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Diagnostico serologico de la esporotricosis mediante el empleo del antigeno de micelio de Sporothrix schenckii sensu stricto.

Serological diagnosis of sporotrichosis using an antigen of Sporothrix schenckii sensu stricto mycelium.

INTRODUCCION

La esporotricosis es una micosis subcutanea de distribucion mundial, que afecta a humanos y animales, producida por especies del complejo Sporothrix schenckii formado por cinco especies de interes clinico: S. globosa, S. brasiliensis, S. luriei, S. mexicana and S. schenckii sensu stricto (1, 2). El hongo principalmente se desarrolla en la tierra, restos vegetales y plantas. La micosis, usualmente es adquirida por inoculacion traumatica del hongo dentro del tejido subcutaneo (3). La esporotricosis es frecuente en America Latina, por la prevalencia de un clima tropical con suelos de alto contenido organico y se desarrolla en climas humedos, con temperaturas desde 10 a 28[grados]C. Se ha considerado una enfermedad de tipo ocupacional, presentandose sobre todo en campesinos, veterinarios, floristas y otros (3-5). En la ultima decada, la incidencia de la esporotricosis ha aumentado en las zonas tropicales y areas subtropicales de Brasil, en particular en el Estado de Rio de Janeiro, con la aparicion de una epidemia relacionada con la transmision zoonotica de gatos a humanos (6, 7). Este aumento en el numero de casos en los gatos, fue seguido por un incremento en el numero de reportes en humanos, lo que constituye un grave problema de salud publica (6, 8, 9). En Venezuela se han reportado desde 1984 hasta el 2010 alrededor de 220 casos, lo que corresponde a un 25,9% y mas del 70% de los mismos ha sido reportado en el area de la Gran Caracas (10).

El diagnostico de la esporotricosis esta basado en la realizacion del examen directo, tinciones y cultivo micologico en Sabouraud dextrosa agar. Sin embargo, se han desarrollado inmunoensayos para el diagnostico de las micosis, logrando asi la deteccion de anticuerpos en muestras de sueros de pacientes con paracoccidioidomicosis (11-13), histoplasmosis (14, 15), cromomicosis (16, 17), candidiasis (18, 19) y esporotricosis (20, 21).

Han sido elaboradas diversas preparaciones de antigenos del complejo Sporothrix schenckii (antigenos de pared celular y metabolicos) en busqueda de componentes especificos, para ser utilizados en tecnicas de inmunodiagnostico de alta especificidad y sensibilidad con el objeto de lograr una valiosa ayuda en la orientacion diagnostica (22, 23). El principal antigeno de levadura de la superficie celular es el peptido peptidos rhamnomannan, el cual, aparentemente es el componente responsable de la reactividad cruzada en las pruebas serologicas (22). Por otro lado, como antigeno metabolico se reporto el antigeno de 55 kDa sin reactividad cruzada para sueros de pacientes con otras micosis (23).

Con respecto al serodiagnostico con antigenos especificos, de las diferentes especies del complejo Sporothrix spp, pocos son los trabajos reportados hasta el momento. Sin embargo, se describe el trabajo de Almeida-Paes y col. (24), donde se utilizo antigenos libres de celulas de S. brasiliensis y se identifico una proteina inmunodominante de 85 kDa, la cual puede ser usada como antigeno de diagnostico. Por otra parte, Fernandes y col. (25), realizaron un estudio comparativo sobre las proteinas de secrecion, inmunogenicidad y virulencia con aislados de S. brasiliensis, S. globosa y S. schenckii, y encontraron moleculas de 46 y 60-kDa comunmente secretadas por las tres especies y que podrian estar relacionadas con los perfiles de virulencia. Recientemente, Ruiz-Baca y col. (26) detectaron dos antigenos immunorreactivos de la pared celular en la fase de levadura, un antigeno de 60kDa (gp60) para S. brasiliensis y otro de 70 kDa (gp70), para S. globosa los cuales mostraron alta sensibilidad y especificidad.

El presente trabajo, tuvo como objetivo comparar la sensibilidad y especificidad del serodiagnostico de esporotricosis, utilizando el ensayo de ELISA, Inmunodifusion doble (IDD) y contrainmunoelectroforesis (CIE) con el antigeno crudo de Sporothrix schenckii sensu stricto, producido a partir de la fase micelial del hongo, el cual ha sido previamente caracterizado (23).

MATERIAL Y METODOS

Antigeno crudo de Sporothrix schenckii sensu stricto

Se utilizo la cepa 4526 de Sporothrix schenckii sensu stricto (27). El antigeno fue preparado a partir de la fase micelial, siguiendo la metodologia de Mendoza y col. (23). La cepa fue mantenida en Sabouraud dextrosa agar (10 g de peptona, 20 g de dextrosa, 15 g de agar, 1000 mL de agua destilada, pH 6,5 y adicionalmente 150 mg de cloranfenicol) a temperatura ambiente. Posteriormente, fue inoculada en fiolas que contenian caldo Sabouraud dextrosa (10 g de peptona, 20 g de dextrosa, 1000 mL de agua destilada, pH 6,5 y 150 mg de cloranfenicol), cultivada por 7 dias. A continuacion, la cepa fue subcultivada en fermentador (Bioflo IV) por 20 dias bajo condiciones constantes de temperatura (28[grados]C), y agitacion a 100 rpm. Luego, el sobrenadante del cultivo fue filtrado por membranas de Millipore de 0,45 pm, dializado contra agua destilada a 4[grados]C por 3 dias y liofilizado. El antigeno deshidratado se disolvio con agua bidestilada y se estimo la concentracion de proteinas por el metodo de Lowry (28). Para cada ensayo serologico, se estandarizo la concentracion del antigeno a partir de la muestra original, y se enfrento con sueros de esporotricosis y sueros de otras patologias.

Sueros de pacientes

Bajo la previa aprobacion del protocolo de trabajo por el comite de Bioetica del Instituto Autonomo de Biomedicina, se utilizaron veinticinco sueros de pacientes positivos para esporotricosis (10 femeninos y 15 masculinos). El diagnostico de la esporotricosis se llevo a cabo por cultivos en Sabouraud dextrosa agar con antibiotico a 28[grados]C, reversion del micelio a levadura en el medio de cultivo infusion cerebro corazon agar a 37[grados]C, para comprobar su dimorfismo y observacion de la morfologia macroscopica y microscopica de las colonias. Posteriormente, estos aislados fueron identificados por estudios de biologia molecular (27).

Las formas clinicas en los pacientes estudiados fueron: esporotricosis cutanea fija (24%) y cutanea linfangitica (76%). Fue examinado un total de 183 sueros heterologos, histoplasmosis (n=49), paracoccidioidomicosis (n= 50), leishmaniasis (n=30) tuberculosis (n=30) y lupus (n=24). Tambien, se evaluaron muestras de sueros de individuos sanos, donadas por el Banco Municipal de Sangre del Distrito Capital (n= 50) como controles negativos.

Por otro lado, se utilizaron sueros de animales de experimentacion como controles positivos. Los antisueros de conejo AntiS. schenckii: Ss 99927, Ss81297, fueron producidos previamente en el Laboratorio de Micologia del Servicio Autonomo del Instituto de Biomedicina del Hospital Vargas de Caracas-Venezuela (29).

Ensayos de Inmunodifusion doble (IDD)

Se empleo la tecnica inmunologica de Ouchterlony (30), en la cual se utilizo una concentracion del antigeno de S. schenckii sensu stricto de 25 mg/mL, colocando 6 a 10 [micron]L del antigeno (2 mm de diametro del pozo) y 15 a 20 [micron]L del suero en cada pozo (5 mm de diametro del pozo). Se evaluo el antigeno contra sueros de pacientes positivos para esporotricosis y otras patologias, a fin de observar la reactividad cruzada. Para evaluar la especificidad de la tecnica, el antigeno fue enfrentado contra sueros de individuos sanos.

Ensayo de contrainmunoelectroforesis (CIE)

Se utilizo la tecnica Electro-inmunodifusion (30), la cual se baso en enfrentar sueros de pacientes positivos para esporotricosis y sueros de otras patologias, para observar la reactividad cruzada. Se utilizo el antigeno de S. schenckii sensu stricto a la concentracion de 25 mg/mL y se colocaron 6 a 10 [micron]L del antigeno (orificio de 2 mm de diametro) y 15 a 20 [micron]L del suero (orificios de 5 mm de diametro) por pozo. Se colocaron las laminas en la camara para CIE, con el Buffer Tris-C[H.sub.3]COOH 0,1 M pH 8,15 y se aplico corriente de 100 voltios por 30 min. Para evaluar la especificidad de la tecnica, el antigeno fue enfrentado contra sueros de individuos sanos.

Ensayo de ELISA

Se llevo a cabo el ensayo de ELISA, siguiendo el protocolo previamente descrito en la literatura (14, 21), con algunas modificaciones. Se emplearon placas de 96 pozos de Poliestireno para la sensibilizacion del antigeno, se dispenso 1 [micron]g/mL del antigeno por pozo en 100 [micron]L de buffer PBS (10 mM de Buffer fosfato salino). Se incubo por 1 h a 37[grados]C y luego se dejo a 4[grados]C durante toda la noche. Posteriormente, se lavo la placa 3 veces con buffer de lavado PBST (PBS 10 mM, 0,1% Tween20 pH 7,3), por 5 min cada lavado. Se bloqueo con 200 [micron]L de 5% p/v buffer de bloqueo (leche descremada en PBST) por 2 ha 37[grados]C. Las placas fueron lavadas 3 veces con el buffer PBST por 5 min cada lavado. Las muestras de suero de pacientes fueron anadidas por duplicado en cada pozo (100 [micron]L) a una dilucion de 1:500 en buffer de lavado (PBST) y la placa se incubo por 1 h a 37[grados]C. Despues, se procedio al lavado con PBST por 3 veces. Las placas fueron incubadas a 37[grados]C por 1 h, con 100 [micron]L del anticuerpo secundario IgG conjugado a peroxidasa (Dako Po214, Denmark), diluido en buffer de bloqueo, utilizando la dilucion recomendada por el fabricante (1:8000)en cada pozo. Se lavo la placa 3 veces con PBST y finalmente se desarrollo la reaccion con 0,4 mg/mL de diclorhidrato de O-fenilendiamina (OPD) en 0,01 M de buffer de citrato de sodio pH 5,5 y se adiciono 0,04% v/v de peroxido de hidrogeno ([H.sub.2][O.sub.2]) al 30% para el momento del uso (100 [micron]L por pozo).Se dejo la placa 10 minutos en oscuridad a temperatura ambiente. La reaccion fue detenida con 50 [micron]L de HCl 3M. Las absorbancias fueron medidas en un lector de ELISA (BT 2000 Microkinetics Reader, Biotek Instruments, Inc., EE.UU), a una longitud de onda de 490 nm. El punto de corte, fue establecido como la media de la absorbancia mas tres desviaciones estandar de los controles negativos.

Analisis estadistico

Para evaluar los inmunoensayos (IDD, CIE y ELISA) se determinaron las variables cuantitativas clasicas: Sensibilidad y Especificidad en cada uno, con Indicadores que oscilaron entre 0 y 100%. Luego, con el fin de establecer si existian diferencias estadisticamente significativas entre los ensayos para estas variables, se empleo la prueba de Chi-cuadrado ([ji al cuadrado]), con una confianza de 95% (significancia = 0,05) haciendo uso del programa Statistica, version 8.0.

El rendimiento de la prueba de ELISA, fue estimado mediante un analisis por curva de rendimiento diagnostico o curva ROC. (Receiver-Operating-Characteristic) con el programa XLSTAT 2013. En este analisis, se determino el area bajo la curva (AUC) que puede poseer un valor comprendido entre 0,5 y 1, donde 1 representa un valor diagnostico confiable y 0,5 es una prueba sin capacidad discriminatoria diagnostica (31).

RESULTADOS

Inmunodifusion doble (IDD)

En todos los ensayos de IDD, se obtuvo formacion de bandas precipitantes con los sueros controles de conejo, para comprobar la reactividad del antigeno de S. schenckii sensu stricto. Se obtuvieron bandas precipitantes con los 25 sueros de pacientes positivos para esporotricosis, lo que representa un 100% de positividad (Fig. 1). No se encontro reaccion cruzada entre el antigeno de S. schenckii sensu stricto y sueros heterologos de H. capsulatum y P. brasiliensis, tuberculosis, leishmaniasis y lupus. Al retar el antigeno de S. schenckii sensu stricto con sueros de individuos sanos, no se obtuvieron bandas precipitantes con los 50 sueros evaluados, lo que representa un 100% de especificidad.

Contrainmunoelectroforesis (CIE)

En todos los ensayos de CIE realizados, se obtuvo formacion de bandas precipitantes con los sueros controles de conejo, utilizados para comprobar la reactividad del antigeno de S. schenckii sensu stricto. Los 25 sueros de pacientes positivos para esporotricosis, fueron evaluados por la tecnica, mostrando bandas precipitantes, lo cual representa 100% de positividad (Fig. 2). No se obtuvo reaccion cruzada con el antigeno S. schenckii sensu stricto, frente a sueros heterologos de histoplasmosis, paracoccidioidomicosis, tuberculosis, y leishmaniasis. Sin embargo, se encontraron falsos positivos con el antigeno de S. schenckii sensu stricto y los sueros de pacientes con lupus. La tecnica de CIE, resulto tener una especificidad del 100%, al no formar bandas de precipitina con ninguno de los 50 sueros de individuos sanos.

Ensayo de ELISA

El punto de corte, fue establecido como la media de la absorbancia mas tres desviaciones estandar de los controles negativos. Las muestras con absorbancias mayores a 0,736, fueron consideradas positivas. En la Fig. 3, se observa que todos los sueros de pacientes con esporotricosis se encontraron por encima del punto de corte, lo que representa un 100% de sensibilidad. No se observo reaccion cruzada con los sueros heterologos de histoplasmosis, tuberculosis y leishmaniasis. Se observaron falsos positivos con los sueros de pacientes con paracoccidioidomicosis (1/50) y con los sueros de lupus (5/24) (Tabla I).

Comparacion de tecnicas serologicas

Al utilizar el antigeno de S. schenckii sensu stricto, con las diferentes tecnicas (IDD, CIE, ELISA), se obtuvo una especificidad de 100% para IDD y CIE y del 98% para el Ensayo de ELISA, destacandose una sensibilidad del 100% en las tecnicas de IDD, CIE y ELISA (Tabla II).

Analisis estadistico

Con el fin de determinar si existen diferencias estadisticamente significativas, entre los resultados obtenidos por una tecnica u otra, se aplico la prueba de Chi-cuadrado, que no arrojaron diferencias estadisticamente significativas entre las tecnicas serologicas utilizadas (Tabla III). En relacion al analisis de la curva de rendimiento diagnostico o curva ROC, se obtuvo un area bajo la curva (AUC) de 0,99 [+ o -] 0,014, lo que representa un buen valor diagnostico (Fig. 4).

DISCUSION

Para la deteccion de anticuerpos en sueros de pacientes con micosis, se han utilizado los ensayos serologicos a lo largo de los anos (15, 21, 24, 32). En el caso de la esporotricosis, se presentan diversas formas clinicas, las cuales podrian ser influenciadas por ciertos factores, como la carga de inoculo, el estado inmune del huesped, la virulencia de la cepa inoculada y la profundidad de la inoculacion traumatica. Hasta ahora, no existe evidencia cientifica que pueda explicar la aparicion de las formas cutaneas diseminadas y extra-cutaneas en pacientes inmunocompetentes (33).

Con relacion al diagnostico serologico, se hace dificil realizarlo en los casos clinicos con las formas cutaneas fijas, debido a que la presencia de anticuerpos circulantes varia de acuerdo a la extension de las lesiones; detectandose solo en un 15% en la forma clinica cutanea localizada, mientras que se obtiene un 100% de positividad en los pacientes con lesiones mas extensas (34). Esto podria ser consecuencia, de que una vez inoculado el hongo por via traumatica, se activa la respuesta inmune innata, con activacion de macrofagos y otros intermediarios de la respuesta inmune, los cuales activan posteriormente la respuesta tipo Th1, con activacion de las celulas CD4+ y LTC, generando una respuesta del tipo celular y ocasionando que los pacientes con lesiones cutanea fija, sean positivos a las pruebas intradermicas, pero con una respuesta baja al estudio humoral. Mientras que, a mayor tiempo de evolucion de la lesion, se permite el desarrollo de la respuesta tipo Th2, involucrada con la respuesta humoral presente en las lesiones cronicas (35).

En el presente trabajo, se utilizo el antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto, obtenido a partir de la forma micelial del hongo, el cual ha sido previamente caracterizado, presentando un componente de 55kDa, con un optimo de produccion en la fase estacionaria de crecimiento. Este antigeno esta influenciado por la composicion del medio de cultivo, pH y la fase de crecimiento del hongo (23). Ademas, este antigeno de S. schenckii sensu stricto no reacciona de forma cruzada con muestras de sueros de coccidioidomicosis, histoplasmosis, paracoccidioidomicosis por la tecnica de de inmunodifusion e inmunoelectroforesis (23). Sin embargo, este antigeno no habia sido ensayado por la tecnica de ELISA en Venezuela, la cual se estandarizo y se probo con un mayor numero de sueros positivos para esporotricosis y sueros de otras patologias para evaluar la reactividad cruzada, ademas de comparar los resultados con otros ensayos serologicos.

En cuanto a la epidemiologia en Venezuela, se conoce que en la mayoria de los casos de esporotricosis diagnosticados, se trata de pacientes con una edad promedio de 30 anos aproximadamente, seguidos muy de cerca por individuos menores de 15 anos. Con referencia al genero, se ha observado un 71,4% en hombres y en un 28,6% en mujeres, con la forma clinica predominante de la esporotricosis linfangitica, en el 63,15% de los casos. Los pacientes mas comunmente afectados son los estudiantes (37,6%), por debajo de 15 anos de edad, seguidos por los agricultores (29,3%) y las amas de casa (6,8%) (36).

En relacion a los ensayos inmunoenzimaticos, es importante senalar que estos se han utilizado con mayor frecuencia para fines de serodiagnostico desde hace algunos anos. En 1989 Scott y Muchmore (37), elaboraron un antigeno en fase de levadura, que mostraba moleculas de 40 a 70 kDa por SDS-PAGE, con una sensibilidad de 100% y 95% de especificidad. Sin embargo, al reproducir esos datos, otros investigadores encontraron una alta reactividad cruzada (38). Por otro lado, antigenos de pared celular obtenidos a partir de la fase de levadura del hongo, utilizando metodos de purificacion con concanavalina A, mostraron 100% de sensibilidad con 35 sueros positivos para esporotricosis; pero tuvieron reactividad cruzada con sueros de pacientes con leishmaniasis cutanea (39). Igualmente, Bernardes-Engemann y col. (40), elaboraron antigenos de pared celular, los cuales fueron probados con 92 pacientes de esporotricosis, y obtuvieron 90% de sensibilidad y 80% de especificidad. Mientras que, Almeida-Paes y col. (21), siguiendo la metodologia descrita por Mendoza y col. (23), sobre la produccion del antigeno a partir de la forma de micelio del hongo y aplicando al serodiagnostico de las diversas formas clinicas de la esporotricosis por el metodo de ELISA, encontraron una especificidad del 89% y una sensibilidad ubicada entre 90-97%. No obstante, cabe destacar que, estos estudios demostraron reacciones cruzadas con paracoccidioidomicosis, histoplasmosis, y aspergilosis. Sin embargo, es importante resaltar que, algunos investigadores han concluido que el usar el antigeno y la tecnica de ELISA, pudiera convertirse en una herramienta util para el diagnostico complementario de dicha micosis (20, 21, 39).

En el presente trabajo, al utilizar la tecnica de ELISA y el antigeno de S. schenckii sensu stricto, se establecio un punto de corte de 0,736 y una sensibilidad y especificidad por encima del 98%. En relacion a los falsos positivos, se obtuvo 6 sueros positivos, 1 suero de paciente con paracoccidioidomicosis y 5 sueros de pacientes con lupus, la cual es una enfermedad con caracteres clinicos y epidemiologicos muy distintos a la esporotricosis. Por otra parte, es necesario mencionar que, recientemente se realizaron estudios de biologia molecular para la tipificacion de los 25 aislados obtenidos de los pacientes con esporotricosis evaluados, de los cuales 22 resultaron S. schenckii sensu stricto y 3 aislados fueron S. globosa (27), donde se resalta que los sueros de los pacientes de estos tres ultimos resultaron positivos para el serodiagnostico (IDD, CIE y ELISA). Esto, puede ser consecuencia de que se ha reportado que en los perfiles antigenicos de los aislados del complejo, se han observado similitudes antigenicas entre S. brasiliensis, S. schenckii y S. globosa (25), por lo que resulta necesario para futuros trabajos, probar el antigeno con un mayor numero de sueros de pacientes con cultivos positivos para S. globosa, u otras especies del complejo, para determinar si el antigeno micelial solo aplica para sueros de pacientes de S. schenckii sensu stricto o para otras especies del complejo.

En cuanto al analisis estadistico, al comparar las tecnicas entre si, utilizando el Test de Chi-cuadrado, se observo que no existe diferencia estadisticamente significativa entre las mismas, debido a que se obtuvo una especificidad por encima del 98% con todas las tecnicas. En cuanto a la sensibilidad, los valores de P indican que no existe diferencia significativa entre las tecnicas, lo cual en terminos estadisticos significa, que las pruebas son equivalentes en cuanto a su capacidad de diagnostico y a su aplicacion. Por otra parte, los resultados de ELISA obtenidos, generaron un area bajo la curva de 0,99 [+ o -] 0,014, pudiendose observar que la curva se encuentra en la parte superior izquierda del espacio ROC. En general, los valores superiores a 0,9 indican una alta precision de la prueba, lo que significa que las decisiones tomadas en base a ella son confiables. Finalmente, se concluye, que este ensayo constituye un metodo especifico y sensible para el diagnostico de la esporotricosis y podria ser util para monitorizar la evolucion de la enfermedad y respuesta al tratamiento.

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Recibido: 24-04-2014 Aceptado: 29-01-2015

Primavera Alvarado [1], Ana Ostos [1], Nohelys Franquiz [1], Antonio Roschman- Gonzalez [2], Edgar A. Zambrano [3] y Mireya Mendoza [1].

[1] Laboratorio de Micologia, Instituto de Biomedicina, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela.

[2] Centro de Microscopia Electronica, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela.

[3] Laboratorio de Bioquimica de Parasitos, Instituto de Biomedicina, Universidad Central de Venezuela. Caracas, Venezuela.

Autor de correspondencia: Primavera Alvarado. Laboratorio de Micologia, Instituto de Biomedicina. Apartado postal 4043. Caracas 1010A, Venezuela. Telefono +58 212 8629604 Fax: +58 212 8619593. Correo electronico: prima558@gmail.com

Leyenda: Fig. 1. Ensayo de inmunodifusion doble con el empleo del antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto y sueros de pacientes con esporotricosis. CA: Suero control 99927, CB: Suero control 81297, Cc: Suero control C. Ag: Antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto. 1 a 15: Diferentes sueros de pacientes.

Leyenda: Fig. 2. Ensayo de contrainmunoelectroforesis con el empleo del antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto contra sueros de pacientes con esporotricosis. Ag: Antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto. 1 a 22: Diferentes sueros de pacientes. 23: Suero control.

Leyenda: Fig. 3. Deteccion de la presencia de anticuerpos en sueros de pacientes con esporotricosis y otras patologias al utilizar el antigeno crudo de S. schenckii sensu stricto y la tecnica de ELISA. La linea horizontal muestra el punto de corte 0,736. Sano: sueros de individuos sanos, Hc: sueros de H. capsulatum, Pb: sueros de P. brasiliensis, Ss: sueros de esporotricosis, Tub: sueros de tuberculosis; Leh: sueros de leishmaniasis; Lup: sueros de lupus.

Leyenda: Fig. 4. Curva ROC descrita por la prueba de ELISA. El area bajo la curva (AUC) es 0,99[+ o -] 0,014.
TABLA I

ELISA EN LA DETECCION DE IgG CONTRA EL ANTIGENO CRUDO DE S. schenckii
sensu stricto

Grupo de pacientes            No de pacientes        Promedio de
(no de pacientes)                positivos      Absorbancia [+ o -] EE

Esporotricosis (25)                 25           1,523 [+ o -] 0,416
Histoplasmosis (49)                  0           0,240 [+ o -] 0,135
Paracoccidioidomicosis (50)          1           0,421 [+ o -] 0,122
Leishmaniasis (30)                   0           0,274 [+ o -] 0,098
Tuberculosis(30)                     0           0,284 [+ o -] 0,142
Lupus(24)                            5           0,574 [+ o -] 0,215
Individuos sanos(50)                 1           0,318 [+ o -] 0,164

TABLA II

SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD EN LAS DIFERENTES TECNICAS SEROLOGICAS
MEDIANTE EL EMPLEO DEL ANTIGENO CRUDO DE S. schenckii sensu stricto

Tecnica   Sensibilidad   Especificidad

IDD           100%           100%
CIE           100%           100%
ELISA         100%            98%

IDD: Inmunodifusion doble; CIE: Contrainmunoelectroforesis.

TABLA III

COMPARACION DE LAS TECNICAS IDD, CIE Y ELISA, AL UTILIZAR EL ANTIGENO
CRUDO DE S. schenckii sensu stricto

Sensibilidad    p *    Especificidad    p *

IDD vs. CIE    0,992    IDD vs. CIE    0,999
IDD vs ELISA   0,998   IDD vs ELISA    0,999
CIE vs ELISA   0,995   CIE vs ELISA    0,999

* [ji al cuadrado].
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Author:Alvarado, Primavera; Ostos, Ana; Franquiz, Nohelys; Roschman-Gonzalez, Antonio; Zambrano, Edgar A.;
Publication:Investigacion Clinica
Date:Jun 1, 2015
Words:5421
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