frontera (VEF), donde los tres agentes pertenecen al genero pestivirus, familia Flaviviridae (Wengler, 1991). El VDVB posee un biotipo citopatogenico (CP) y otro no citopatogenico (NCP) segun su efecto en cultivo celular, pero ambos biotipos ocasionan la misma enfermedad con amplio rango de manifestaciones clinicas, predominando la forma subclinica en el 70-90% de los casos (Baker, 1995).

La forma aguda se caracteriza por ser leve, pero el animal puede presentar fiebres ligeras, leucopenia, lesiones discretas en la mucosa oronasal y una mayor susceptibilidad a infecciones secundarias. El efecto del virus en el tracto reproductivo tiene impacto economico ya que puede inducir infertilidad temporal, muerte embrionaria, abortos, malformaciones congenitas, y nacidos debiles o con infeccion persistente, dependiendo del periodo de la gestacion, del biotipo y virulencia de la cepa viral infectante (McGowan y Kirkland, 1995; Brownlie et al, 1998).

Estudios serologicos realizados en bovinos de las principales cuencas lecheras del Peru muestran que el VDVB esta ampliamente difundido, y con prevalencias superiores al 50% (Contreras et al., 2000; Rivera et al., 2001; Aguilar et al, 2006; Stahl et al., 2008). A pesar de la importancia socio-economica del ganado bovino de las zonas andinas y la carencia de restricciones con la DVB para el movimiento interno de los bovinos en el pais, existe escasa informacion sobre la prevalencia de la infeccion en valles interandinos y zonas altoandinas en donde actualmente existe un creciente interes en el desarrollo de la industria lechera. El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia del virus de la diarrea viral en bovinos criollos de los nueve distritos de la provincia de Melgar, Puno.

MATERIALES Y METODOS

Lugar de Estudio

La provincia de Melgar esta ubicada al noreste de la region de Puno, a una altitud de 3,900 a 4,400 msnm. La ganaderia es de tipo mixto con predominancia de bovinos y ovinos, aunque en algunos distritos se tiene camelidos sudamericanos. Los hatos bovinos estan constituidos por animales criollos y mejorados con Brown Swiss bajo un sistema de crianza extensivo con pastos naturales y cultivados.

El presente estudio se realizo en bovinos de 70 productores de los distritos de Nunoa (n=8), Orurillo (n=5), Umachiri (n=9), Santa Rosa (n=10), Macari (n=12), Antauta (n=14), Llalli (n=8) y Cupi (n=4) de la provincia de Melgar, Puno.

Tamano Muestral

El tamano de muestra fue determinado mediante el metodo no parametrico de muestreo simple al azar estratificado, considerando una prevalencia de 65% (Manrique y Teran, 2002) con un nivel de confianza de 95% y una precision de 5% (Daniel 1996). Se trabajo con 347 muestras de bovinos hembras y machos mayores a 6 meses, las que fueron estratificadas de acuerdo a la poblacion de cada distrito (Cuadro 1). Para el analisis estadistico, las muestras fueron agrupadas en un grupo etareo de 6 meses a 2 anos y otro grupo mayor de dos anos.

Coleccion de Muestras

Las muestras de sangre se obtuvieron por puncion de la arteria coccigea o de la vena yugular. En el muestreo se utilizo el Formato de Vigilancia Activa del Servicio Nacional de Sanidad Agraria (SENASA) para registrar el productor, ubicacion del predio, estado sanitario del hato, numero de los animales muestreados, etc. Los sueros obtenidos fueron trasvasados en viales y transportados al Laboratorio de Virologia de la Facultad de Medicina Veterinaria (FMV) de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM), Lima.

Deteccion de Anticuerpos

La deteccion y titulacion de los anticuerpos contra el VDVB se realizo mediante la tecnica de neutralizacion viral utilizando como antigeno la cepa Singer, prototipo del biotipo cp y genotipo 1, del VDVB con un titulo de 10-5DI50cc/50 y monocapas celulares de cornete nasal de feto de bovino preparados en el Laboratorio de Virologia de la FMV-UNMSM, como un sistema indicador y segun el protocolo disponible en el Laboratorio de Virologia (Rivera et al., 2002). Un suero fue considerado positivo a anticuerpos contra el VDVB cuando fue capaz de neutralizar el 100% de la capacidad infectante del virus en la monocapa celular (sin efecto citopatico) y negativo a anticuerpos cuando no neutralizo el 100% de la capacidad infectante del virus en la monocapa celular (con efecto citopatico). La prevalencia viral fue expresada en forma porcentual y con los intervalos de confianza del 95%.

Deteccion de Animales Portadores

La deteccion de animales portadores (PI) se realizo en animales entre seis meses y dos anos de edad por ser el grupo de riesgo, mediante el kit comercial de ELISA de captura (IDEXX, USA).

RESULTADOS

El 47.8 [+ or -] 0.1% (166/347) de muestras tuvieron anticuerpos neutralizantes contra el VDVB. Se encontro animales seroreactores en todos los distritos (Cuadro 1). No se detectaron animales PI. La prevalencia viral en animales de hasta dos anos fue de 36.6% (56/153) y la de animales mayores de dos anos fue de 56.7% (110/194). El analisis mediante Chi Cuadrado indico que hubo diferencia estadistica (p<0.05). La distribucion de los titulos de anticuerpos contra el VDVB se muestra en el Cuadro 2.

Los datos consignados en el Formato de Vigilancia Activa del SENASA indicaron que 35 animales tuvieron historia de abortos y repeticiones del celo pero solo 22 de ellos (34.3%) presentaron anticuerpos contra el VDVB.

DISCUSION

La presencia de anticuerpos contra el VDVB en el 47.8 [+ or -] 0.1% de los animales muestreados sin historia de vacunacion en la provincia de Melgar indica exposicion de los animales al virus de campo; asi mismo, los resultados indicaron que el virus se encuentra en al ganado bovino de todos los distritos de la provincia (Cuadro 1). La seroporevalencia viral fue mayor en animales de mas de dos anos lo que podria indicar la persistencia de los anticuerpos en el animal o posibilidades de reinfecciones por el VDVB.

La presencia del virus en esta zona altoandina podria deberse a la introduccion de reproductores y al movimiento irrestricto de los animales dentro de la zona. Otro factor de importancia corresponde a las ferias ganaderas donde concurren animales de todo tipo, edad y condicion sanitaria constituyendo un potencial fuente de contagio; ya que en estas ferias se realiza la compra-venta de animales, no solo para el consumo sino tambien para crianza, de modo que son llevados a las respectivas zonas de crianza constituyendo un riesgo para los demas animales del hato o rebano.

Cuando el virus ingresa a un hato de crianza extensiva o semiextensiva constituido por pocos animales, usualmente todos se infectan, con o sin consecuencias clinicas como abortos, nacimiento de terneros PI, etc., pero seroconvierten y quedan protegidos contra reinfecciones, siendo la infeccion en estos casos autolimitante (Stahl et al., 2008); a diferencia del sistema de crianza intensivo como en la cuenca lechera de Lima, donde, el virus persiste en el hato a menos que se establezca un adecuado sistema de control y bioseguridad (Aguilar et al., 2006).

En estudios realizados en bovinos criollos de Ayacucho (Rivera et al., 2001) y Cusco (Alvarez et al., 2002; Cabello et al., 2006) se encontro prevalencias superiores a 70%. Al parecer los animales criollos son altamente susceptibles, posiblemente debido al estres por fallas nutricionales e infecciones parasitarias, pero los efectos del virus podrian pasar desapercibidos o ser confundidos con otros problemas sanitarios. El VEF, que afecta mayormente al ovino, puede afectar al bovino si comparten pasturas o corrales, como el caso de animales en la provincia de Melgar, y los anticuerpos no pueden ser discriminados en el laboratorio por la relacion antigenica entre ambos virus.

La seroprevalencia viral tuvo un rango de 15.8 a 94.1 (Cuadro 1). Los criadores de los distritos de Cupi, Llalli, Santa Rosa, Macari y Umachiri, donde se detecto el mayor numero de animales seropositivos, adquieren reproductores en las ferias ganaderas de la region, aunque tambien utilizan la inseminacion artificial para mejorar la calidad genetica de su ganado. El uso de tecnologia moderna como la inseminacion artificial tiene ventajas, pues enfermedades como la campylobacteriosis y trichomoniasis, cuyos agentes causales son transmitidos durante la monta, pueden ser eliminados; pero tambien a traves de esta tecnologia se puede transmitir enfermedades virales como el VDVB si el semen proviene de toros que no son libres del virus. Por otro lado, los animales del distrito de Antauta presentaron la menor prevalencia del VDVB (15.8 [+ or -] 0.16) ya que en el distrito predomina la crianza ovina. La baja prevalencia viral en estos animales sugiere que la infeccion es mayormente por el VDVB y la transmision interespecie de VEF a bovinos no es frecuente en este distrito.

Algunos criadores manifestaron durante el muestreo la ocurrencia de problemas respiratorios (sobre todo en terneros) y reproductivos como una alta frecuencia de retorno al celo; sin embargo, solo un tercio de estos animales tuvieron anticuerpos contra el VDVB. Como los criadores no llevan un registro de la historia de sus animales es dificil asociar el problema reproductivo al VDVB, pero tampoco deberia descartarse el efecto del VDVB, sobre todo cuando el virus ingresa por primera vez al hato (McGowan y Kirkland, 1995); sin embargo, es posible que el VDVB, por su efecto inmunodepresor, sea un componente del complejo respiratorio que se observa en los terneros (Brownlie, 1991; Rivera et al, 1994; Brodersen y Kelling, 1998; Rivera, 2001).

Los titulos de anticuerpos neutralizantes estuvieron en el rango de 2 a >256 (Cuadro 2). En un mismo hato se detectaron diversos niveles de anticuerpos y tambien animales sin anticuerpos. Los perfiles de anticuerpos, denominados de modo arbitrario como titulos bajos (2-8) intermedios (16-64) y altos (128>256) indican actividad viral en los animales de la zona debido a factores diversos como el estres, ingreso de animales infectados, transmision interespecie e incluso la presencia de animales PI. Cuando el VDVB ingresa a un hato susceptible, puede ocasionar una infeccion aguda, moderada o de tipo subclinica, pero los animales desarrollan una solida inmunidad humoral en una a tres semanas post infeccion alcanzando niveles altos de anticuerpos en 10-12 semanas, hasta alcanzar una meseta que perdura mucho tiempo antes de desaparecer lentamente (Fredriksen et al., 1999). El 39 y 42% de los animales seropositivos tuvieron titulos entre 16 a 64 y entre 128->256, respectivamente (Cuadro 2), sugiriendo que podrian corresponder a infecciones recientes o a la meseta de anticuerpos.

El mayor numero de animales seropositivos del presente estudio tuvo titulos similares a un reporte de Parinacochas, Ayacucho (Rivera et al., 2001). Se indica que cuando las prevalencias del VDVB son superiores a 70% hay la posibilidad de tener animales PI (Houe, 1995, 2003). Este concepto ha sido demostrado en hatos pequenos de crianza semi-intensivo (Rivera et al, 2002; Huaman et al., 2007). En el presente estudio no se detectaron animales PI, posiblemente porque estos animales, en caso de aparecer, moririan tempranamente por problemas respiratorios o gastrointestinales.

LITERATURA CITADA

1. Alvarez S, Rivera H, Pezo D, Garcia W. 2002. Deteccion de anticuerpos contra pestivirus en rumiantes de una comunidad campesina de la provincia de Canchis-Cusco. Rev Inv Vet, Peru 13(1): 46-51.

2. Aguilar R, Benito A, Rivera H. 2006. Seroprevalencia del virus de la diarrea viral bovina en ganado lechero de crianza intensiva del valle de Lima. Rev Inv Vet, Peru 17: 148-153.

3. Baker JC. 1995. The clinical manifestations of bovine viral diarrhea infection. Vet Clin N Am: Food Anim Pract 11: 425-445.

4. Brodersen BW, Kelling CL. 1998. Effect of concurrent experimentally induced bovine respiratory syncytial virus and bovine viral diarrhea virus infections on respiratory tract and enteric diseases in calves. Am J Vet Res 59: 1423-1430.

5. Brownlie J. 1991. The pathways for bovine virus diarrhea virus biotypes in the pathogenesis of disease. Arch Virol 3 (Suppl): 79-96.

6. Brownlie J, Hooper LB, Thompson I, Collins ME. 1998. Maternal recognition of fetal infection with bovine virus diarrhea virus (BVDV) - the bovine pestivirus. Clin Diagn Virol 10: 141-150.

7. Cabello K, Quipe R, Rivera H. 2006. Frecuencia de los virus Parainfluenza 3, respiratorio sincitial, y diarrea viral bovina en un rebano mixto de una comunidad campesina de Cusco. Rev Inv Vet, Peru 17(2): 167-172.

8. Contreras G, Stahl K, Arana C, Rivera H. 2000. Anticuerpos contra el virus de la Diarrea Viral Bovina en muestras de leche de bovinos del valle de Mantaro (Jauja, Concepcion y Huancayo). Rev Inv Vet, Peru 11(1): 1-10.

9. Daniel WW. 1996. Bioestadistica: base para el analisis de las ciencias de la salud. 5ta ed. Mexico DF: Ed. Limusa. 878 p.

10. Fredriksen B, Sandvick T, Loken T, Odegard SA. 1999. Level and duration antibodies in cattle infected experimentally and naturally with bovine virus diarrhea virus. Vet Rec 144: 111114.

11. Houe H. 1995. Epidemiology of bovine viral diarrhea virus. Vet Clin N Am: Food Anim Pract 11(3): 521-547.

12. Houe H. 1999. Epidemiological features and economical importance of bovine viral diarrhoea virus (BVDV) infections. Vet Microbiol 64: 89-107.

13. Houe H. 2003. Economic impact of BVDV infection in dairies. Biologicals 31: 137-143.

14. Huaman JC, Rivera H, Arainga R, Gavidia C, Manchego A. 2007. Diarrea viral bovina y animales portadores del virus en hatos productores de leche de la irrigacion de Majes, Arequipa. Rev Inv Vet, Peru 18: 141-149.

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20. Rivera H, Valdivia L, Benito A. 2001. Diarrea viral en bovinos lecheros de crianza semi extensiva de la Provincia de Parinacochas, Ayacucho. Rev Inv Vet, Peru (Supl 1): 380-381.

21. Stahl H, Lindberg A, Rivera H, Ortiz

C, Moreno-Lopez J. 2008. Self clearance from BVDV infections- A frequent finding in dairy herds in an endemically infected region in Peru. Prev Vet Med 83: 285-296.

22. Wengler G. 1991. Family Flaviviridae. Arch Virol (Suppl) 2: 228-229.

Richard Quispe Q. (1), Alberto Ccama S. (2), Hermelinda Rivera G. (1,3) y Mariluz Arainga R. (1)

(1) Laboratorio de Microbiologia y Parasitologia Veterinaria, Facultad de Medicina Veterinaria, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima

(2) Universidad Nacional del Altiplano, Puno

(3) E-mail: hriverag2005@yahoo.es
Cuadro 1. Seroprevalencia del virus de la diarrea viral bovina
(VDVB) en bovinos mayores de seis meses de los nueve distritos
de la provincia de Melgar, Puno

                                        Animales con
                                     anticuerpos contra
             Poblacion    Muestras         VDVB
Distritos    bovina (n)     (n)
                                     No.   % ? IC (1)

Nunoa          17,300        66       19   29.0 ? 0.1
Orurillo       13,950        53       16   30.0 ? 0.1
Umachiri       12,780        48       25   52.0 ? 0.1
Ayaviri        12,560        47       19   40.4 ? 0.1
Santa Rosa     10,610        40       28   70.0 ? 0.1
Macari         10,030        38       25   66.0 ? 0.2
Antauta         5,090        19        3   15.8 ? 0.2
Llalli          5,080        19       15   79.0 ? 0.2
Cupi            4,310        17       16   94.1 ? 0.1
Total          91,710       347      166   47.8 ? 0.1

(1) Intervalo de Confianza del 95%

Cuadro 2. Distribucion de los titulos de anticuerpos contra
el virus de la diarrea viral (VDVB) en bovinos mayores de
seis meses de los nueve distritos de la provincia de Melgar, Puno

                 Titulo de anticuerpos contra el VDVB
Distritos              (inversa de la dilucion)

              2-8   16-64   128->256   Total de positivos

Nunoa          6      8         5              19
Orurillo       5      9         2              16
Umachiri       8     16         1              25
Ayaviri        1      7        11              19
Santa Rosa     6      5        17              28
Macari         2      9        14              25
Antauta        0      0         3               3
Llalli         2      5         8              15
Cupi           1      6         9              16
Total         31     65        70             166
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Author:Quispe Q., Richard; Ccama S., Alberto; Rivera G., Hermelinda; Arainga R., Mariluz
Publication:Revista de Investigaciones Veterinarias del Peru (RIVEP)
Date:Jul 1, 2008
Words:3005
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