Printer Friendly

Detection of pepper huasteco yellow vein virus resistance and heritability in wild genotypes of Capsicum annuum L./Deteccion de resistencia al virus huasteco vena amarilla del chile y su heredabilidad en genotipos silvestres de Capsicum annuum L./Deteccao de resistencia no virus huasteco veia amarelada pimenta (PHYVV) e sua heredabilidade em genotipos silvestres de Capsicum annuum L.

Introduccion

El virus huasteco vena amarilla del chile (PHYVV) es uno de las principales patogenos del cultivo del chile (Capsicum spp.) en Mexico (Garzon-Tiznado et al, 2002). Este virus fue reportado por primera vez en el estado de Tamaulipas, en el norte del pais (Garzon-Tiznado et al., 1993). Se encuentra ampliamente distribuido en Mexico y en el sur de EEUU (Torres-acheco et al., 1996). El PHYVV es miembro del genero Begomovirus (Subgrupo III), perteneciente a la familia Geminiviridae (Palmer y Rybicky, 1997). Su genoma bipartita es transmitido por Bemisia tabaci G y tiene como hospederos a diferentes dicotiledoneas como Capsicum spp., Solanum lycopersicum L., Nicotiana spp., Physalis spp., Solanum rostratum L., Cucurbita spp., Helianthus annuus L., Datura spp., Carica papaya L., Sorghum halepense L. y Melia azedarach L. (Garzon-Tiznado et al., 2002; Mendez-Lozano et al., 2003). Los sintomas principales de PHYVV en plantas de chile consisten en amarillamiento de las nervaduras, distorsion, mosaico amarillo y enrrollamiento de hojas, detenimiento del crecimiento de la planta y reduccion del rendimiento (GarzonTiznado et al., 1993).

De un total de ~1200 especies descritas de moscas blancas (Martin et al., 2000), Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae) es la mas ampliamente distribuida alrededor del mundo. Este insecto polifago tiene la capacidad de transmitir mas de 100 virus fitopatogenos a traves de la alimentacion directa en sus hospederos (Jones, 2003). B. tabaci ha tenido diferentes cambios evolutivos con los cuales ha generado diferentes complejos en la especie. Los complejos constan de varios haplotipos y alrededor de 25 biotipos de B. tabaci (Perring, 2001; Simon et al., 2003), entre los cuales existe variacion en los hospedantes, adaptabilidad a plantas hospederas, habilidad de alimentacion, capacidad de transmision de virus de plantas, fecundidad, resistencia a insecticidas y capacidad de producir anomalias fisiologicas en plantas (Perring, 2001; Simon et al., 2003; Kang et al., 2012). Sin embargo, no hay reportes especificos de la interaccion de PHYVV y los biotipo de B. tabaci.

El manejo de este Begomovirus se ha basado principalmente en el control quimico, mediante el uso de insecticidas altamente toxicos contra los insectos vectores. Este metodo ha resultado parcialmente efectivo, pero costoso y biopeligroso (Borah y Dasgupta, 2012). Una alternativa efectiva, no biopeligrosa y aceptada en el manejo integrado de Begomovirus, es el desarrollo de genotipos resistentes a este grupo de patogenos (Shankarappa et al., 2008). A la fecha no se han descrito cultivares de chile resistentes a PHYVV. Se ha reportado que los parientes silvestres de las plantas cultivadas son fuente de genes de resistencia a plagas y enfermedades (Hernandez-Verdugo et al., 1998;). En Capsicum Hernandez-Verdugo et al. (2001) y Godinez-Hernandez et al. (2001) reportaron fuentes de resistencia al virus huasteco vena amarilla del chile (PHYVV) en chiles silvestres de C. annuum y C. chinense, respectivamente. Para continuar con el estudio y aprovechamiento de la diversidad genetica de los parientes silvestres de Capsicum, es necesario seguir explorando nuevas fuentes de germoplasma para encontrar genes que puedan contribuir en la formacion de cultivares resistentes a PHYVV.

Para que un caracter agronomico pueda ser sujeto a seleccion es necesario que tenga una base genetica y que sea heredable. La heredabilidad ([h.sup.2]) mide la proporcion de la varianza fenotipica total que es debida a causas geneticas y es determinante del ritmo en que se modifica la media poblacional y como evoluciona la poblacion en respuesta a la seleccion natural o artificial. El aspecto mas importante de la [h.sup.2] es su funcion predictiva en los caracteres de interes para ayudar a los mejoradores en el diseno de programas de mejoramiento genetico. La determinacion de la heredabilidad es uno de los principales objetivos del estudio genetico en un caracter metrico (Falconer y Mackay 1996). A pesar de su importancia, no existen reportes sobre la heredabilidad de la resistencia a PHYVV en Capsicum.

El objetivo de este estudio fue identificar resistencia genetica a PHYVV en poblaciones de Capsicum annuum L. silvestres del Noroeste de Mexico y estimar la heredabilidad de este caracter. Esto permitira incorporar la resistencia genetica al PHYVV en futuros programas de mejoramiento genetico de cultivares de chile.

Materiales y Metodos

Material vegetal y fuente de inoculo viral

Se recolectaron frutos de 10 plantas de cada una de 31 poblaciones de chile silvestre durante la temporada otono-invierno del ano 2010 en los estados de Sinaloa y Sonora (Figura 1). El cultivar Maverick (United Genetics) fue utilizado como control por su alta susceptibilidad a PhYVV. Las semillas fueron germinadas en charolas de 200 cavidades de poliestireno a 25[degrees]C.

Se recolectaron puas de plantas de chile cultivar Grande[R] (Seminis) con los sintomas causados por PHYVV y se injertaron en plantas de chile cultivar Maverick[R] para el incremento y conservacion de la fuente de inoculo viral. Las plantas injertadas fueron mantenidas en jaulas entomologicas de madera a prueba de insectos (40cm de largo, 40cm de ancho y 60cm de altura) y cubiertas con tela de organza.

Identificacion del virus

Se identifico PHYVV mediante el metodo de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) usando los iniciadores MotCP2118 y MotCP2123, que amplifican un segmento de 650 pares de bases del componente A de Geminivirus, el cual incluye la region comun y parte del gen de la proteina de la capside (Cervantes-Diaz et al., 2009). La extraccion de ADN fue realizada por el metodo de Dellaporta et al. (1983). Las reacciones de PCR fueron llevadas a cabo segun descrito por Cervantes-Diaz et al. (2009), en un termociclador (Bio-Rad C 1000 TM Thermal Cycler). Los productos de PCR fueron analizados por electroforesis en gel de agarosa al 1%. El fragmento amplificado fue purificado con el uso de microcolumnas comerciales (PureLink) y posteriormente secuenciado de acuerdo con lo descrito por Sanger et al. (1977), en el Laboratorio Nacional de Genomica y Biodiversidad, CINVESTAVI-rapuato, Mexico, para confirmar la presencia de PHYVV. La secuencia obtenida se comparo con las de otros aislamientos de PHYVV registradas en el Gen Bank (NCBI). La estimacion de la similitud de las secuencias analizadas se hizo con el programa BLAST (www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST; Altschulf et al., 1990). Con los resultados obtenidos se construyo un dendrograma con la tecnica Clustal W en MEGA (Molecular Evolutionary Genetics Analysis software, version 5.05; www.megasoftware.net/), usando el metodo de neighborjoining (Tamura et al., 2011) para conducir un analisis bootstrap (1000 replicas).

Fuente, mantenimiento e identificacion del insecto vector

Con la intencion de tener altas poblaciones del insecto vector libre de virus, se recolectaron adultos de mosca blanca con un succionador entomologico en un cultivo de chile en condiciones de campo abierto. Las moscas fueron colocadas en plantas de algodon (Gossypium hirsutum L.) en jaulas entomologicas de madera cubiertas con tela de organza y se mantuvieron durante 12 meses (~12 generaciones) en un invernadero a temperatura promedio de 28[degrees]C. Las plantas de algodon fueron sustituidas por plantas jovenes cada dos meses. Ha sido reportado que mantener aisladas las poblaciones de B. tabaci en plantas libres de virus durante 3-4 generaciones permite que el insecto vector se mantenga libre de virus (Czosnek et al., 1993). Tambien ha sido demostrado que G. hirsutum no es hospedero de Begomovirus que infecte Solanaceas (Czosnek et al., 1993).

El Biotipo B de B. tabaci fue corroborado mediante PCR, tomando dos muestras de 50 adultos para su posterior analisis con los iniciadores biotype F y biotype R, que amplifican un fragmento de 292pb. La extraccion de ADN de insectos se efectuo con el metodo de Doyle y Doyle, (1990) y las reacciones de PCR se hicieron de acuerdo a Kang et al. (2012). Las reacciones amplificadas fueron llevadas a cabo en un termociclador (Bio-Rad C 1000 TM Thermal Cycler) y los productos de PCR analizados por electroforesis en gel de agarosa 1%.

Primer ensayo de resistencia genetica

Este se realizo en febrero de 2011, utilizando el metodo de inoculacion por insectos. Las moscas libres de virus fueron colocadas en botellas de plastico en la fuente de inoculo de PHYVV (cultivar Maverick) durante 48h para la adquisicion del virus. Se inocularon 20 plantas individualmente de cada poblacion a los 60 dias despues de la siembra. En la inoculacion se utilizaron 20 adultos viruliferos por un periodo de transmision de 48h. Despues del periodo de inoculacion se elimino a las moscas con el insecticida Imidacloprid (Confidor[R], Bayer Crop Sciences). Se utilizo un diseno completamente al azar con cuatro repeticiones de cinco plantas.

Los sintomas de la virosis se midieron mediante la escala reportada por HernandezVerdugo et al. (2001) con modificaciones, donde 1 es sin sintomas y 9 corresponde a planta con los sintomas mas severos, los cuales incluyen plantas enanas, con hojas rizadas y deformes, con mosaico claramente definido. Se seleccionaron como resistentes y se autofecundaron las plantas que obtuvieron una calificacion [less than or equal to]4 en la escala descrita anteriormente para su utilizacion en el segundo ensayo. El cultivar Maverick fue utilizado como control susceptible.

Segundo ensayo de resistencia genetica

Este se realizo en febrero de 2012, utilizando el mismo metodo de inoculacion con insectos y el mismo diseno experimental que se utilizo en el primer ensayo. Se inocularon entre 23 y 28 plantas descendientes de cada planta seleccionada como resistente en el primer ensayo y el control susceptible a PHYVV (Maverick). La inoculacion y la evaluacion de sintomas del patogeno fueron igual al primer ensayo.

En los dos ensayos se tomaron lecturas diariamente hasta la aparicion de sintomas y a 60 dias despues de la inoculacion se realizo la evaluacion de resistencia de acuerdo con la escala descrita previamente. Las plantas de los dos ensayos fueron mantenidas en invernadero a una temperatura media de 29[degrees]C con una humedad relativa promedio de 50%.

Analisis estadistico

Los datos fueron sometidos a un analisis de varianza no parametrico con la prueba de Kruskal-Wallis y la de medianas de Dunn (p [less than or equal to] 0,05). Todos los analisis estadisticos fueron realizados con el programa computacional SAS (1996).

Heredabilidad

Se estimo la heredabilidad realizada ([h.sup.2]) mediante la ecuacion

[h.sup.2] = R/S

donde R: respuesta a la seleccion y S: diferencial de seleccion. La respuesta a la seleccion (R) es determinada por la diferencia entre la media de la poblacion progenitora y la media de poblacion descendiente. El diferencial de seleccion (S) se obtuvo mediante la diferencia entre la media de la poblacion progenitora y la media de las plantas seleccionadas como resistentes (Falconer y Mackay, 1996).

Resultados y Discusion

Identificacion del virus

Las muestras tomadas de las plantas de chile fuente de inoculo resultaron positivas para la amplificacion del fragmento predicho de 650pb correspondientes al Begomovirus PHYVV (Figura 2). La secuencia del fragmento amplificado mostro 99% de identidad nucleotidica con el aislado HE967657 del GenBank, que corresponde a un gen de la proteina de la capside de PHYVV (Rodelo-Urrego et al., 2013). El analisis filogenetico de la secuencia M53 agrupo a la cepa utilizada en este estudio dentro de la especie PHYVV, y la diferencio claramente de los Begomovirus PepGMV y ToSLCV (Figura 3). Estos re sultados muestran que el virus aislado y utilizado en este estudio es PHYVV. El aislamiento e identificacion de una cepa patogenica de cualquier organismo es fundamental para comenzar un programa de seleccion de resistencia genetica en plantas. El virus aislado de este estudio (M53) pertenece al genero Begomovirus, especie PHYVV, de acuerdo con los diferentes analisis moleculares por PCR, secuenciacion y analisis filogenetico de las muestras tomadas de las plantas de chile fuente de inoculo. Este Begomovirus es el que se encuentra mas ampliamente distribuido en el cultivo de chile (Capsicum spp.) en Mexico y es una de las principales limitantes de este cultivo (TorresPacheco et al., 1996; GarzonTiznado et al., 2002). El virus PHYVV fue identificado por primera vez en el norte de Mexico, en el estado de Tamaulipas, por GarzonTiznado et al. (1993) y reportado en el estado de Sinaloa en el 2003 por Mendez-Lozano et al. (2003).

Identificacion del vector

El analisis por PCR mostro que los insectos utilizados como vectores para la inoculacion del Begomovirus pertenecen a Bemisia tabaci biotipo B (Figura 4). Una de las principales caracteristicas del biotipo B de B. tabaci es la alta capacidad de transmision de diferentes Begomovirus en plantas, en contraste con otros biotipos de esta misma especie (Jones, 2003). Los insectos identificados como B. tabaci biotipo B usados en nuestros experimentos lograron un 100% de eficiencia de transmision con 20 adultos por planta con la cepa M53 de PHYVV, resultado que coincide con estudios de transmision de otros Begomovirus (Chirinos et al, 2009; GeraudPouey et al., 2009; Romay et al., 2010). Los resultados son la primera evidencia de una interaccion altamente eficiente entre B. tabaci biotipo B y el virus PHYVV.

Primer ensayo de resistencia genetica

Se analizo la resistencia genetica a PHYVV en 31 poblaciones de chile silvestre bajo condiciones controladas en invernadero, mediante la inoculacion del virus por su insecto vector B. tabaci En el primer experimento la mayoria de las plantas mostraron los sintomas de la enfermedad, aunque la severidad (Tabla I) vario entre las poblaciones (h = 379,73; gl = 30; p [less than or equal to] 0,0001). Despues de dos meses post inoculacion, la poblacion UAS12 mostro el mayor grado de resistencia a PHYVV, con un indice de sintomas promedio de 4,6 y 50% de plantas resistentes. Las poblaciones UAS13 Y UAS10 mostraron una resistencia intermedia, con medias de sintomas de 6,7 y 6,9, respectivamente y ambas con 20% de plantas resistentes. El resto de las poblaciones y el cultivar Maverick fueron altamente susceptibles, con valores promedio de sintomas entre 7,3 y 9,0. Se detecto ADN viral de PHYVV en todas las plantas analizadas en este ensayo (Tabla II). Estos resultados coinciden con los reportados por HernandezVerdugo et al. (2001) y Godinez-Hernandez et al. (2001), quienes encontraron resistencia al virus PHYVV en poblaciones silvestres de C. annuum y C. chinense, respectivamente.

El primer paso para el desarrollo de cultivares resistentes a enfermedades es el escrutinio de los recursos geneticos silvestres y/o domesticados, para despues ser utilizados en los programas de mejoramiento genetico de cultivos agricolas (Pickersgill, 1997). Las poblaciones silvestres de chile tuvieron una amplia variacion en los niveles de resistencia a PHYVV. Las tres poblaciones que se diferenciaron del resto son fuentes de resistencia prometedoras para futuros estudios de mejoramiento genetico en el cultivo de chile. Las poblaciones UAS10, UAS12 y UAS13, que desarrollaron menores niveles de sintomas, mostraron elevada variacion en la resistencia entre ellas. Esta variacion en la resistencia permitio seleccionar plantas con bajos indices de los sintomas dentro de cada poblacion para el siguiente ensayo de busqueda de resistencia contra el PHYVV. Esta elevada variacion en la resistencia coincide con la alta variacion estimada con marcadores moleculares RADPs, y microsatelites entre y dentro de las poblaciones de chile silvestre del noroeste de Mexico (Oyama et al., 2006; Pacheco-Olvera et al., 2012).

El periodo de incubacion del virus en las poblaciones de chile silvestre vario de 10 hasta 28 dias post inoculacion (dpi). Las poblaciones UAS10, UAS12 y UAS13 manifestaron los primeros sintomas del virus entre 22 y 28 dpi. El resto de las poblaciones y el cultivar Maverick mostraron los primeros sintomas entre los 9 y 20 dpi. El tiempo de aparicion de los primeros sintomas se correlaciono negativa y significativamente con los valores promedio de los sintomas en las poblaciones estudiadas (r = -0,938; P = 0,007). Las plantas de las poblaciones con bajos niveles de los sintomas presentaron un retardo significativo en el tiempo de su aparicion, indicando que mientras mayor es el retraso en la aparicion de los primeros sintomas en las plantas, existe mayor probabilidad de que los genotipos muestren bajos niveles en los sintomas de PHYVV.

Se seleccionaron como progenitores resistentes para ser utilizadas en el segundo ensayo a 10 plantas de la poblacion UAS12 con un indice promedio de la enfermedad de 2,1; cuatro plantas de la poblacion UAS10 con un promedio de la enfermedad de 2,5; y cuatro plantas de la poblacion UAS13 con un promedio de la enfermedad de 4,0.

Segundo ensayo de resistencia genetica

Se analizo la resistencia genetica a PHYVV en la progenie de las plantas seleccionadas como resistentes en el primer ensayo bajo condiciones controladas en invernadero. La mayoria de las plantas inoculadas con moscas blancas desarrollaron sintomas de la infeccion de PHYVV. Las medias de los sintomas de la descendencia de las poblaciones seleccionadas fueron significativamente menores que el cultivar Maverick, utilizado como testigo susceptible (Tabla III). La progenie de la poblacion UAS12 presento el mayor nivel de resistencia a PHYVV con un valor promedio de sintomas significativamente menor (media = 4,0) que las progenies de las poblaciones UAS10 (media = 6,2) y UAS13 (media = 6,4).

La expresion de los sintomas vario ampliamente dentro de las tres poblaciones consideradas resistentes. Este resultado sugiere que en la resistencia al Begomovirus PHYVV participa mas de un gen. Es necesario efectuar investigaciones adicionales mediante cruzas y segregacion de la descendencia para estimar el numero de genes involucrados en el caracter de resistencia.

La descendencia de las poblaciones UAS10, UAS12 y UAS13 respondio a la seleccion y mostro una disminucion de los valores medios de los sintomas con respecto a sus progenitores, indicando una base genetica de la resistencia al virus PHYVV.

Heredabilidad de la resistencia al PHYVV

La heredabilidad realizada ([h.sup.2]) de la resistencia a PHYVV fue 0,16; 0,25 y 0,11 para las poblaciones UAS10, UAS12 y UAS13, respectivamente (Tabla III). El cultivar Maverick mostro una heredabilidad de susceptibilidad a PHYVV de 0,17. Los valores de heredabilidad obtenidos en este estudio son menores que los obtenidos por Mazyad et al. (2007) y Griffiths y Scott (2001) en los Begomovirus TYLCV y ToMoV en genotipos silvestres de tomate (Lycopersicum hirsutum y L. chilense), respectivamente. Mazyad et al. (2007) estimaron heredabilidades de 0,55 en la resistencia a TYLCV, mientras que Griffiths y Scott (2001) estimaron valores de heredabilidad de 0,87 en la resistencia a ToMoV. Las diferencias en las heredabilidades estimadas en este estudio con las reportadas por Mazyad et al. (2007) y Griffiths y Scott (2001) pueden deberse a las diferencias geneticas entre las especies estudiadas y los Begomovirus probados. Finalmente, estos resultados son el primer reporte de heredabilidad en el caracter de resistencia a PHYVV.

La variacion en los valores de heredadiblidad mostrados en las poblaciones seleccionadas como resistentes sugiere que el potencial para responder a la seleccion varia entre las tres poblaciones seleccionadas.

Las plantas de la segunda generacion de las tres poblaciones consideradas como resistentes son fuentes prometedoras de resistencia a PHYVV y podran ser utilizadas en futuros estudios geneticos que contribuyan a la incorporacion de la resistencia en cultivares comerciales de chile.

Conclusiones

Se identificaron tres poblaciones de chile resistentes (UAS10, UAS12 y UAS13) al PHYVV con valores de sintomas significativamente menores que el resto de las 28 poblaciones y el cultivar Maverick utilizado como control susceptible. Los valores de la heredabilidad para la resistencia al virus PHYVV, aunque relativamente bajos, indicaron que hubo respuesta a la seleccion y que esta caracteris tica tiene una base genetica. El metodo de inoculacion por insectos con B. tabaci empleado para la seleccion de plantas de chiles resistentes al PHYVV tuvo una eficacia de infeccion de 100% en el total de las plantas inoculadas, por lo que se propone como un nuevo metodo de inoculacion para la seleccion de resistencia al PHYVV. Finalmente, las poblaciones silvestres de Capsicum annuum del noroeste de Mexico tuvieron suficiente variabilidad genetica para encontrar resistencia genetica a PHYVV, indicando que esta especie es un valioso recurso genetico que debe ser estudiado para mejorar su uso y conservacion.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a la empresa Vilmorin INC, por el apoyo brindado para realizar esta investigacion, al CONACYT por la beca otorgada a Jesus Enrique Retes Manjarrez para sus estudios de Doctorado en Ciencias Agropecuarias y a la Universidad Autonoma de Sinaloa por el apoyo financiero a Sergio Hernandez Verdugo (proyecto PROFAPI 2014/087) y a Jose Antonio Garzon Tiznado (proyecto PROFAPI 2015/078).

REFERENCIAS

Altschulf SF, Gish W, Miller W, Miyers EW, Lipman DJ (1990) Basic Local Alignment Search Tool. J. Mol. Biol. 215: 403-440.

Borah BK, Dasgupta I (2012) Begomovirus research in India: a critical appraisal and the way ahead. J. Biosci. 37: 791-806.

Cervantes-Diaz L, Zavaleta-Mejia E, Rojas-Martinez RI, AlanisMartinez L, Ochoa-Martinez DL, Valadez-Moctezuma E, Grimaldo-Juarez O (2009) Deteccion de geminivirus asociados a la alstromeria (alstromeria l.) en villa guerrero, estado de Mexico. Interciencia 34: 903-908.

Chirinos DT, Geraud-Pouey F, Romay G, Guerere P, Franco MA, Galindo-Castro I (2012) Evaluacion de genotipos comerciales de tomate por su resistencia a Begomovirus. Interciencia 37: 451-456.

Czosnek H, Kheyr-Pour A, Gronenborn B, Remetz E, Zeidan M, Altman A, Rabinowitch HD, Vidavsky S, Kedar N, Gafni Y, Zamir D (1993) Replication of Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) DNA in agroinoculated leaf discs from selected tomato genotypes. Plant Mol. Biol. 22: 995-1005.

Dellaporta SL, Woods J, Hicks JB (1983) A plant minipreparation, Version II. Plant Mol. Biol. Rep. 1: 19-21.

Doyle JJ, Doyle JL (1990) Isolation of plant DNA from fresh tissue. Focus 12: 13-15.

Falconer DS, Mackay TFC (1996) Introduction to quantitative genetics. Pearson. Nueva York, EEUU. 464 pp.

Garzon-Tiznado JA, Acosta-Garcia G, Torres-Pacheco I, GonzalezChavira M, Rivera-Bustamante RF, Maya-Hernandez V, Guevara-Gonzalez RG (2002) Presencia de los Geminivirus, huasteco del chile (PHV), Texano del chile variante Tamaulipas (TPV-T) y Chino del tomate (VCDT), en los estados de Guanajuato, Jalisco y San Luis Potosi, Mexico. Rev. Mex. Fitopatol. 20: 45-52.

Garzon-Tiznado JA, Torres-Pacheco I, Ascencio-Ibanez JT, HerreraEstrella L, Rivera-Bustamante RF (1993) Inoculation of peppers with infection clones of a new geminivirus by biolistic procedure. Phytopathology 33: 514-521.

Geraud-Pouey F, Chirinos DT, Romay G, Santana MA, Bastidas L, Flores L (2009) Transmision del TYLCV a diferentes materiales de tomate (Lycopersicon esculentum Miller) mediado por el Biotipo B del complejo Bemisia tabaci (Gennadius) en Venezuela. Bioagro 21: 21-33.

Godinez-Hernandez Y, Anaya-Lopez JL, Diaz-Plaza R, GonzalezChavira M, Torres-Pacheco I, Rivera-Bustamante RF, Guevara-Gonzalez RG (2001) Characterization of resistance to pepper huasteco geminivirus in chili peppers from Yucatan, Mexico. HortScience 36: 139-142.

Griffiths PD, Scott JW (2001) Inheritance and linkage of Tomato Mottle Virus resistance genes derived from Lycopersicon chilense accession LA 1932. J. Am. Soc. Horti. Sci. 126: 462-467.

Hernandez-Verdugo S, GuevaraGonzalez RG, Rivera-Busta mante RF, Oyama K (1998) Los parientes silvestres del chile (Capsicum spp.) como recursos geneticos. Bol. Soc. Bot. Mex. 62: 171-181.

Hernandez-Verdugo S, GuevaraGonzalez RG, Rivera-Bustamante RF, Oyama K (2001) Screening wild plants of Capsicum annuum for resistance to Pepper huasteco virus (PHV): Presence of viral DNA and differentiation among populations. Euphytica 122: 31-36.

Jones DR (2003) Plant viruses transmitted by whiteflies. Eur. J. Plant Pathol. 109: 195-219.

Kang S, Kim YH, Lee HJ, Kim BJ, Lim KJ, Lee SH (2012) Onestep identification of B and Q biotypes of Bemisia tabaci based on intron variation of carboxylesterase 2. J. Asia Pac. Entomol. 15: 383-388.

Martin JH, Mifsud D, Rapisarda C (2000) The whiteflies (Hemiptera: Aleyrodidae) of Europe and the Mediterranean Basin. Bull. Entomol. Res. 90: 407-448.

Mazyad HM, Khalil EM, Rezk AA, Abdel HMA, Aboul AAE (2007) Genetic studies on tomato Ye llow Leaf Curl Begomovirus (TYLCV) resistance in Egypt: Six-population analysis. Int. J. Virol. 3: 88-95.

Mendez-Lozano J, Torres-Pacheco I, Fauquet CM, Rivera-Bustamante RF (2003) Interactions between geminiviruses in a naturally occurring mixture: Pepper huasteco virus and Pepper golden mosaic virus. Phytopathology 93: 270-277.

Oyama K, Hernandez-Verdugo S, Sanchez C, Gonzalez-Rodriguez A, Sanchez-Pena P, GarzonTiznado JA, Casas A (2006) Genetic structure of wild and domesticated populations of Capsicum annuum (Solanaceae) from northwestern Mexico analyzed by RAPDs. Genet. Resour. Crop Evol. 55: 553-562.

Pacheco-Olvera A, Hernandez-Verdugo S, Rocha-Ramirez V, Gonzalez-Rodriguez A, Oyama K (2012) Genetic diversity and structure of Pepper (Capsicum annuum L.) from northwestern Mexico analyzed by microsatellite markers. Crop Sci. 52: 231-241.

Palmer EK, Rybicky EP (1997) The use of geminiviruses in biotechnology and plant molecular biology with particular focus on mastreviruses. Plant Sci. 129: 115-130.

Perring TM (2001) The Bemisia tabaci species complex. Crop Protect. 20: 725-737.

Pickersgill B (1997) Genetic resources and breeding of Capsicum spp. Euphytica 96: 129-133.

Rodelo-Urrego M, Pagan I, Gonzalez-Jara P, Betancourt M, Moreno-Letelier A, Ayllon MA, Fraile A, Pinero D, GarciaArenal F (2013) Landscape heterogeneity shapes host-parasite interactions and results in apparent plant-virus codivergence. Mol. Ecol. 22: 2325-2340.

Romay G, Geraud-Pouey F, Chirinos DT, Herrera E, Fernandez C, Morales F, Martinez KA (2010) Transmision del Tomato Venezuela Virus (ToVEV) por Bemisia tabaci (Gennadius), Hemiptera: Aleyrodidae, en Maracaibo, Venezuela. Neotrop. Entomol. 39: 2 66-274.

Sanger F, Niklen S, Coulson AR (1977) DNA sequencing with chain terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 74: 5463-5467.

SAS (1999) SAS/STAT. User's Guide. Rel. 6.03. SAS Institute Inc. Cary, NC, EEUU. 1028 pp.

Shankarappa KS, Sriharsha, Rangaswamy KT, Aswathanarayana DS, Prameela HA, Kulkarni RS, Muniyappa V, Rao AM, Maruthi MN (2008) Development of tomato hybrids resistant to tomato leaf curl virus disease in South India. Euphytica 164: 531-539.

Simon B, Cenis JL, Demichelis S, Rapisarda C, Caciagli P, Bosco D (2003) Survey of Bemisia tabaci (Hemiptera: Aley rodidae) biotypes in Italy with the description of a new biotype (T) from Euphorbia charadas. Bull. Entomol Res. 93: 259-264.

Tamura K, Peterson D, Peterson N, Stecher G, Nei M, Kumar S (2011) MEGA 5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods. Mol. Biol. Evol. 28: 2731-2739.

Torres-Pacheco I, Garzon-Tiznado JA, Brown JK, Becerra-Flora A, Rivera-Bustamante RF (1996) Detection and distribution of geminiviruses in Mexico and the southern United States. Phytopathology 86: 1186-1192.

Recibido: 09/12/2014. Aceptado: 27/06/2016.

Jesus Enrique Retes-Manjarrez. Maestro en Ciencias en Fitopatologia y Estudiante de Doctorado en Ciencias Agropecuarias, Universidad Autonoma de Sinaloa (UAS), Mexico. Direccion: Facultad de Agronomia, UAS. Carretera Culiacan-El Dorado, Km. 17.5. Apartado Postal 726. Codigo postal 80000, Culiacan, Sina loa, Mexico. e-mail: retesmje@ hotmail.com

Sergio Hernandez-Verdugo. Doctor en Ciencias en Ecologia, Universidad Nacional Autonoma de Mexico. Profesor-Investigador, UAS, Mexico.

Benedicte Pariaud. Doctor en Fitopatologia. Investigador, Vilmorin, Francia.

Claudia Maria Melgoza-Villagomez. Estudiante de Doctorado en Ciencias en Biotecnologia Vegetal, UAS, Mexico.

Antonio Pacheco-Olvera. Doctor en Ciencias en Biotecnologia Vegetal, UAS, Mexico. Profesor-Investigador, UAS, Mexico.

Saul Parra-Terrazas. Doctor en Ciencias en Edafologia, Co legio de Postgraduados, Mexico. Profesor-Investigador, UAS, Mexico.

Jose Antonio Garzon-Tiznado. Doctor en Ciencias en Biotecnologia Vegetal, Instituto Politecnico Nacional, Mexico. Profesor-Investigador, UAS, Mexico.

TABLA I

RESULTADOS DEL PRIMER ENSAYO DE 31 POBLACIONES SILVESTRES
DE Capsicum annuum RECOLECTADAS EN EL NOROESTE DE MEXICO Y
EL CULTIVAR SUSCEPTIBLE MAVERICK, INOCULADAS CON PHYVV
MEDIANTE Bemisia tabaci BIOTIPO B

Poblacion   NPS/TP   IVD   M     R

Maverick    20/20    9     8,4   8-9
UAS29       20/20    10    9,0   9-9
UAS28       20/20    10    9,0   9-9
UAS21       20/20    14    9,0   9-9
UAS30       20/20    13    8,8   7-9
UAS20       20/20    10    8,8   8-9
UAS19       20/20    10    8,8   8-9
UAS27       20/20    10    8,7   7-9
UAS16       20/20    13    8,7   8-9
UAS22       20/20    10    8,7   7-9
UAS31       20/20    10    8,6   7-9
UAS26       20/20    10    8,6   8-9
UAS09       20/20    10    8,6   7-9
UAS01       20/20    15    8,6   8-9
UAS05       20/20    10    8,5   7-9
UAS02       20/20    10    8,5   7-9

Poblacion   NPS/TP   IVD   M     R

UAS25       20/20    10    8,5   7-9
UAS23       20/20    10    8,5   8-9
UAS14       20/20    12    8,4   7-9
UAS24       20/20    10    8,3   7-9
UAS03       20/20    12    8,3   7-9
UAS17       20/20    14    8,2   7-9
UAS11       20/20    14    8,2   7-9
UAS06       20/20    14    8,2   7-9
UAS04       20/20    15    8,2   8-9
UAS15       20/20    10    8,1   6-9
UAS08       20/20    18    8,0   7-9
UAS07       20/20    20    7,7   6-9
UAS18       20/20    20    7,3   6-9
UAS10       16/20    22    6,9   2-9
UAS13       16/20    22    6,7   4-9
UAS12       10/20    28    4,6   2-7

NPS: numero de plantas susceptibles, TP: total de plantas probadas,
IVD: incubacion del virus en dias, M: media de indice de severidad de
los sintomas, y R: rango de sintomas.

TABLA II

RESULTADOS * DEL SEGUNDO ENSAYO DE LA PROGENIE DE LAS PLANTAS DE LAS
POBLACIONES SELECCIONADAS COMO RESISTENTES DEL PRIMER ENSAYO
INOCULADAS CON PHYVV MEDIANTE Bemisia Tabaci BIOTIPO B COMPARADAS CON
EL CULTIVAR SUSCEPTIBLE MAVERICK.

Poblacion   No plantas       Tiempo de    Indice de severidad
            susceptibles/    incubacion   de los sintomas
            Total probadas   del virus    Medianas Valoracion
                             (dias)

Maverick    56/56            9            8,5 (a)   8-9
UAS13       28/40            22           6,4 (b)   4-9
UAS10       99/112           22           6,2 (b)   1-9
UAS12       19/60            28           4,0 (c)   1-8

* Incidencia de la enfermedad, incubacion del virus (dias) e indice de
severidad de sintomas. Comparaciones de medianas hechas con la prueba
de Dunn (P<0,05). Medianas con igual letra no difieren
significativamente.

TABLA III

VALORES DE LA HEREDABILIDAD REALIZADA EN LA RESISTENCIA A PHYVV

Poblacion   Media de    Media de    Media de   R     S     [h.sup.2]
            poblacion   plantas     progenie
            base        seleccio-
                        nadas

UAS10       6,9         2,5         6,2        0,7   4,4   0,16
UAS12       4,6         2,1         4,0        0,6   2,5   0,25
UAS13       6,7         4,0         6,4        0,3   2,7   0,11
Maverick    8,4         9,0         8,5        0,1   0,6   0,17

R: respuesta de la seleccion, S: diferencial de seleccion, y
[h.sup.2]: heredabilidad realizada.
COPYRIGHT 2016 Interciencia Association
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2016 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Retes-Manjarrez, Jesus Enrique; Hernandez-Verdugo, Sergio; Pariaud, Benedicte; Melgoza-Villagomez, C
Publication:Interciencia
Date:Aug 1, 2016
Words:4921
Previous Article:Functional evaluation of a protein concentrate from jumbo squid (Dosidicus gigas) viscera/Evaluacion funcional de un concentrado de proteinas de...
Next Article:Molecular characterization of crude seed extracts from Moringa oleifera/ Comportamiento y caracterizacion de extractos crudos de semillas de Moringa...
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2021 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters