Printer Friendly

ESTANDARIZACION DE LA ACETOLISIS DE ERDTMAN (1969) PARA EL ANALISIS PALINOLOGICO DE MUESTRAS FECALES DE MURCIELAGOS POLINIZADORES (Phyllostomidae: Glossophaginae-Lonchophyllinae).

STANDARDIZATION OF ERDTMAN ACETOLYSIS (1969) FOR THE PALINOLOGICAL ANALYSIS OF FECAL SAMPLES OF POLLINATING BATS (Phyllostomidae: Glossophaginae-Lonchophyllinae).

1. Introduccion

Se ha documentado ampliamente que los murcielagos Polinivoros-nectarivoros son uno de los grupos polinizadores con mayor eficacia por encima de otros visitantes florales, favoreciendo una mayor produccion de frutos, especialmente de plantas que florecen en horas crepusculares (Fleming & Muchhala, 2008). El proceso mutualista murcielago-planta es denominado "Quiropterofllia" el cual es un fenomeno gasto-beneficio, donde las plantas exhiben sus flores para atraer a los murcielagos por rasgos que han coevolucionado con la polinizacion nocturna (Bawa, 1990), caracteristicas por las cuales los murcielagos son atraidos y permite de esta manera ejercer la funcion de vectores de polen en este proceso, adquiriendo como beneficios del nectar azucares y del polen aminoacidos, proteinas y lipidos (Amorim, Galetto & Sazima, 2013; Proctor, Peter & Lack, 1997).

Para la evaluacion de las interacciones quiropterofilicas se han empleado diferentes tecnicas como la extraccion de polen directamente del pelaje con cubos de glicero-gelatina (Muchhala & Jarrin, 2002) y la separacion de granos de polen con el uso de un pincel y el montaje directo con glicerina (Singaravelan & Marimuthu, 2004), las tecnicas anteriores se emplean comunmente para estudios de coevolucion e interpretacion del uso de regiones del craneo de los murcielagos para la polinizacion, sin embargo, para evaluar la eficiencia del polinizador se sugieren tecnicas quimicas, a razon de que la cantidad de polen encontrado en el pelo no hace referencia a que el murcielago sea polinizador potencial, debido a que los murcielagos polinizadores tienen actividades de visitante floral ocasional pero no permanente en algunas plantas (Bawa, 1990), por lo tanto, la colecta de muestras fecales de murcielagos polinizadores se hace necesario para evaluar esta interaccion. Otro motivo por el cual se considera buena la aplicacion de tecnicas quimicas, es que con el uso de estas, los granos de polen se pueden visualizar al microscopio con mayor facilidad y asi obtener la determinacion taxonomica con mayor precision. Las tecnicas quimicas permiten la eliminacion del protoplasma y la degradacion de las paredes del grano de polen para visualizar la geometria de los mismos para la determinacion taxonomica (Fonnegra, 2005), lo cual no es tan sencillo cuando se hace con la tecnica de montaje y observacion al natural en la que no se aplica ningun tratamiento.

Existen dos tipos de tecnicas quimicas usadas en el analisis del polen: Las altamente corrosivas (acetolisis) y las levemente corrosivas (KOH). Para el caso del procesamiento de muestras fecales o estomacales con contenidos polinicos, se ha recomendado el (KOH) para evitar la destruccion de los granos de polen por exceso de corrosividad, debido a que los granos al pasar por el tracto digestivo se ven sometidos a acidos gastricos destruyendo las paredes, por lo tanto, se hace necesario tecnicas que no destruyan mas los granos de polen (Mercado & Perez, 2013). otra tecnica empleada es la acetolisis de Erdtman (1969), considerada altamente corrosiva y por lo general es muy empleada en los estudios paleopalinologicos y palinotaxonomicos; esta tecnica es muy efectiva debido a que facilita la degradacion de la intina y el protoplasma del grano de polen; permaneciendo solamente la pared externa de esporopolenina (exina). Con esta tecnica, dicha pared se vuelve transparente, permite el paso de la luz, facilitando la observacion de los detalles de estructura y escultura de la misma (Fonnegra, 2005). La mayoria de los granos de polen poseen exina gruesa, por lo que la aplicacion de la tecnica de procesamiento adecuada, favorece una mejor observacion y analisis de la muestra polinica por lo tanto. El presente trabajo pretende comparar y describir los diferentes metodos para el analisis palinologico, para asi definir la metodologia mas apropiada para muestras de polen asociadas a condiciones y caracteristicas de muestras fecales y estomacales de murcielagos polinizadores.

2. Metodologia

2.1. Colecta material Polinico

Para realizar la evaluacion y comparaciones de las diferentes tecnicas palinologicas procedentes de murcielagos, tambien se colecto material polinico directamente de plantas que comunmente son polinizadas por murcielagos como lo fueron, Ochroma pyramidale (Kays et al., 2012; Heithaus, Fleming & Opler, 1975; Knudsen & Tollsten, 1995) y Bauhinia variegata (Heithaus, Opler & Baker, 1974; Lemke, 1985; Ramirez et al., 1984; Sosa & Soriano, 1996), cuyas flores fueron almacenadas en tubos falcon con alcohol al 70% para asi proceder con la fase de laboratorio.

2.2. Procesamiento de las muestras de polen

Con el material de polen recolectado se procedio a realizar las tecnicas de montaje al natural (Muchhala & Jarrin, 2002; Singaravelan & Marimuthu, 2004), tecnica de KOH (Mercado & Perez, 2013), acetolisis de Erdtman (1969) y estandarizacion del metodo de acetolisis propuesto por los autores. Estas dos ultimas tecnicas consisten en una hidrolisis acida del material polinico, con la cual se degrada la intina y el protoplasma del grano del polen; solamente permanece la pared externa de esporopolenina (Fonnegra, 2005). La estandarizacion de la acetolisis propuesta aqui, se aplico a muestras fecales e intestinales provenientes de los murcielagos, Glossophaga soricina y Glossophaga longirostris, los cuales fueron capturados en el bosque seco tropical del departamento del Tolima - Colombia (Gonzalez et al., 2015). A continuacion se describe la metodologia.

1. La materia fecal, muestra intestinal o granos de polen extraidos del pelaje de murcielagos polinizadores se revisan cuidadosamente usando pinzas, para separarlo de semillas o restos vegetales; seguidamente el material polinico es conservado en alcohol al 70% para proceder con la fase de laboratorio.

2. Cada muestra debe ser trasvasada a un tubo falcon (10ml) al cual se le debe agregar tres mililitros de acido acetico glacial por muestra durante 30 min, pasado el tiempo se centrifugara durante tres minutos a 3000 rpm y posteriormente se debe decantar.

3. Al material resultante, se le anade tres mililitros de mezcla acetolitica (1:9 acido sulfurico - anhidrido acetico) y se lleva a bano de maria durante dos a tres minutos, agitandolo con una varilla de vidrio de manera precavida, seguidamente se centrifuga por 3 minutos a 3000 rpm y finalmente se decanta.

4. La muestra se lava con tres mililitros de acido acetico glacial se agita y se centrifuga a 3000 rpm durante tres minutos y se decanta.

5. El material polinico se lava con tres mililitros de alcohol al 70% a 3000 rpm, repitiendo el procedimiento dos veces mas con alcoholes al 95% y 97%.

6. Los tubos falcon con las muestras de polen, se ubican en una gradilla en posicion vertical, posteriormente se hace el montaje de cada muestra de forma semipermanente utilizando el metodo glicerogelatina fucsinada, posteriormente las muestras pueden observarse al microscopio.

Para la conservacion y montaje semipermanente de los granos de polen procedentes de muestras zoologicas, se sugiere hacer uso de la metodologia del montaje Glicerogelatina-Fucsina (Kisser, 1935; citado por (Erdtman & Sorsa, 1971) por lo que se menciona la metodologia de preparacion:

Con el uso de una plancha de calor con agitador magnetico se calientan 42 ml de agua destilada, se le anaden siete gramos de gelatina sin sabor comercial, 50 ml de glicerina y 20 ml de fucsina basica de ziehl, hasta conseguir una solucion homogenea, posteriormente se deja solidificar a temperatura ambiente (Fonnegra 2005). Este metodo se emplea para conservar de forma semipermanente las muestras polinicas, adicionalmente el polen adquiere una coloracion que permite la mejor observacion de sus caracteristicas morfologicas (ornamentacion, grosor de la exina y aperturas).

Se obtuvieron registros fotograficos para facilitar la comparacion de los resultados de cada tecnica. Para evaluar la eficacia de cada una, se valoraron algunos aspectos cualitativos en la nitidez de la morfologia de los granos de polen, teniendo en cuenta caracteristicas como: ornamentacion, contorno exina, limpieza, traspaso de la luz a traves de las paredes y observacion de las aperturas (Fig. 1). Estas caracteristicas fueron clasificadas como positivas o negativas, debido a que son las que se observan comunmente para la determinacion taxonomica (Fonnegra, 2005).

3. RESULTADOS

3.1. Comparacion de las tecnicas palinologicas

Con el uso de los registros fotograficos se realizo la comparacion de las metodologias para el analisis de muestras procedentes de murcielagos polinizadores teniendo en cuenta el grosor de la exina, ornamentacion, limpieza de la exina traspaso de la luz y observacion de aperturas (Tabla 3), se observo que la Acetolisis de Erdtman (1969) y la estandarizacion de la Acetolisis (Autores), fueron las tecnicas con mejor nitidez, debido a que se observa mucha entrada de luz, se ve con mucha claridad las capas de la exina, la ornamentacion baculada para Bahuinia variegata y reticulada para Ochroma pyramidale con facil percepcion, en cuanto a las otras tecnicas como KOH (Mercado & Perez, 2013) se observaron las caracteristicas deseadas, sin embargo, se evidencia la poca eliminacion del contenido protoplasmatico permitiendo poca entrada de luz y a su vez no se eliminan los residuos presentes en la exina del polen, al igual que para el montaje al natural aunque con mayor opacidad y mayor cantidad de contenido protoplasmatico, que no permite una observacion clara ni deseada del material polinico.

4. DISCUSION

4.1. Tecnicas no corrosivas

El montaje al natural es una tecnica que se considera obsoleta desde la aparicion de la tecnica de acetolisis, es comunmente empleada para el montaje de granos de polen frescos extraidos directamente de las flores o en algunos casos en los montajes de muestras aeropalinologicas, sin embargo, no es un metodo muy adecuado cuando los granos de polen son de exina muy gruesa, debido a que no se produce la poca limpieza de las paredes del polen, lo cual dificulta la observacion de los caracteres de los granos de polen, por lo tanto, siempre se recomienda el uso de tecnicas quimicas para el montaje de muestras de polen (Erdtman, 1969) ya sean para el analisis palinologico de muestras botanicas o para el recolectado de polinizadores.

La tecnica de KOH comunmente empleada para muestras de granos de polen fosiles (Van der Hammen, Noldus, & Salazar, 2003; Ibarra-Morales & Fernandez-Galan, 2012), es una herramienta muy apropiada para muestras de polen que han sido sometidas a una alta exposicion al medio ambiente, que hace que sus paredes se vuelvan fragiles, como ocurre con las muestras de polen sedimentadas (palinomorfos), por ello , para el analisis de este tipo de muestra se recomienda procedimientos menos fuerte como la tecnica de KOH, la cual no elimina completamente la intina ni el contenido celular, lo que hace dificil la observacion de los detalles de estructura y escultura de la pared (Fonnegra, 2005), no obstante, se ha considerado que la tecnica KOH es la mas apropiada para el analisis palinologico en vertebrados debido a que evita que los granos de polen sean sometidos a sustancias quimicas fuertes como el acido sulfurico y el anhidrido acetico, que pueden destruir los granos de polen de exina delgada (Mercado & Perez, 2013). Pero, pese a que estos autores prescinden de esta tecnica por temor a la destruccion del grano de polen por la accion corrosiva, se requeriria de una manipulacion desmedida para que esto ocurriese, ya que segun Anero et al., (2008) la exina es la capa mas externa y mas resistente de la pared del grano de polen, su resistencia a la destruccion es una de las mayores del reino vegetal, ya que soporta laaccion de los acidos y bases concentradas, asi como el calentamiento hasta 300[grados]C, siendo unicamente alterada por algunos oxidantes y por ciertos microorganismos.

Ademas, las muestras fecales de murcielagos contienen granos de polen frescos extraidos directamente de la planta por el murcielago y probablemente la accion de los jugos gastricos, mas que destruir las paredes (intina y exina), ayudan en la limpieza de las mismas, consecuentemente se hace necesario de una tecnica mas corrosiva que la que ejerce el KOH, para adelgazar las paredes y visualizar mejor las caracteristicas morfologicas que permiten determinar taxonomicamente el tipo polinico estudiado.

4.2. Tecnicas Corrosivas

La acetolisis de Erdtman es la tecnica mas empleada para el aislamiento y preparacion de los granos de polen extraidos directamente de las plantas (Fernandez-Pacella, 2014; Rocha Estrada et al., 2014) y de muestras fecales de vertebrados (Maguina, Amanzo & Huaman, 2012; Vallejo, 2014; Amaya-Marquez, Stiles & Rangel-Ch, 2001) para la visualizacion con mayor efectividad, debido a que se emplean acidos altamente corrosivos como el acido acetico glacial puro, acido sulfurico puro y anhidrido acetico puro, que permiten la eliminacion de estructuras que impiden ver las estructuras de interes (Forma del grano, ornamentacion, aperturas y grosor de la exina) para la determinacion taxonomica convencional de los granos de polen (Fonnegra, 2005), de esta manera, se sugiere la presente tecnica como herramienta practica y precisa para el procesamiento de los granos de polen provenientes de la dieta de murcielagos polinivoros (Glossophaginae y Lonchophyllinae), debido que esta estandarizacion de la tecnica del acetolisis de Erdtman (1969) solamente se ha empleado con murcielagos (Gonzalez et al., 2015) con las condiciones ambientales ofrecidas por el tracto digestivo de estos organismos, haciendo de esta tecnica apropiada para evitar la degradacion total intina y adelgazamiento de la exina de los granos de polen, lo que facilita la visualizacion de las caracteristicas de los granos de polen.

4.3. Ventajas y desventajas del uso de las tecnicas.

4.3.1. KOH (Mercado & Perez, 2013).

Esta tecnica considerada apropiada para el analisis palinologico de muestras sedimentadas y muestras fecales de vertebrados, requiere de la ejecucion de por lo menos 9 procedimientos y mas de un dia para su procesamiento, con la ventaja de que utiliza menor cantidad de sustancias quimicas por lo que resulta mas economica que las demas metodologias usadas para el analisis palinologico, no obstante, esta tecnica se hace tediosa debido a que cuenta con pasos que ralentizan el proceso, como lo es la verificacion continua del estado de limpieza de los granos, esto hace repetir pasos ya realizados y aumentar el tiempo de la metodologia, ademas, las muestras son reenvasadas y filtradas, lo cual podria generar contaminacion o perdida de material polinico; finalmente, en esta metodologia se emplea un horno durante 12 horas que hace aun mas largo el tiempo para el procesamiento palinologico. No obstante, existen ventajas con esta tecnica al compararla con la metodologia de montaje al natural, ya que la pared sufre un leve adelgazamiento y la eliminacion de particulas adheridas a la exina, esto permite el paso de la luz y la mejor observacion de los caracteres del grano del polen.

La acetolisis es la metodologia mas utilizada para el analisis del polen actual o fosil, sin embargo, tambien ha sido utilizada apropiadamente para muestras de polen procedentes heces fecales de vertebrados, logrando optimos resultados en cuanto a la nitidez y limpieza de la exina, lo que facilita la determinacion taxonomica del material polinico. No obstante, esta tecnica presenta desventajas por el largo tiempo requerido para la preparacion de las muestras durante cada procedimiento, debido a que las muestras deben estar durante aproximadamente 24 horas en acido acetico glacial, para limpiar y evitar arrugamiento de los granos de polen. Adicionalmente, esta metodologia implica la ejecucion de por lo menos doce procedimientos lo que hace mucho mas extenso el tiempo requerido para procesar el material polinico. Sin embargo esta tecnica altamente corrosiva, destruye totalmente la intina y el contenido protoplasmatico del grano de polen, y en consecuencia, la nitidez obtenida por la alta limpieza y la entrada de luz facilitan en gran medida la determinacion taxonomica de los granos de polen.

4.3.3. Estandarizacion de la acetolisis (Autores).

Esta nueva metodologia propuesta para el analisis palinologico de muestras procedentes de heces fecales e intestinales de murcielagos, se constituye en una herramienta muy adecuada para el procesamiento, determinacion taxonomica de los granos de polen y el entendimiento de las interacciones murcielago nectarivoro-planta. Esta tecnica se realiza en seis procedimientos; la manipulacion de cuatro muestras tarda en promedio una hora y se aplican dos banos de acido acetico glacial asegurando muy poca exposicion y una limpieza profunda del polen, al usar varios ciclos de centrifugado. Se hace una eliminacion total del acido corrosivo con ayuda de banos de alcoholes, requiere de menor volumen de acidos y con ella se obtiene mayor nitidez del polen, facilitando la descripcion e identificacion taxonomica del mismo. Teniendo en cuenta lo anterior, consideramos que es la tecnica mas apropiada para el analisis palinologico de muestras fecales, intestinales o incluso de muestras encontradas en el pelaje de murcielagos nectarivoros.

5. Conclusiones

El analisis de las tecnicas empleadas para el procesamiento del polen de muestras fecales y frescas permite concluir que:

* La tecnica de estandarizacion de la acetolisis propuesta los autores, es una tecnica apropiada para el procesamiento de muestras fecales de murcielagos polinivoros, debido a que es el procedimiento mas rapido y eficaz que facilita la visualizacion de la morfologia y estructura de los granos de polen.

* La exina de los granos de polen resisten sustancias altamente corrosivas sin que ocurra la destruccion de dicha pared, por el contrario, la accion de dichas sustancia mejora la apariencia de las caracteristicas del grano de polen que son utiles para la determinacion taxonomica.

Bibliografia

Amaya-Marquez, M., Stiles, G., & Rangel-Ch, O. (2001). Interaccion planta-colibri en Amacayacu (Amazonas, Colombia): una perspectiva palinologica. Caldasia, 23(1), 301-322.

Amorim, F. W., Galetto, L., & Sazima, M. (2013). Beyond the pollination syndrome: Nectar ecology and the role of diurnal and nocturnal pollinators in the reproductive success of Inga sessilis (Fabaceae). Plant Biology, 15(2), 317-327. https://doi.org/10.1111/j.1438-8677.2012.00643.x

Anero Bartolome, M. T., Carabias Martin, F., Cordon Marcos, C., Cuesta Herranz, C., De Castro Alfageme, S., De Miguel de Pedro, R., ... Villanueva Estebanez, J. M. (2008). Aerobiologia y polinosis en Castilla y Leon. Valladolid : Junta de Castilla y Leon: Junta de Castilla y Leon. Retrieved from https://books.google.com.co/books?id = PVW_XwAACAAJ

Bawa, K. (1990). Plant-pollinator interactions in tropical rain forests. Annual Review of Ecology and Systematics, 21(1), 399-422. https://doi.org/10.3732/ajb.0800114

Erdtman, G. (1969). An introduction to the study of pollen grains and spores. (Hafner, Ed.). Scandinavian university books.

Erdtman, G., & Sorsa, P. (1971). Pollen and Spore Morphology, Plant Taxonomy: Pteridophyta. Almqvist & Wiksell. Retrieved from https://books.google.com.co/books?id=qUkYPwAACAAJ

Fernandez-Pacella, L. (2014). Morfologia polinica de especies del genero Senna (Fabaceae) del Sureste del Ibera, Corrientes, Argentina. Rev Biol Trop, 769-782.

Fleming, T. H., & Muchhala, N. (2008). Nectar-feeding bird and bat niches in two worlds: Pantropical comparisons of vertebrate pollination systems. Journal of Biogeography. https://doi.org/10.1111/j.1365-2699.2007.01833.x

Fonnegra, R. (2005). Introduccion a la palinologia: metodos de estudio palinologico. medellin: Universidad de antioquia, facultad de ciencias exactas y naturales, departamento de biologia.

Gonzalez, K., Herrera, L., Ramirez, A., & Reinoso, G. (2015). Dieta de la quiropterofauna (subfamilia Glossophaginae) en un fragmento de bosque seco tropical en el municipio de Ambalema - Tolima. Universidad del Tolima.

Heithaus, E. R., Fleming, T. H., & Opler, P. A. (1975). Foraging patterns and resource utilization in seven species of bats in a seasonal tropical forest. Ecology, 56(4), 841-854.

Heithaus, E. R., Opler, P. A., & Baker, H. G. (1974). Bat Activity and Pollination of Bauhinia Pauletia : Plant-Pollinator Coevolution. Ecology, 55(2), 412-419. https://doi.org/10.2307/1935229

Ibarra-Morales, E., & Fernandez-Galan, B. S. (2012). El estudio del polen antiguo: problemas y estrategias en el laboratorio. TIP. Revista Especializada En Ciencias Quimico-Biologicas, 15(1), 62-66.

Kays, R., Rodriguez, M. E., Valencia, L. M., Horan, R., Smith, A. R., & Ziegler, C. (2012). Animal visitation and pollination of flowering balsa trees (Ochroma pyramidale) in Panama. Mesoamericana, 16, 53-68.

Knudsen, J. T., & Tollsten, L. (1995). Floral scent in bat? pollinated plants: a case of convergent evolution. Botanical Journal of the Linnean Society, 119(1), 45-57. https://doi.org/10.1111/j.1095-8339.1995.tb00728.x

Lemke, T. O. (1985). Pollen Carrying by the Nectar-Feeding Bat Glossophaga soricina in a Suburban Environment. Biotropica, 17(2), 107-111. https://doi.org/10.2307/2388502

Maguina, R., Amanzo, J., & Huaman, L. (2012). Dieta de murcielagos filostomidos del valle de Kosnipata, San Pedro, Cusco -Peru Diet of phyllostomid bats of Kosnipata Valley. Cusco -Peru Rev. Peru. Biol. Rev. Peru. Biol, 19(192), 159-166.

Mercado, J., & Perez, A. (2013). Una nueva metodologia para el analisis palinologico de muestras coprologicas en vertebrados polinizadores. Rev. Colombiana Cienc. Anim., 5(1), 165-170.

Muchhala, N., & Jarrin-V, P. (2002). Flower Visitation by Bats in Cloud Forests of Western Ecuador. Biotropica, 34(3), 387-395. https://doi.org/10.1111/j.1744-7429.2002.tb00552.x

Proctor, M., Peter, Y., & Lack, A. (1997). The Natural History of Pollination . HarperCollins Publishers. Porland Oregon. https://doi.org/10.3366/anh.1997.24.2.307

Ramirez, N., Sobrevila, C., De Enrech, N. X., & Ruiz-Zapata, T. (1984). Floral biology and breeding system of Bauhinia benthamiana Taub. (Leguminosae), a bat-pollinated tree in Venezuelan llanos'. American Journal of Botany. https://doi.org/10.2307/2443756

Rocha Estrada, A., Alvarado Vazquez, M. A., Garcia Sanchez, J. E., Lucio, G., Antonio, M., Hernandez Pinero, J. L., & Foroughbakhch Pournavab, R. (2014). Caracterizacion palinologica de las especies de oregano de los generos Lippia (Verbenaceae) y Poliomintha (Lamiaceae) de Nuevo Leon. Ciencia UANL, 17(68), 49-56.

Singaravelan, N., & Marimuthu, G. (2004). Nectar Feeding and Pollen Carrying from Ceiba pentandra by Pteropodid Bats. Journal of Mammalogy, 85(1), 1-7. https://doi.org/10.1644/1545-1542(2004)085<0001:NFAPCF>2.0.C0;2

Sosa, M., & Soriano, P. J. (1996). Resource availability, diet and reproduction in Glossophaga longirostris (Mammalia: Chiroptera) in an arid zone of the Venezuelan Andes. Journal of Tropical Ecology, 12(6), 805-818. https://doi.org/10.1017/S0266467400010063

Vallejo Vargas, A. F. (2014). Caracterizacion de llamadas de ecolocacion e historia natural de tres especies del genero Anoura (Chiroptera: Phyllostomidae). PUCE.

Van der Hammen, T., Noldus, G., & Salazar, E. (2003). Un diagrama de polen del Pleistoceno final y Holoceno de Mullumica. Maguare, (17), 6.

Kevin Gonzalez Gutierrez (I); Hilda R. Mosquera Mosquera (II)

(I) Grupo de Investigacion en Zoologia, Facultad de Ciencias, Universidad del Tolima, Ibague.

(II) Docente tiempo completo, Facultad de Ciencias, Grupo de Investigacion en Genetica y Biotecnologia Vegetal y Microbiana, Universidad del Tolima - GEBIUT - Ibague.

* kevingg2010@gmail.com

Leyenda: Figura 1. Estructuras a evaluar por calidad de nitidez en los granos de polen

Leyenda: Tabla 1. Observacion de las muestras de polen de Ochroma pyramidale bajo los protocolos de montaje al natural, KOH (Mercado & Perez, 2013), acetolisis de Erdtman (1969) y estandarizacion de la acetolisis (Autores).

Leyenda: Tabla 2. Observacion de las muestras de polen de Bahuinia variegata bajo los protocolos de montaje al natural, KOH (Mercado & Perez, 2013), acetolisis de Erdtman (1969) y estandarizacion de la acetolisis (Autores).
Tabla 3. Valoracion de la eficacia de las tecnicas Montaje al
Natural, KOH (Mercado & Perez, 2013), Acetolisis de Erdtman (1969)
y Estandarizacion de la Acetolisis (Autores) en las muestras de
polen de Bahuinia variegata y Ochroma pyramidale.

Nitidez                     Montaje al   KOH (Mercado &
                            natural      Perez, 2013)

Contorno Exina                  -               +
Ornamentacion de la Exina       +               +
Limpieza de la Exina            -               -
Entrada de la Luz               -               -
Aperturas                       -               -

Nitidez                     Acetolisis        Estandarizacion
                            Erdtman (1969)    Acetolisis
                                              (Autores)

Contorno Exina                     +                 +
Ornamentacion de la Exina          +                 +
Limpieza de la Exina               +                 +
Entrada de la Luz                  +                 +
Aperturas                          +                 +
COPYRIGHT 2016 Universidad del Tolima, Facultad de Ciencias
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2016 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Gonzalez Gutierrez, Kevin; Mosquera Mosquerall, Hilda R.
Publication:Revista Tumbaga
Date:Oct 1, 2016
Words:4244
Previous Article:RESIDUOS AGROINDUSTRIALES EN LA FORMULACION DE SUSTRATOS PARA LA PRODUCCION DE HONGOS COMESTIBLES (Pleurotus pulmonarius).
Next Article:CALIDAD FISICA, QUIMICA Y BIOLOGICA DE LAS AGUAS RESIDUALES DEL JARDIN BOTANICO: ALEJANDRO von HUMBOLDT--UNIVERSIDAD DEL TOLIMA.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2019 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters