Printer Friendly

Desarrollo embrionario-larval y metamorfosis de Physalaemus albonotatus (Anura: Leptodactylidae).

Embryonic and larval development and metamorphosis of Physalaemus albonotatus (Anura: Leptodactylidae)

INTRODUCCION

Los anfibios presentan diversas estrategias de reproduccion y modelos de desarrollo, incluyendo especies con fertilizacion interna o externa, desarrollo oviparo o viviparo, indirecto o directo, huevos acuaticos o terrestres, ademas de variadas formas de nutricion, respiracion y metabolismo embrionario y larval (6). Estas estrategias estan intimamente asociadas con la historia filogenetica y con aspectos ecologicos de las especies.

Los anuros, por su plasticidad fenotipica, son un grupo de interes para abordar estudios ontogeneticos, tanto en relacion a aspectos morfo-fisiologicos como de importancia ecologica, filogenetica y evolutiva. Los aportes que puedan realizarse acerca de la anatomia embrionaria y larval son relevantes ya que resultan de gran utilidad y aplicabilidad en estudios que integren diversos aspectos del desarrollo.

Si bien existe informacion sobre la morfologia larval externa de muchas especies de anuros, la morfogenesis embrionaria ha sido escasamente explorada, y en general la informacion disponible corresponde a especies de Bufo, Hyla y Rana del hemisferio horte (12, 23, 24).

La tabla de desarrollo de Gosner fue propuesta para diversas familias de anuros de America del Norte pero su aplicacion es generalizada y utilizada para especies de otras regiones (13). Esta tabla consiste en una secuencia de 46 estadios caracterizados principalmente a partir de la morfologia externa y caracteres fisiologicos de embriones y larvas exotroficas. Adicionalmente, existen tablas de desarrollo paraXenopus laevis (20), Eleutherodactylus coqui (27), Spea intermontana (14), Microhyla okinavensis (22), Dendropsophus columbianus (18), entre otras. Para la anurofauna de Argentina existen tablas de desarrollo para Rhinella arenarum (4, 7), Pseudis platensis (9, 10), Phyllomedusa azurea, P. sauvagii (21), Dermatonotus muelleri 11 y Pleurodema borellii (17).

En este trabajo se describe la organogenesis externa e interna de Physalaemus albonotatus desde la etapa de segmentacion hasta el final de la metamorfosis, ampliando la descripcion morfologica sugerida para los estadios de Gosner (13) y de descripciones morfologicas previas breves y parciales de embriones y larvas de la especie (16).

MATERIAL Y METODOS

Se coleccionaron puestas de huevos y larvas de P. albonotatus durante los meses de octubre a marzo del periodo 2007-2010, en el Campus Universitario (27[grados]28'04"S; 58[grados]46'58"O) de la Universidad Nacional del Nordeste, Corrientes, Argentina. Embriones y larvas fueron criados en laboratorio en recipientes plasticos (1,5 litros) con agua declorinada.

Las larvas fueron alimentadas ad libitum con lechuga hervida y/o alimento comercial para peces. Los estadios embrionarios fueron asignados de acuerdo a la tabla de Gosner (13). Entre 10 y 20 individuos por estadio (hasta el estadio 21 cada 3-6 h y luego cada 12-48 h) fueron fijados en formol 10%, previa anestesia con aminobenzoato de etilo 6%, segun la Guia de Eutanasia Animal propuesta por la AVMA (2).

Se describieron los estadios embrionarios y larvales a partir de caracteres anatomicos externos considerados por otros autores utilizando la terminologia propuesta (1, 4, 7, 13, 17). Adicionalmente se realizaron disecciones de los ejemplares para analizar y describir la anatomia interna. Las observaciones se realizaron con lupa estereoscopica Leica ES2 y complementariamente para estadios embrionarios tempranos, microscopio electronico de barrido JEOL JSM-5800 LV.

Para esto los ejemplares fueron preparados siguiendo el protocolo estandarizado de deshidratacion en soluciones de concentracion creciente de acetona (12,5; 25; 50; 75 y 100%), secado a punto critico y metalizado con oro-paladio. Se midio el diametro embrionario, longitud total, longitud hocico-cloaca y longitud de la cola de 10 ejemplares por estadio, utilizando una escala micrometrica incorporada a lupa estereoscopica Olympus SZX9 y se calculo el valor promedio de cada variable. El material biologico analizado se encuentra depositado en la Coleccion Herpetologica de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNEC 12332).

RESULTADOS

El desarrollo de P. albonotatus se dividio en dos periodos. El periodo embrionario (hasta la eclosion) comprendio los procesos de segmentacion, gastrulacion, neurulacion y organogenesis temprana y el periodo larval incluyo las etapas de prometamorfosis, premetamorfosis y climax metamorfico (17). Las medidas obtenidas en embriones y larvas se presentan en Tabla 1, mientras que secuencias del desarrollo de las branquias externas, del disco oral, de las extremidades anteriores y del sistema digestivo son ilustradas en las Figuras 1 a 4.

Caracteristicas de los estadios embrionarios

E. 7: micromeras en el polo animal y macromeras en el polo vegetativo, cavidad blastocelica central.

EE: estadio embrionario, DE: diametro embrionario, LT: longitud total, LHC: longitud hocico-cloaca, LC: longitud cola.

E. 8-9: micromeras y macromeras de menor tamano que en el estadio anterior, cavidad blastocelica ubicada en el polo animal.

E. 10: esbozo del labio dorsal del blastoporo y del arquenteron visibles en la region posterior, blastocele excentrico.

E. 11: labios laterales del blastoporo, macromeras visibles solo en el polo vegetativo, arquenteron mas desarrollado que en el estadio anterior.

E. 12: labio ventral del blastoporo, macromeras visibles en el tapon vitelino, blastocele pequeno y arquenteron amplio ubicado en la region dorsal.

E. 13: embrion oblongo en sentido antero-posterior, tapon vitelino pequeno, placa neural visible.

E. 14: pliegues neurales y surco neural visibles.

E. 15: region cefalica y abdominal diferenciadas, pliegues neurales fusionados a nivel del prosencefalo, surco neural profundo, arcos branquiales I, II y III visibles.

E. 16: tubo neural completamente cerrado, placodas opticas e invaginacion del proctodeo visibles.

E. 17: region cefalica, abdominal y caudal bien definidas, arcos branquiales I, II, III y IV visibles, rinon pronefrico distinguible dorsalmente por detras de la cabeza, esbozo de la cola.

E. 18: arco branquial I visible a ambos lados del estomodeo, II, III y IV mas prominentes que en estadio anterior, un par de esbozos de filamentos branquiales externos a cada lado, esbozo de papilas adhesivas visibles, abdomen globoso con abundante vitelo.

E. 19: arcos branquiales no visibles externamente, filamentos branquiales externos simples, papilas adhesivas de forma conica, cola con esbozos de aletas dorsal y ventral, melanoforos dispersos sobre la region dorsal de la cabeza, abdomen y cola.

Caracteristicas de los estadios larvales (prometamorficos)

E. 20: filamento branquial anterior ramificado en 5 filamentos secundarios cortos y posterior simple, ojos pequenos, melanoforos mas abundantes que en el estadio anterior y dispersos en el dorso del cuerpo, tubo proctodeal visible.

E. 21: filamentos branquiales largos (hasta la region pronefrica), anterior y posterior ramificados en 6 y 4 filamentos secundarios respectivamente, retina levemente pigmentada, cristalino blanquecino, placa oral perforada, labio posterior con esbozo de pliegue labial P1, papilas adhesivas conicas, invaginacion de placodas nasales visible, melanoforos mas abundantes que en el estadio anterior, distribuidos uniformemente en la region de la cabeza y flancos, en la cola, distribuidos en pequenos grupos separados por zonas sin pigmentar delimitando patron de bandas transversales, longitud de la cola aproximadamente 50% de la longitud total, aleta caudal bien desarrollada, no pigmentada, abdomen oblongo con abundante vitelo distribuido uniformemente.

E. 22: filamentos branquiales mas largos (hasta region anterior abdominal), disco oral con infrarrostrodonte, labio anterior con esbozo de pliegue labial A1 y pliegue labial P1 mas desarrollado, melanoforos mas abundantes, en la cabeza distribuidos uniformemente excepto en la region nasal, ocular y de la epifisis, esbozo del intestino visible ventralmente.

E. 23 a y b: pliegue opercular cubre parcialmente las branquias externas, retina bien pigmentada, disco oral con suprarrostrodonte, infrarrostrodonte y pliegues labiales A1 y P1 bien organizados, esbozos de pliegues labiales A2 y P2 y P3, papilas marginales ventrales visibles, esbozo del higado visible en el flanco derecho, 23a con esbozo del asa intestinal, 23b con una vuelta del asa intestinal completa.

E. 24 a y b: pliegue opercular cubre completamente las branquias externas derechas, papilas adhesivas vestigiales, disco oral con suprarrostrodonte e infrarrostrodonte aserrados y queratinizados, pliegues labiales con esbozos de queratodontes, papilas marginales laterales mas desarrolladas y papilas ventrales visibles a ambos lados del claro mental, 24a con una vuelta y media del asa intestinal, 24b con dos vueltas del asa intestinal.

E. 25: pliegue opercular cubre completamente los filamentos branquiales derechos e izquierdos, abertura del espiraculo visible, queratodontes bien desarrollados, queratinizados y con denticulos marginales en los pliegues labiales A1, A2, P1 y P2, y esbozo de queratodontes en P3, papilas marginales bien desarrolladas, con claro rostral amplio, un claro mental y dos claros ventro-laterales pequenos, cestilla branquial interna desarrollada visible por transparencia, dos vueltas y media del asa intestinal completas, tubo proctodeal bien desarrollado, aleta caudal dorsal con cromatoforos dispersos.

Caracteristicas de los estadios premetamorficos

E. 26-30: la morfologia larval externa general es semejante al E. 25, diferenciandose por el grado de desarrollo y patron de pigmentacion de los miembros anteriores y posteriores, asi como y crecimiento de las asas intestinales.

E. 31-35: delimitacion del estilopodio, zeugopodio y autopodio de los miembros anteriores y posteriores y desarrollo secuencial de los digitos: miembro posterior: digito 4 (E. 31), 3 y 5 (E. 33), 2 (E. 34) y 1 (E. 35); miembro anterior: digito 4 (E.31), 3 (E.32); 5 (E.33) y 2 (E.34).

E. 36-40: se caracterizan por crecimiento general y establecimientos del patron de pigmentacion de los miembros y digitos.

Caracteristicas de los estadios metamoficos (climax metamorfico)

Agrupa los estadios donde se producen los principales cambios de la forma larval a la juvenil. E. 41: miembros anteriores bien desarrollados dentro de la camara branquial, abertura de salida del miembro anterior visible en el flanco derecho, miembros posteriores bien desarrollados, inicio de regresion del tubo proctodeal. E. 42: inicio de reconfiguracion de la estructura cefalica, inicio de regresion de queratodontes y papilas marginales del disco oral, rostrodontes aun visibles, miembros anteriores externos, inicio de organizacion del estomago y reconfiguracion de las asas intestinales, tubo proctodeal ya no es visible, inicio de regresion de la cola y aletas caudales.

E. 43: queratodontes y rostrodontes ausentes, se delimitan las mandibulas, comisura de la boca no alcanza region ocular, comienza a configurarse el hocico, ojos dorso-laterales, estomago, intestino delgado y grueso bien delimitados, higado prominente con varios lobulos, cola mas corta que en el estadio anterior.

E. 44: comisura de la boca alcanza la altura del cristalino, estomago y lobulos hepaticos prominentes, cola reducida.

E. 45: forma juvenil bien establecida, comisura de la boca sobrepasa limite posterior del ojo, lobulos hepaticos, estomago e intestinos delgado y grueso mas desarrollados, vestigios de cola aun visibles.

E. 46: juvenil recien metamorfoseado con caracteristicas anatomicas externas e internas semejantes al adulto.

DISCUSION

El desarrollo embrionario comprende una serie de eventos ontogeneticos que incluyen los procesos de segmentacion, gastrulacion y organogenesis temprana que han sido extensa y detalladamente descriptos a nivel morfologico, genetico y molecular en el genero Rana (3) y X laevis (8, 15, 19). En P. albonotatus, semejante a lo descripto en la tabla de Gosner (13), el patron de clivaje es holoblastico desigual con formacion de micromeras en el polo animal y macromeras en el polo vegetativo, que acumulan las reservas vitelinas.

La blastula presenta inicialmente una cavidad blastocelica central que luego adquiere posicion excentrica. El proceso de gastrulacion es similar al descripto para Colostethus machalilla (5). Ocurre entre E. 10 y el E. 13-14 donde se evidencia, externamente, la formacion secuencial de los labios del blastoporo e internamente, la formacion de la notocorda y arquenteron, asi como la obliteracion progresiva del blastocele.

La organogenesis se inicia en E. 14 donde es visible, externamente, la placa neural (inicio de la neurulacion) y progresa paulatinamente con la formacion de los principales sistemas de organos, con evidentes cambios en la forma corporal. El embrion pasa de ser redondeado a oblongo (E. 14) y luego, a partir de E. 15, se organizan las tres regiones corporales (cabeza, abdomen y cola).

El desarrollo larval de los anuros comprende procesos morfogeneticos donde pueden reconocerse: diferenciacion, desarrollo y desaparicion de estructuras larvales; remodelacion de estructuras larvales en estructuras adultas y desarrollo y diferenciacion de estructuras propias del adulto, que ocurren de forma simultanea durante el periodo larval y la metamorfosis (11).

En P. albonotatus, entre E. 17 y E. 25, se organizan estructuras propias de la mayoria de los embriones y larvas de anuros (6). Ellas corresponden a organos transitorios como branquias externas y papilas adhesivas, que regresan tempranamente, y estructuras que se conservan hasta el final del periodo larval como la camara opercular, el espiraculo, el disco oral, el tubo proctodeal, la cola y las aletas caudales.

La ontogenia de dichas estructuras es conservada en la mayoria de las especies con larvas exotroficas (6), de modo que en E. 25 puede reconocerse la morfologia larval tipica, que para la especie en estudio corresponde al tipo IV. Los estadios larvales posteriores se diferencian principalmente por el grado de desarrollo de las extremidades anteriores y posteriores. Durante la metamorfosis se evidencian cambios bruscos en la anatomia de la mayoria de los sistemas de organos y se configura el diseno corporal caracteristico del individuo juvenil.

Una de las estructuras larvales mas importantes de interes taxonomico, ecologico y filogenetico es el disco oral. Asimismo, el estudio comparado de su ontogenia en especies emparentadas aporta datos utiles para comprender la evolucion de las estructuras orales (25, 28). En representantes del genero Physalaemus, la etapa temprana de formacion del disco oral es semejante hasta el E. 24, estadio a partir del cual se evidencian dos trayectorias de desarrollo diferentes que explican las variaciones morfologicas interespecificas dentro del clado 26 .

En P. albonotatus la formacion de los pliegues labiales del disco oral sigue la siguiente secuencia: P1 (E. 21); A1 (E. 22); A2, P2 y P3 (E.23 a y b), registrandose la formacion de los queratodontes de forma simultanea en todos los pliegues labiales a partir del E. 24. Las papilas marginales comienzan a desarrollarse en el E. 23 y estan completamente organizadas en el E. 25. En este estadio se observa, la configuracion C4 del disco oral caracterizada por una formula dentaria 2/3, con pliegue labial P3 corto, y claros dorsal, ventral y ventrolaterales. Este patron es compartido con P. cuvieri y P. cuqui (26).

Se concluye que adicionalmente a las descripciones previas de aspectos anatomicos y fisiologicos considerados por otros autores en la elaboracion de tablas de desarrollo, las caracterizaciones morfologicas de estructuras embrionarias y larvales de P. albonotatus brindadas en este trabajo contribuiran con informacion de referencia aplicable a otros miembros de la familia Leptodactylidae.

Agradecimientos. A la SGCYT-UNNE (PI F0192008). A la Lic. Blanca Beatriz Alvarez por la lectura critica del manuscrito y a las Lic. Cecilia Galindez y Lucila Curi por la colaboracion en la redaccion del abstract. Al Servicio de Microscopia Electronica de Barrido de la Secretaria General de Ciencia y Tecnica de la Universidad Nacional del Nordeste.

Recibido: 1 diciembre 2015 / Aceptado: 19 febrero 2016

REFERENCIAS

(1.) Altig R, McDiarmid RW. 1999. Body plan: development and morphology. In: Tadpole: the biology of anuran larvae (McDiarmid RW, Altig R, eds), The University of Chicago Press, London, 458 p.

(2.) American Veterinary Medical Association's (AVMA). 2007. Guidelines on euthanasia. http://www.avma.org/issues/animal_welfare/euthanasia.pdf

(3.) Carlson BM. 1981. Patten's foundations of embryology, McGraw-Hill, 4th ed, New York, 672 p.

(4.) Del Conte E, Sirlin L. 1951. The first stages of Bufo arenarum development. Acta ZoolLilloana 12: 495-499.

(5.) Del Pino EM, Avila ME, Perez OD, Benitez MS, Alarcon I, Noboa V, Moya IM. 2004. Development of the dendrobatid frog Colostethus machalilla. Int J Dev Biol 48: 663-670.

(6.) Duellman WE, Trueb L. 1986. Biology of amphibians, The John Hopkins Univ Press, Baltimore, USA, 670 p.

(7.) Echeverria DD, Fiorito L. 1981. Estadios de la metamorfosis en Bufo arenarum (Anura). Physis (Buenos Aires) 40-B: 15-23.

(8.) Ewald AJ, McBride H, Reddington M, Fraser SE, Kerschmann R. 2002. Surface imaging microscopy: An automated method for visualizing whole embryo simple in three dimensions at high resolutions. Develop Dynam 225: 359-375.

(9.) Fabrezi M, Goldberg J. 2009. Heterochrony during skeletal development of Pseudis platensis (Anura, Hylidae) and the early offset of skeleton development and growth. J Morph 270: 205-220.

(10.) Fabrezi M, Quinzio SI, Goldberg J. 2010. The ontogeny of Pseudis platensis (Anura, Hylidae): Heterochrony and the effect of larval development on postmetamorphic life. J Morph 271: 496-510.

(11.) Fabrezi M, Quinzio SI, Goldberg J, De Sa RO. 2012. The development of Dermatonotus muelleri (Anura: Microhylidae: Gastrophryninae). J Herpetol 46: 363-380.

(12.) Fox H. 1984. Amphibian Morphogenesis, Humana Press, Clifton, New Jersey (USA), 301 p.

(13.) Gosner KL. 1960. A simplified table for staging anuran embryos and larvae with notes on identification. Herpetologica 16: 183-190.

(14.) Hall JA, Larsen JH, Fitzner RE. 1997. Postembryonic ontogeny of the spadefoot toad, Scaphiopus intermontanus (Anura: Pelobatidae): External morphology. Herpetological Monographs 11: 124-178.

(15.) Heasman J, Ginsberg D, Goldstone K, Pratt T, Yoshidanaro C, Wylie C. 1994. A functional test for maternally inherited cadherin in Xenopus shows its importance in cell adhesion at the blastula stage. Development 120: 4957.

(16.) Kehr AI, Schaefer EF, Dure MI. 2004. The tadpole of Physalaemus albonotatus (Anura: Leptodactylidae). J Herpetol 38: 145-148.

(17.) Lavilla EO, Rouges M. 1992. Reproduccion y desarrollo de anuros argentinos. Asociacion Herpetologica, Serie de Divulgacion 5: 1-66.

(18.) Marin GB. 2005. Aspectos del desarrollo larval de Dendropsophus columbianus (Anura: Hylidae) del Jardin Botanico de la Universidad de Caldas, Colombia. Boletin Cientifico del Museo de Historia Natural de la Universidad de Caldas 10: 151-165.

(19.) Marsden M, DeSimone DW. 2001. Regulation of cell polarity, radial intercalation, an epiboly in Xenopus: novel roles for integrin and fibronectin. Development 128: 3635-3647.

(20.) Nieuwkoop PD, Faber J. 1967. Normal table of Xenopus laevis (Daudin), Ed. North-Holland, Amsterdam, 252 p.

(21.) Salica MJ, Haad MB, Vera F, Faivovich J. 2011. Early development of two species of Phyllomedusa (Anura: Phyllomedusinae). Salamandra 47: 144-154.

(22.) Shimizu S, Ota H. 2003. Normal development of Microhyla ornata: The first description of the complete embryonic and larval stages for the microhylid frogs (Amphibia: Anura). Curr Herpetol 22: 73-90.

(23.) Shumway W. 1940 Stages in the normal development of Ranapipiens. I. External form. AnatRec 78: 139-147.

(24.) Taylor AC, Kollros J. 1946 Stages in the normal development of Rana pipiens larvae. Anat Rec 94: 7-23.

(25.) Thibaudeau DG, Altig R. 1988. Sequence of ontogenetic development and atrophy of the oral apparatus of six anuran tadpoles. J Morphol 197: 63-69.

(26.) Thiebaudeau G, Altig R. 1999. Endotrophic anurans: development and evolution. In: Tadpoles: The biology of anuran larvae (McDiarmid RW, Altig R, eds), The University of Chicago Press, Chicago (USA), p. 170-188.

(27.) Townsend DS, Stewart MM. 1985. Direct development in Eleutherodactylus coqui (Anura: Leptodactylidae): a staging table. Copeia 1985: 423-436.

(28.) Vera MF, Haad B, Baldo D, Kolenc F, Borteiro C, Altig R. 2011. Different pathways are involved in the early development of the transient oral apparatus in anuran tadpoles (Anura: Leiuperidae). Biol J Linn Soc 104: 330-345.

Gomez, M.L.; Zaracho, V.H.; Sandoval, M.T.

Laboratorio de Herpetologia, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura, Universidad Nacional del Nordeste, Av. Libertad 5470, Corrientes (3400), Argentina, Tel. 0379-4473931 (int. 412). E-mail: gomezmlujan85@gmail.com

Leyenda: Figura 1. Desarrollo de las branquias externas y formacion de la camara opercular en Physalaemus albonotatus (estadios 18-25). Fotografias: microscopio electronico de barrido JEOL JSM-5800 LV.

Leyenda: Figura 2. Desarrollo de las estructuras orales de Physalaemus albonotatus (estadios 19-26). A1, A2: pliegues labiales anteriores 1 y 2; e: estomodeo; ir: infrarrostrodonte; P1, P2, P3: pliegues labiales posteriores 1, 2 y 3; pa: papilas adhesivas; pm: papilas marginales; sr: suprarrostrodonte. Fotografias: microscopio electronico de barrido JEOL JSM-5800 LV.

Leyenda: Figura 3. Secuencia de desarrollo del miembro anterior izquierdo de Physalaemus albonotatus (estadios 30-41). Los numeros corresponden a los digitos. Fotografias: camara digital Canon Power Shot A2000 IS.

Leyenda: Figura 4. Organizacion del sistema digestivo durante el desarrollo larval y periodo metamorfico de Physalaemus albonotatus (estadios 23-46). E: estomago; Hi: higado; In: intestino. Fotografias: camara digital Canon Power Shot A2000 IS.
Tabla 1. Datos biometricos (mm) de estadios
embrio-narios y larvales en Physalaemus albonotatus
(estadios 7 al 46).

EE      DE     LT    LHC     LC

7       0,8    --     --     --
8-9     0,8    --     --     --
10      0,9    --     --     --
11      0,9           --     --
12      0,9    --     --     --
13      --    1,0     --     --
14      --    1,0     --     --
15      --    1,1     --     --
16      --    1,3     --     --
17      --    1,3    1,0    0,3
18      --    1,6    1,1    0,5
19      --    2,2    1,5    0,7
20      --    2,8    1,4    1,4
21      --    2,9    1,6    1,4
22      --    3,2    1,4    1,8
23      --    4,5    1,8    2,7
24      --    4,5    1,9    2,5
25      --    6,2    2,8    3,5
26-29   --    9,8    4,9    4,8
30      --    9,8    4,9    4,8
31-35   --    14,4   7,0    7,4
36-40   --    19,9   9,5    10,4
41      --    21,2    11    10,2
42      --    15,9   8,3    7,5
43      --    9,6    7,5     2
44      --    7,7    7,06   0,63
45      --    7,1     --     --
46      --    12,4    --     --
COPYRIGHT 2016 Universidad Nacional del Nordeste
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2016 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Gomez, M.L.; Zaracho, V.H.; Sandoval, M.T.
Publication:Revista Veterinaria
Date:Jan 1, 2016
Words:3713
Previous Article:Hallazgo de Fasciola hepatica en bufalos faenados en Misiones (Argentina).
Next Article:Intoxicacion por Brunfelsia australis en caninos. Confirmacion mediante identificacion del vegetal en muestras biologicas.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2020 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters