Printer Friendly

Control in vitro de garrapatas (Boophilus microplus; Acari: Ixodidae) mediante extractos vegetales.

RESUMEN

Usando el metodo de inmersion, probamos el efecto de extractos vegetales hidroalcoholicos de diez plantas tropicales en garrapatas adultas (Boophilus microplus Canestrini 1887). Usamos extractos crudos hidroalcoholicos (R-OH) para determinar los compuestos mas promisorios, los que posteriormente se fraccionaron en sus partes polares y no polares. Las particiones polares de los extractos vegetales mostraron un efecto significativamente inferior que las no polares. Las mayores mortalidades se lograron con: Zizygium aromaticum, Morus alba, Piper nigrum y la mezcla de Allium sativum -- Z. aromaticum (todos no polares); sobre la oviposicion M. alba, P. nigrum y la mezcla de A. sativum--Z. aromaticum (todos no polares); sobre la eclosion P. nigrum, Z. aromaticum, Echinacea angustifolia, Poligonum punctatum, M. alba y la mezcla de A. sativum--Z. aromaticum (todos no polares); sobre el porcentaje de control P. nigrum, E. angustifolia, P. punctatum y M. alba (todos no polares, con excepcion de M. alba en el cual ambas fracciones mostraron actividad importante); sobre el porcentaje de inhibicion de la oviposicion P. nigrum, E. angustifolia, P. punctatum, Gliricidia sepium y M. alba.

Palabras clave: garrapatas, manejo integrado, extractos naturales, Boophilus microplus, Costa Rica.

Abstract: Control in vitro tick (Boophilus microplus; Acari: Ixodidae) through plant extracts. Hydro-alcohol extracts of ten tropical plants were tested by the immersion method on mature ticks (Boophilus microplus Canestrini 1887). The biological evaluation was made with raw hydro alcoholic extracts (R-OH) to determine the most promissory compounds, which later were fractioned in their polar and non-polar parts. The polar parts showed a significantly inferior effect. The species that produced the highest mortality were Zizigium aromaticum, Morus alba, Piper nigrum and the mixture of Allium sativum- Z. aromaticum (all non-polar); on oviposition: M. alba, P. nigrum and the mixture of A. sativum--Z. aromaticum (all non-polar); on eclosion: P. nigrum, Z. aromaticum, Echinacea angustiofilia, Poligonum punctatum, M. alba and the mixture of A. sativum-Z. aromaticum (all non-polar): on control percentage: P. nigrum, E. angustifolia, P. punctatum and M. alba (all non-polar, except for M. alba in which both fractions showed important activity); and finally, on the percentage of oviposition inhibition: P. nigrum, E. angustifolia, P. punctatum, Gliricidia sepium and M. alba.

Key words: ticks, integrated management, natural extract, Boophilus microplus, Costa Rica.

**********

Las garrapatas duras (ixodidae) se encuentran ampliamente distribuidas en las areas tropicales, subtropicales y templadas del planeta, donde son un serio problema economico y de salud publica. En Costa Rica y el resto de America Latina, la especie mas relevante para la ganaderia bovina es Boophilus microplus Canestrini, 1887, debido a su amplia distribucion, a los danos que ocasiona y a la transmision de enfermedades (Anonimo 1980, Nari 1995, Alvarez et al. 1999).

Diferentes metodos han sido propuestos para el control de garrapatas, pero es el quimico el que logro la mayor aceptacion por las facilidades que presenta, su efecto rapido y por el poder economico de las transnacionales (Nari 1990, de Castro 1997). La intensificacion de tales practicas alcanza su mayor apogeo en la segunda mitad del siglo XX; sin embargo, una serie de aspectos han sido cuestionados en relacion con el uso indiscriminado de los quimicos sinteticos, tales como la contaminacion, el efecto sobre las poblaciones no blanco, los peligros en la salud publica y el desarrollo de resistencia a esas sustancias por parte de las poblaciones de garrapatas (Panella et al. 1997, Kemp et al. 1998).

Ante esta situacion, se han investigado en distintas partes del mundo diferentes opciones para el control de las garrapatas, por medio de las cuales se logro demostrar la accion biocida o biostatica, con una serie de agentes controladores, entre otros, los entomopatogenos, los cuales presentan una enorme posibilidad para el manejo integrado de esta importante plaga (Lezama-Gutierrez et al. 1995, Kocan et al. 1998, Samish et al. 1998, Zhioua et al. 1999). Asimismo otros investigadores han evaluado sustancias de origen vegetal y han encontrado actividad importante en el control de algunas de las especies de importancia pecuaria (Olusegun y Ndungu 1991, Panella et al. 1997, Monteiro et al. 1998, Huerta-Paniagua et al. 1999a, Huerta-Paniagua et al. 1999b).

Dentro de las metodologias que se han utilizado para verificar la actividad biologica de extractos de plantas, esta la de los ensayos biodirigidos, la cual permite direccionar su utilizacion, conforme se van obteniendo los resultados preliminares.

Inicialmente las evaluaciones biologicas se realizan con extractos crudos hidroalcoholicos, a una maxima concentracion. En este tipo de extracto (R-OH) se supone estan contenidas aquellas moleculas o sustancias que por su potencial genetico y fenotipico la planta puede producir, acumular o exhibir; y ademas, puedan manifestar alguna actividad biologica. Como siguiente paso, e independientemente de los resultados, los extractos crudos se particionan con un solvente de polaridad intermedia (diclorometano), con lo que se obtiene una parte polar y otra parte no polar. Esto se realiza para conjuntar los posibles grupos de metabolitos y verificar nuevamente la actividad biologica que alguna de las dos particiones pueda manifestar.

La accion de las sustancias garrapaticidas puede ser evaluada por su efecto sobre las poblaciones adultas o incluir otros estadios. Un ejemplo de lo anterior son los inhibidores de desarrollo y los reguladores de crecimiento (Nari 1990, Blagburn y Lindasy 1995). Otros indicadores reproductivos de gran valor en las diferentes mediciones de las poblaciones de garrapatas son la oviposicion y la eclosion.

El objetivo de esta investigacion fue evaluar el efecto biocida o biostatico sobre diferentes estados de desarrollo de las garrapatas B. microplus, mediante ensayos biodirigidos de extractos hidroalcoholicos (R-OH) y particiones (polares y no polares) de diferentes plantas.

MATERIALES Y METODOS

Material biologico: se utilizaron garrapatas B. microplus para infestar terneros Bos taurus de 4-6 meses de edad, en condiciones de aislamiento en establo. Las garrapatas repletas se desprendian por si solas, eran recolectadas, lavadas y una vez revisadas se seleccionaban para evitar individuos malformados o danados. Estas se pesaban y se homogenizaban en cuanto a peso para que no existieran diferencias mayores a 20 mg entre cada una de las repeticiones para hacer las comparaciones. Todas las teleoginas se obtuvieron de infestaciones artificiales sobre animales estabulados.

Extractos vegetales: se seleccionaron diez plantas promisorias con base en revisiones bibliograficas e investigaciones realizadas con anterioridad y ademas se incluyo la evaluacion de un producto comercial a base de canela (Weniger y Robineau 1986, Echeverri 1988, Munich 1988, Sagreda 1991, Bhushan 1992, Mejia 1997, Frenk et al. 2001). Se recolecto el material vegetal, el cual fue identificado desde el punto de vista taxonomico; despues de secado y molido cada parte se coloco a extraccion utilizando como solvente ethanol al 95 % y agua, en una relacion de 80:20, respectivamente. Quince dias despues se filtro el liquido y se concentro en un rotavapor hasta obtener el primer extracto R-OH. Como primer paso se evaluaron los extractos hidroalcoholicos (R-OH) obtenidos de las plantas mostradas en el Cuadro 1.

Una vez evaluada la actividad de los extractos crudos, se seleccionaron de acuerdo con los resultados, continuando con los mas promisorios (aquellos que mostraron un efecto superior al 50 % de la actividad). Posteriormente, los extractos R-OH se particionaron utilizando diclorometano, solvente de polaridad intermedia; con el que se obtuvieron dos fracciones, una polar y otra no polar, a las que se les elimino el solvente en un rotavapor con el fin de realizar evaluaciones biologicas.

Ensayos in vitro: se realizo un tamizaje de las sustancias para determinar cuales tenian un potencial mas promisorio como acaricidas. En el ensayo se determinaron los siguientes parametros: mortalidad de teleoginas, peso de oviposicion, porcentaje de eclosion (%E) y para algunas de las sustancias evaluadas, fue posible determinar el porcentaje de inhibicion de la oviposicion (%IO) y el porcentaje de control (%C). Despues de establecer cuales eran las sustancias que manifestaban los mejores resultados, se prepararon diluciones 1:1 con las mejores de ellas, para estimar la actividad potencial de dicha dilucion.

Se colocaron en cada ensayo grupos de 30-40 garrapatas, divididas en subgrupos de diez en placas de petri, las cuales eran seleccionadas y pesadas segun los criterios expuestos anteriormente. A continuacion se aplico la prueba de inmersion de adultas, segun Drummond (1967). Una vez expuestas al producto se colocaban en una estufa a una temperatura (T) de 28 [grados]C ([+ o -] 1 [grados]C) y una humedad relativa (HR) de 95 %. Con las hembras repletas de los grupos control se efectuaba el mismo procedimiento pero en agua corriente y posteriormente se colocaban bajo las mismas condiciones de T y HR citadas. La mortalidad diaria se anoto en una plantilla disenada para tal proposito hasta el dia diez pos tratamiento.

El dia 11 posterior al inicio de oviposicion, se sacaba la teleogina y se pesaban los huevos, los cuales se colocaban en un vial tapado con algodon, el cual se colocaba en las mismas condiciones de T y HR arriba descritas. Una vez eclosionadas las larvas se eliminaban por medio de calor (45 [grados]C) y se establecia el porcentaje de eclosion, asumiendo el dato aceptado de que en un gramo hay 20 000 huevos. Todos estos datos se introducian en una base de datos para su posterior analisis.

Analisis de los datos: los datos fueron almacenados en un archivo de Epiinfo Version 6.04b (Center for disease Control (CDC). World Health Organization). Las variables de respuesta fueron las siguientes: porcentaje de mortalidad, oviposicion, %E, porcentaje de control (%C) y % de inhibicion de la oviposicion (%IO). Luego estas variables fueron transformadas a eficacia en mortalidad (EM), eficacia en la reduccion de la oviposicion (ERO) y eficacia en la reduccion de la eclosion (ERE) segun las directrices regulatorias europeas para preparaciones ectoparasiticas (Thrusfield et al. 1997).

Para la primera modificacion y luego de los diez dias de tratamiento, se calculo previamente la supervivencia de garrapatas, tanto de los controles como de los grupos experimentales, de la siguiente manera:

Supervivencia= (Garrapatas vivas/total garrapatas)x100

Luego se calculo la eficacia de la mortalidad del grupo control y de cada tratamiento con la siguiente formula:

EM = (% supervivencia gc- % supervivencia gt)/ % supervivencia gc) x 100 En donde: gc = grupo control gt = grupo tratado

La eficacia de los diferentes extractos fue evaluada a traves de tres parametros: la mortalidad de teleoginas de B. microplus; la reduccion de la oviposicion (reduccion de la relacion huevos garrapatas) y la disminucion de la eclosion.

La eficacia fue calculada mediante la siguiente formula:

% eficacia = C-T/Cx100

En donde:

C=promedio o porcentaje del grupo control

T=promedio o porcentaje del grupo tratado

El porcentaje de eclosion se establecio por medio de la siguiente formula:

% E=C/H+Cx100

En donde: C=cascarones, H=huevos

Para calcular la eficacia en la reduccion de la oviposicion, se obtuvo primero el numero de huevos por gramo de garrapata (HGG=peso de huevos/peso de garrapatas)* 20 000 de cada ensayo. Luego se calculo la ERO con la formula:

ERO=((HGG gc-HGG gt)/HGG gc)/100

Para calcular la ERE primero se obtuvo el porcentaje de huevos eclosionados por gramo de garrapata (% HEPGG) de la siguiente forma:

(HGG*% eclosion)/100

Luego se calculo la ERE=((%HEPGG gc - % HEPGG gt)/% HEPGG gc)*100.

Una vez calculados la EM, la ERO y la ERE, se realizaron comparaciones de cada una de las proporciones calculadas.

Los calculos de % IO y % C se hicieron segun se indica en el Curso Taller sobre Diagnostico de Resistencia a ixodicidas en garrapatas Boophilus microplus (Anonimo 2001).

RESULTADOS

Efecto de los extractos sobre la mortalidad: los resultados de eficacia de los diferentes extractos R-OH y sus diluciones, sobre la mortalidad de garrapatas repletas B. microplus se observan en el Cuadro 2.

En este grupo sobresale el efecto del extracto 101 (canela) el cual expreso un 100 % de mortalidad a su concentracion maxima; sin embargo, la actividad disminuyo casi totalmente (2.18 %) cuando se evaluo en una dilucion 1:1 en agua. Pudo haber un enmascaramiento o antagonismo de aquel o aquellos mebatolitos que inicialmente manifestaron actividad los cuales al hacer la dilucion, por algun efecto de concentracion, fueron bloqueados o diluidos. Otro extracto, que manifesto un buen porcentaje de mortalidad (68 %), fue el 046 (morera); el cual ademas presento una tendencia esperada, ya que el porcentaje de inhibicion de la mortalidad fue de 36 % cuando se evaluo en una dilucion de 1:1 partes de agua, respectivamente.

Los resultados de la eficacia de las particiones (polar y no polar) sobre la mortalidad se presentan en la Fig. 1 y 2. En la Fig. 1, donde se agrupan los mejores resultados de los extractos y sus diluciones polares, ninguno de ellos alcanzo una actividad promisoria (igual o mayor al 50 %) sobre la mortalidad de teleoginas.

En la Fig. 2 se agrupan los resultados de los extractos no polares y se encontro que el 003/1:1 (pimienta negra) y el 009/1:1 (clavo de olor) presentaron la eficacia mas alta, aunque no mostraron diferencias estadisticas significativas entre si; no obstante, si hubo diferencias estadisticas con los demas extractos analizados. La eficacia de los extractos 003/puro y 046/ puro fue igual entre ambos, pero diferente a los demas. La eficacia menor se detecto en los extractos 058/1:1 (mezcla de ajos y clavo de olor) y 046/1:1. En los demas extractos y concentraciones estudiados la eficacia fue menor del 50 %.

Efecto de los extractos sobre la reduccion de la oviposicion: en el Cuadro 3 se observa que los extractos R-OH puros y sus diluciones 1:1, tanto del 046 (morera) y del 003 (pimienta negra) manifestaron una actividad promisoria de 74 y 57 %; y 66 % y 44 % respectivamente, sobre la oviposicion de teleoginas de B. microplus, con lo cual se constituyen como los mas promisorios y con una tendencia esperada segun el efecto de dilucion. No se encontraron diferencias significativas entre ellos. La actividad ovicida de los extractos polares se presenta en la Fig. 3 en la cual, solo el extracto polar 046 (morera) en la dilucion 1:1 mostro un resultado superior al 50 % de efectividad.

En la Fig. 4, por el contrario, se observa que una serie de extractos y sus diluciones mostraron un efecto ovicida superior al 50 %. Los extractos 003/1:1, 058/1:1, 003/puro y 046/ puro no tuvieron entre si diferencias estadisticas significativas, pero si con el resto, el cual no mostro diferencias entre si.

Efecto de los extractos sobre la reduccion de la eclosion: segun el Cuadro 4, no fueron localizadas moleculas o sustancias en la parte polar de los extractos probados que manifiesten una actividad promisoria para el control de la eclosion.

Una vez mas, los resultados muestran una muy importante actividad sobre uno de los indicadores reproductivos de la garrapata en la parte no polar de los extractos probados. Segun el Cuadro 5 la actividad promisoria sobre la eclosion se concentra en los extractos no polares 003, 058, 046, 031, 018 y 009.

Porcentaje de control: para determinar el porcentaje de control de B. microplus, se utilizaron los extractos 003, 018, 031, 027 y 046, los cuales fueron dispuestos en cuatro clases segun el nivel de control (Fig. 5). En la clase de control de 76-100 % se ubico al extracto 003 con las particiones no polares desde pura hasta la dilucion de 1:40; el extracto 018 no polar en las diluciones pura hasta 1:10; la 031 no polar en las concentraciones pura y 1:1 y la 046 no polar en las concentraciones pura, 1:20 y 1:40 y polar 1:20 y 1:40. En la clase 51-75 % se ubico a la particion no polar del extracto 046 en la concentracion 1:1; a la particion ROH de la 046 en las concentraciones pura y 1:1; a la particion 031 polar en la concentracion pura. El resto de particiones entre las que se encuentran polares, no polares y ROH de diferentes concentraciones si acaso alcanzaron el 50 % de porcentaje de control. Entre las sustancias que estan en esa situacion hay extractos de las plantas 018, 031, 046 y 051.

[FIGURA 5 OMITIR]

Porcentaje de inhibicion de la oviposicion: para la prueba de inhibicion de la oviposicion se utilizaron 003, 018, 027, 031 y 046. Del extracto 003, se utilizo la particion no polar desde pura hasta la dilucion de 1:80, de la particion polar de 1:40 a 1:80. Del extracto 018 solo se utilizo la particion no polar de pura hasta la dilucion de 1:20. De los extractos 031, 027 y 046 se utilizaron las dos particiones desde puras hasta 1:40. Ademas del extracto 046 se utilizo la ROH pura hasta 1:10.

Los primeros ocho extractos presentados en la Fig. 6, tuvieron resultados entre 99.7 % y 94.4 % de inhibicion de oviposicion; estos no presentaron diferencias estadisticas significativas entre ellos. Los extractos 018/pura, 031/pura y 046/pura presentaron resultados menores (p<0.05).

De los resultados de inhibicion de la oviposicion obtenidos con los otros extractos, se pudieron diferenciar dos grupos, el primero con actividad intermedia de 77.15 % a 50.95 % y el segundo con actividad inferior de 44.4 % a 0 %.

En el grupo de actividad intermedia se ubican los extractos 018 con la particion polar y dilucion 1:1; 027 particion no polar pura; 031 con la particion polar y dilucion 1:1, 046 con la particion no polar 1:1 y la fraccion ROH pura. Este grupo presento una diferencia estadistica significativa con los extractos presentados en la Fig. 6 (p<0.05) y con los del grupo de actividad inferior (p<0.05).

DISCUSION

Como se observa en el Cuadro 2 que los extractos hidroalcoholicos 101 y 046 a la maxima concentracion mostraron una actividad mayor al 50 % sobre la mortalidad de teleoginas. Esto permite inferir que en los extractos R-OH de estas plantas estan presentes moleculas o sustancias que ejercen algun efecto promisorio para el control de este parasito.

No es factible, segun los objetivos del trabajo, determinar los motivos por los cuales la sustancia 003 en la dilucion mas debil, mostro un mejor resultado en cuanto a mortalidad; sin embargo, lo anterior pudo deberse a algun antagonismo o enmascaramiento producto de la presencia de diferentes moleculas o sustancias en el extracto crudo. En la particion polar 046 se ubico una situacion similar a la descrita anteriormente en la cual una concentracion mas debil manifiesta una accion mas fuerte; sin embargo, estadisticamente no significo diferencia alguna.

En la literatura se reportan investigaciones realizadas en Colombia con Poligonum spp. y Capsicum spp. En el caso de Capsicum spp. para el parametro mortalidad los resultados fueron superiores a los logrados en esta investigacion; sin embargo, no alcanzaron el 50 % de efectividad. En relacion con Poligonum spp. los indicadores de mortalidad reportados en este trabajo fueron iguales a los obtenidos por los investigadores colombianos por medio del metodo Soxhlet (25 %). (Anonimo 2004).

Como paso siguiente de la investigacion se evaluaron particiones de los extractos R-OH. La evaluacion de particiones permite en ocasiones observar algun enmascaramiento o antagonismo de los metabolitos o bloqueo de otro tipo (resinas, taninos etc) que impide la manifestacion de actividad en los extractos R-OH.

Los extractos polares concentran metabolitos secundarios de naturaleza polar. Segun la Fig. 1, en esta particion no se encontraron moleculas o sustancias que mostraran actividad mayor al 50 % de eficacia sobre la mortalidad; sin embargo, si es clara la presencia, aunque evidentemente debil, de algunos metabolitos con cierto nivel de accion sobre las teleoginas.

Los resultados de las evaluaciones con las particiones no polares muestran, segun la Fig. 2, que los extractos 009, 003, 046, 058, 018 evaluados a la concentracion maxima mostraron actividad mayor al 50 %. inclusive cuando se evaluaron diluciones de estos extractos, se obtuvieron resultados promisorios mayores al 50 % de mortalidad.

Chungsamarnyart et al. (1991), describieron la actividad larvicida de un extracto alcoholico de Streblus asper Lour. una planta de la familia Moraceae, al igual que la morera (046), e indican que este tuvo un efecto relativamente alto sobre la mortalidad (71-85 %).

Chungsamarnyart et al. (1994), indicaron sobre la elevada pero lenta actividad acaricida de Piper nigrum (003) en combinacion con otros extractos de plantas, mostrando un importante sinergismo. En el presente estudio los extractos fueron aplicados sin ningun sinergista o alguna otra sustancia que pudiera potencializar los metabolitos presentes en el extracto, a traves de una mejor absorcion como producto de una mayor permeabilizacion o de otro mecanismo de interiorizacion.

En comparacion con las particiones polares, se observa que las principales moleculas con una actividad promisoria sobre la mortalidad, estan presentes en la parte no polar de los extractos vegetales probados. Se nota que los extractos hidroalcoholicos 009, 003, 058, y 018 que no habian manifestado una actividad promisoria en su evaluacion como R-OH, al realizar las particiones, presentaron un posible desenmascaramiento de los metabolitos responsables de la actividad, y de esa forma si manifestaron una actividad importante en cuanto a la mortalidad de teleoginas B. microplus, particularmente las fracciones no polares.

En resumen, la mortalidad de teleoginas de B. microplus con algunos extractos probados mostro efectos importantes a tomar en cuenta, en especial las particiones no polares. Un nuevo paso en la evaluacion de moleculas promisorias para el control de las garrapatas consiste en determinar el potencial de su capacidad ovicida. Nuevamente la evaluacion de la capacidad ovicida de extractos vegetales se inicia con los extractos hidroalcoholicos R-OH, en los cuales estan presentes todas las posibles moleculas acumuladas por la planta.

El efecto ovicida observado en la parte polar evaluada de estos extractos, muestra solamente actividad mayor al 50 % para el extracto 046; sin embargo, otras particiones polares como la 031 y la 058 mostraron un potencial ovicida importante, con lo cual se podria esperar la presencia de algunas moleculas con accion sobre este parametro reproductivo en esta parte de los extractos. El efecto o la actividad de mayor peso sobre este indicador reproductivo de las garrapatas se localiza en la parte no polar de los extractos de las plantas.

Los indicadores de %C y %iO fueron excelentes en algunas de las sustancias, particiones y concentraciones probadas. Los resultados con el Poligonum spp. obtenidos en el presente estudio, son muy superiores a los conseguidos por los investigadores de Corpoica (2004).

Una serie de extractos utilizados en el presente estudio, mostraron actividad promisoria sobre al menos algun parametro de referencia importante en la vida de las garrapatas B. microplus; sin embargo, no fue posible realizar una mayor discusion sobre los diferentes extractos obtenidos de varias plantas debido a que no se cuenta con informacion previa sobre el efecto de estas.

Los resultados muestran de forma clara el efecto in vitro de varias sustancias de origen vegetal sobre distintos estadios del desarrollo de las garrapatas B. microplus, lo que provoco mortalidad en los adultos y disminuyo, en algunos casos de manera sensible la oviposicion o provocaron una merma considerable en el porcentaje de eclosion de los huevos depositados por las teleoginas.

Es necesario por tanto, profundizar aun mas estos resultados preliminares para poder conocer cuales podrian ser las moleculas implicadas, el efecto in vivo sobre las poblaciones de garrapatas, el efecto sobre estadios inmaduros, la persistencia de los diferentes metabolitos, las dosis letales ([DL.sub.50]), etc., sin olvidar aspectos ambientales como el efecto sobre poblaciones no blanco y, por supuesto, lo relacionado con los residuos en productos de consumo humano.

AGRADECIMIENTOS

A Jose Cascante por su apoyo en el laboratorio. A Jorge Briceno y Marco Herrero por sus comentarios. A Sara Valverde por su revision de estilo. A Dagoberto Mendez por su colaboracion.

Recibido 25-VIII-2006.

Corregido 16-V-2007.

Aceptado 27-VII-2007.

REFERENCIAS

Alvarez, V., R. Bonilla & i. Chacon. 1999. Determinacion de la resistencia de la garrapata Boophilus microplus (Acari: ixodidae) a organofosforados y piretroides en Costa Rica. Rev. Cien. Vet. 22: 41-60.

Anonimo. 1980. informe Final Proyecto Estudio de Factibilidad para el Control de la Garrapata. Ministerio de Agricultura y Ganaderia, Direccion de Salud Animal, San Jose, Costa Rica.

Anonimo. 2001. Calculo de parametros biologicos de la prueba biologica y bioensayos con concentraciones multiples (Probit), p. 33-34. In M. Santamaria & N. Soberanes (eds.). Curso--Taller sobre Diagnostico de Resistencia a ixodicidas en Garrapatas Boophilus microplus. SAGARPA, Jiutepec, Morelos, Mexico.

Anonimo. 2004. Corpoica. informe Tecnico. Evaluacion y Validacion de la Medicina Herbaria en el Control de Parasitos Externos de Bovinos para Pequenos Productores de las Zonas de Ladera Calida y Media de los Departamentos del Cauca y del Valle del Cauca. Corpoica, Palmira, Valle del Cauca, Bogota, Colombia.

Bhushan, M.N. 1992. Handbook of Natural Pesticides: Methods, Vol. ii isolation and identification. CRC, Boca Raton, Florida, EEUU.

Blagburn, B. & D. Lindsay. 1995. Ectoparasiticides, p. 984-1003. In H. Richard Adams (ed.). Veterinary Pharmacology and Therapeutics. iowa State University, Ames, iowa, EEUU.

Chungsamarnyart, N., S. Jiwajinda & W. Jansawan. 1991. Larvicidal Effect of Plant Crude-extracts on the Tropical Cattle Tick (Boophilus microplus). Kasetsart J. (Nat. Sci. Suppl.) 25: 80-89.

Chungsamarnyart, N., C. Ratanakreetakul & W. Jansawan. 1994. Acaricidal Activity of the Combination of Plant Crude--extracts to Tropical Cattle Tick. Kasetsart J. (Nat. Sci.) 28: 649-660.

De Castro, J. 1997. Sustainable tick and tickborne disease control in livestock improvement in developing countries. Vet. Parasitology 71: 77-97.

Drummond, R.O., O.H. Graham, S.E. Ernst & J.L. Trevino. 1967. Evaluation of insecticides for the control of Boophilus annulatus (Say) and Boophilus microplus (Canestrini) (Acari: ixodidae) on cattle, p. 493- 498. In Proccedings, 2nd international Congress of Acarology. Akademia Kiado, Budapest, Hungria.

Echeverri, L.F. 1988. Productos naturales biologicamente activos. Universidad de Antioquia, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Centro de investigaciones, Medellin, Colombia.

Frenk, M.J., B.R. Ruelas, C.R. Tapia, R.R. Castanon & G.A. Lifshitz. 2001. Farmacopea Herbolaria de los Estados Unidos Mexicanos. Secretaria de Salud, Comision permanente de la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, Mexico D.F., Mexico.

Huerta-Paniagua, R.A., C. Rodriguez-Hernandez & J.A.S. Villagomez-Cortes. 1999a. Evaluacion de la actividad del cundeamor (Momordica charantia L.) (Cucurbitaceae) sobre Boophilus microplus (Canestrini), p. 120. In G. Morales, H. Fragoso & Z. Garcia (eds.). Cuarto Seminario internacional de Parasitologia Animal, Pto. Vallarta, Jalisco, Mexico.

Huerta-Paniagua, R.A. & C. Rodriguez-Hernandez. 1999b. Evaluacion de la actividad de extractos acuosos del nim (Azadirachta indica (L.) Juss.) (Meliaceae) sobre Boophilus microplus (Canestrini), p. 121. In G. Morales, H. Fragoso & Z. Garcia (eds.). Cuarto Seminario internacional de Parasitologia Animal, Pto. Vallarta, Jalisco, Mexico.

Kemp, D., F. Thullner, K. Gale, A. Nari & G. Sabatini. 1998. Report to the Animal Health Services, AGAH, FAO, CSiRO, Sidney, Australia.

Kocan, K.M., E.F. Blouin, M.S. Pidherney, P.L. Claypool, M. Samish & i. Glazer. 1998. Entomopathogenic nematodes as a potential biological control method for ticks, p. 355-364. In F. Jongejan, W. Goff & E. Camus (eds.). Tropical Veterinary Medicine. Molecular epidemiology, hemoparasites and their vectors, and general topics. Society for Tropical Veterinary Medicine, Nueva York, Nueva York, EEUU.

Lezama-Gutierrez, R., E. Galindo-Velazco & F. Cruz- Cobian. 1995. Effectiveness of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae in the biological control of ticks in bovine livestock, in field conditions, p. 145. In S. Rodriguez & H. Fragoso (eds.). Tercer Seminario internacional de Parasitologia Animal, Acapulco, Guerrero, Mexico.

Mejia, G.M. 1997. Saber popular y medicina veterinaria herbolaria. Mi nuevo Mundo, Corporacion para la Educacion Especial, Cali, Colombia.

Monteiro, S.G., M.E. Carneiro, V.R.E.P. Bittencourt & E. Daemon. 1998. Efeito do isolado 986 do fungo Beauveria bassiana (Bals) Vuill sobre femeas ingurgitadas de Anocentor nitens Neumann, 1897 (Acari: ixodidae). Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 50: 673-376.

Munich, L.E. 1988. Plantas con Propiedades Plaguicidas. Centro de Documentacion CATIE-MIP-DPV, Turrialba, Alajuela, Costa Rica.

Nari, A. 1990. Methods currently used for the control of one-host ticks: their validity and proposals for future control strategies. Parassitologia 32: 133-143.

Nari, A. 1995. Strategies for the control of one-host ticks and relationship with tick-borne diseases in South America. Vet. Parasitol. 57: 153-165.

Olusegun, D. & J.N. Ndungu. 1991. Acaricidal activity of Kupetaba, a ground mixture of natural products, against Rhipicephalus appendiculatus. Vet. Parasitology 38: 327-338.

Panella, N.A., J. Karchesy, G.O. Maupin, J.C.S. Malan & J. Piesman. 1997. Susceptibility of inmature Ixodes scapularis (Acari: ixodidae) to plant-derived acaricides. J. Med. Entomol. 34: 340-345.

Sagreda, F.J. 1991. Enciclopedia de Medicina Natural: Medicinas Alternativas. Zamora, Bogota, Colombia.

Samish, M., E. Alekseev & Y. Glazer. 1998. The effect of soil composition on anti-tick activity of entomopathogenic nematodes, p. 402-403. In Tropical Veterinary Medicine. Molecular epidemiology, hemoparasites and their vectors, and general topics. Society for Tropical Veterinary Medicine, Nueva York, Nueva York, EEUU.

Thrusfield, M.V. 1997. The Design and Conduct of Clinical Trials. Defining Efficacy. Efficacy of ectoparasitic preparations, p. 225-246. In J.P.T.M. Noordhuizen, K. Frankena, C.M. Van der Hoofd & E.A.M. Graat. Application of Quantitative Methods in Veterinary Epidemiology, Wageningen, Holanda.

Weniger, B. & L. Robineau. 1986. investigaciones Cientificas y uso popular de plantas medicinales en el Caribe. Seminario TRAMiL, Santo Domingo, Republica Dominicana.

Zhioua, E., K. Heyer, H. Ginsberg & R. Lebrun. 1999. Control microbiologico de garrapatas, p. 177. In G. Morales, H. Fragoso & Z. Garcia (eds.). Cuarto Seminario internacional de Parasitologia Animal, Pto. Vallarta, Jalisco, Mexico.

Victor Alvarez (1), Jorge Loaiza (2), Roberto Bonilla (1) & Mariano Barrios (2)

(1) Ministerio de Agricultura y Ganaderia, Servicio Nacional de Salud Animal, 11965-1000, San Jose, Costa Rica; viacal@racsa.co.cr; rbonilla@protecnet.go.cr

(2) Universidad Nacional, Escuela de Quimica, Heredia, Costa Rica; jloaiza@una.ac.cr; mbarrios@una.ac.cr
CUADRO 1
Plantas evaluadas para el control de las garrapatas

TABLE 1
Plants evaluated for tick control

Codigo     Nombre cientifico                  Nombre vulgar

LOA 003    Piper nigrum                       Pimienta negra

LOA 009    Zizygium aromaticum                Clavo de olor

LOA 015    Petiveria aliaceae                 Zorrillo, anamu

LOA 018    Echinacea angustifolia             Echinacea

LOA 022    Piper aduncum                      Alcotam

LOA 026    Capsicum sp.                       Chile picante

LOA 027    Gliricidia sepium                  Madero negro

LOA 031    Poligonum punctatum                Chile perro

LOA 046    Morus alba                         Morera

LOA 058    Allium sativum - Z. aromaticum     Ajo x clavo de olor
           (50:50)

101        Cinnamomum zeylanicum              Canela

Codigo     Familia                   Parte de la planta utilizada

LOA 003    Piperaceae                Espigas

LOA 009    Myrtaceae                 Botones florales

LOA 015    Phytolaccaceae            Raiz

LOA 018    Asteraceae                Raiz

LOA 022    Piperaceae                Hojas

LOA 026    Solanaceae                Frutos

LOA 027    Leguminoceae              Raiz

LOA 031    Polygonaceae

LOA 046    Moraceae                  Raiz

LOA 058    Liliaceae y myrtaceae     Fruto y botones florales

101        Lauraceae                 Producto comercial

CUADRO 2
Eficacia de los extractos vegetales (ROH) in vitro sobre la
mortalidad de teleoginas de B. microplus

TABLE 2
Effectiveness of the plant extracts (ROH), in vitro, on the
mortality of adult B. microplus females

Extracto   Dilucion   Ensayos   Garrapatas   Porcentaje    Valor p (1)
                                  Totales     eficacia

003          Pura        9          96          22.74           d
003          1:1         5          50          40.28           c
015          Pura        8          80          23.72           d
015          1:1         5          50           3.64           e
018          Pura        9          90          31.62          cd
018          1:1         5          50           4.95           e
022          Pura        9          90          15.32          de
022          1:1         5          50           1.31           f
026          Pura        8          80          11.22           e
026          1:1         5          50           3.64          ef
027          Pura        8          80           9.75          ef
027          1:1         5          50           7.30          ef
046          Pura        4          40          67.88           b
046          1:1         4          40          35.75          cd
101          Pura        5          50            100           a
101          1:1         9          90           2.18           f
003          Pura        9          96          22.74           d
003          1:1         5          50          40.28           c
015          Pura        8          80          23.72           d
015          1:1         5          50           3.64           e
018          Pura        9          90          31.62          cd
018          1:1         5          50           4.95           e
022          Pura        9          90          15.32          de
022          1:1         5          50           1.31           f
026          Pura        8          80          11.22           e
026          1:1         5          50           3.64          ef
027          Pura        8          80           9.75          ef
027          1:1         5          50           7.30          ef
046          Pura        4          40          67.88           b
046          1:1         4          40          35.75          cd
101          Pura        5          50            100           a
101          1:1         9          90           2.18           f

(1) Las letras significan diferencias estadisticas entre
los valores de eficacia.

CUADRO 3
Eficacia de los extractos vegetales R-OH in vitro en reduccion
de la oviposicion de B. microplus

TABLE 3
Effectiveness of R-OH plant extracts, in vitro, on reduction
of B. microplus oviposition

                                             Porcentaje
Extracto   Dilucion   Ensayos   Garrapatas    eficacia    Valor p (1)

003          Pura        9          96         65.60           a
003           1:1        4          40         43.83           b
015          Pura        8          80         28.50          bc
015           1:1        5          50         18.70           c
018          Pura        9          90         33.31           b
018           1:1        5          50         12.12           c
022          Pura        9          90         34.10           b
022           1:1        5          50          6.80           c
026          Pura        8          80         15.38           c
026           1:1        5          50         11.81           c
027          Pura        8          80         16.60           c
027           1:1        5          50         17.08           c
046          Pura        4          40         74.37           a
046           1:1        4          40         56.72          ab
101           1:1        9          90         14.40           c

(1) Las letras significan diferencias estadisticas entre
los valores de eficacia.

CUADRO 4
Eficacia de los extractos vegetales polares in vitro en la
reduccion de la eclosion de B. microplus

TABLE 4
Effectiveness of polar plant extracts, in vitro, on the
reduction of B. microplus hatchability

                                              Porcentaje
Extracto   Dilucion   Ensayos   Garrapatas     eficacia     Valor p (1)

009          Pura        10        100             0            c
009          1:1         10        100             0            c
031          Pura        18        180           22.45          a
031          1:1         18        180            8.14          b
046          Pura         4         40             0            b
046          1:1          4         40             0            b
058          Pura         7         70           18.73          a
058          1:1          8         80             0            c

(1) Las letras significan diferencias estadisticas entre
los valores de eficacia.

CUADRO 5
Eficacia de los extractos vegetales no polares in vitro en la
reduccion de la eclosion de B. microplus

TABLE 5
Effectiveness of nonpolar plant extracts, in vitro, on the
reduction of B. microplus hatchability

                                              Porcentaje
Extracto    Dilucion  Ensayos   Garrapatas     eficacia    Valor p (1)

003           Pura       6          60          99.85          a
009           Pura       9          90          75.93          b
018           Pura      28         280          81.79          b
031           Pura      16         160          84.44          b
031           1:1       13         130          72.34          b
046           Pura       4          40          85.43          b
046           1:1        4          40          71.88          b
058           Pura       8          80          79.18          b
058           1:1        6          60          98.08          a

(1) Las letras significan diferencias estadisticas entre
los valores de eficacia.

Fig. 1. Eficacia de extractos vegetales polares in vitro en
mortalidad de teleoginas de B. microplus.

Fig. 1. Effectiveness of polar plant extracts, in vitro, on
mortality of adult B. microplus females.

Extracto/dilucion   Eficacia mortalidad en %

046/1:1                       42
046/pura                      34
031/pura                      26
031/1:1                       26
058/pura                      16
018/pura                       3
009/pura                       1

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

Fig. 2. Eficacia de extractos vegetales no polares in vitro en
mortalidad de teleoginas de B. microplus.

Fig. 2. Effectiveness of no polar plant extracts, in vitro, on
mortality of adult B. microplus females.

Extracto/dilucion   Eficacia mortalidad en %

009/1:1                      100
003/1:1                       96
003/pura                      87
046/pura                      82
058/1:1                       72
046/1:1                       71
018/1:1                       51

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

Fig. 3. Eficacia de extractos vegetales polares in vitro en
reduccion de oviposicion de B. microplus.

Fig. 3. Effectiveness of polar plant extracts, in vitro, on the
reduction of B. microplus oviposition.

Extracto/dilucion       Eficacia en %

046/1:1                       53
046/pura                      47
058/pura                      46
031/pura                      44
031/1:1                       29
009/pura                      19

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

Fig. 4. Eficacia de los extractos vegetales no polares en la
reduccion de la oviposicion de B. microplus.

Fig. 4. Effectiveness of nonpolar vegetal extracts in the
reduction of B. microplus oviposition.

Extracto/dilucion       Eficacia en %

003/1:1                      100
058/1:1                       92
003/pura                      88
046/pura                      85
046/1:1                       71
018/pura                      67
031/pura                      65
058/pura                      59
009/pura                      57

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

Fig. 6. Porcentaje de inhibicion de la oviposicion, segun
extracto y dilucion.

Fig. 6. Percentage of oviposition inhibition, by extract and
dilution.

Extracto/dilucion       Porcentaje

003/1:1                     100
003/pura                    100
003/1:20                    100
003/1:10                    100
003/1:40                     99
003/1:10                     95
031/1:1                      95
027/1:1                      94
018/pura                     83
031/pura                     83
046/pura                     80

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.
COPYRIGHT 2008 Universidad de Costa Rica
No portion of this article can be reproduced without the express written permission from the copyright holder.
Copyright 2008 Gale, Cengage Learning. All rights reserved.

 
Article Details
Printer friendly Cite/link Email Feedback
Author:Alvarez, Victor; Loaiza, Jorge; Bonilla, Roberto; Barrios, Mariano
Publication:Revista de Biologia Tropical
Date:Mar 1, 2008
Words:6451
Previous Article:Reproductive biology of Hechtia schottii, a dioecious Bromeliaceae, in Mexico.
Next Article:Biodiversidad antropoentomofagica de la region de Zongolica, Veracruz, Mexico.
Topics:

Terms of use | Privacy policy | Copyright © 2018 Farlex, Inc. | Feedback | For webmasters