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Contagem, isolamento e caracterizacao de bacterias psicrotroficas contaminantes de leite cru refrigerado.

Counting, isolation and characterization of psychrotrophic bacteria from refrigerated raw milk

INTRODUCAO

Bacterias psicrotroficas sao aquelas capazes de se desenvolver em temperaturas abaixo de 7[grados]C (FRANK et al., 1992), sendo os principais agentes de deterioracao de leite cru refrigerado e de seus derivados. A acao deterioradora das bacterias psicrotroficas se deve principalmente a producao de proteases, lipases e fosfolipases, que hidrolisam respectivamente a proteina e a gordura do leite. A maioria das bacterias psicrotroficas nao sobrevive a pasteurizacao, porem, muitas de suas enzimas hidroliticas sao termorresistentes, podendo resistir mesmo ao tratamento UHT e permanecerem ativas. A presenca de enzimas termoestaveis no leite cru e especialmente prejudicial para a qualidade do leite UHT devido a sua estocagem a temperatura ambiente por longos periodos de tempo. Outros defeitos dessas enzimas incluem alteracoes de sabor e odor em diversos produtos e reducao do rendimento dos queijos (CHAMPAGNE et al., 1994; SORHOUG & STEPANIAK, 1997; CHEN et al., 2003).

O grupo de microrganismos psicrotroficos inclui bacterias gram-negativas e gram-positivas. Os principais generos isolados, em estudos conduzidos em paises de clima temperado, sao: Pseudomonas, Flavobacterium e Alcaligenes (gram-negativas), Clostridium, Microbacterium, Streptococcus, Corynebacterium, Arthrobacter e Bacillus (gram-positivas). Bacterias patogenicas como Listeria monocytogenes, Yersinia enterocolitica e algumas estirpes de Bacillus cereus isoladas de leite tambem sao psicrotroficas (SHAH, 1994; SORHOUG & STEPANIAK, 1997).

No Brasil, alguns estudos evidenciaram altas contagens de bacterias psicrotroficas em leite cru refrigerado (SOUZA et al., 1999; BRITO et al., 2002; BRUM et al., 2004; PINTO et al., 2006), mas pouco se conhece sobre a composicao desta microbiota e suas propriedades hidroliticas. Os objetivos deste trabalho foram quantificar, isolar e identificar bacterias psicrotroficas contaminantes de leite cru refrigerado na fazenda e avaliar o seu potencial de deterioracao.

MATERIAL E METODOS

Amostras de leite cru refrigerado foram coletadas de 20 tanques coletivos e 23 tanques individuais em propriedades leiteiras, na regiao da Zona da Mata, Minas Gerais (MG) e na regiao Sudeste do Rio de Janeiro, durante 15 meses. Apos a agitacao programada do tanque, foram coletados cerca de 500mL de leite utilizando-se um coletor de aco inoxidavel e frascos estereis. As amostras foram transportadas em caixa isotermica contendo gelo ate o Laboratorio de Microbiologia da Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora, MG, onde foram analisadas no mesmo dia da coleta.

Para a contagem e o isolamento, diluicoes das amostras foram plaqueadas em Plate Count Agar (Difco) e as placas foram incubadas a 7[grados]C por 10 dias (FRANK et al., 1992). Apos a contagem, foram isolada cinco colonias de cada placa em agar Nutriente (Difco), que foram incubadas a 21[grados]C por 24 horas para identificacao.

Primeiramente os isolados bacterianos foram avaliados quanto a morfologia celular, a reacao de Gram, metabolismo oxidativo e/ou fermentativo da glicose (OF), a producao de oxidase e catalase, ao crescimento em Agar MacConkey (Difco), a motilidade e a presenca de esporos (BARROW & FELTHAN, 1995), para definir o sistema API de identificacao (BioMerieux, Marcy l'Etoile, Franca) a ser usado. A seguir, as bacterias gram-negativas foram identificadas por genero ou especie empregando-se os sistemas API 20E e API 20NE e as bacterias gram-positivas empregando-se os sistemas API Staph, API Coryne e API 50 CH, de acordo com as orientacoes do fabricante. Os sistemas API foram repetidos para 50% dos isolados para garantir a identificacao.

A capacidade de produzir proteases foi determinada em agar caseinato (Merck) e de produzir lipases, em agar tributirina, segundo FRANK et al. (1992), com incubacao a 4[grados]C, 7[grados]C e 10[grados]C durante 10 dias e a 21[grados]C durante tres dias. A proteolise e a lipolise sao evidenciadas por uma zona clara ao redor da colonia.

RESULTADOS E DISCUSSAO

Contagem de bacterias psicrotroficas

O numero de bacterias psicrotroficas presentes no leite cru esta relacionado as condicoes higienicas na producao e ao tempo e a temperatura em que o leite e armazenado. Uma contagem baixa de psicrotroficos no leite e de fundamental importancia para sua qualidade, pois a atividade metabolica desses microrganismos resulta em alteracoes bioquimicas nos constituintes do leite que limitam a vida de prateleira dos produtos lacteos.

As contagens de bacterias psicrotroficas nas amostras de leite para os dois tipos de tanques de refrigeracao variaram entre [10.sup.2] e [10.sup.7] Unidades Formadoras de Colonias (UFC) [ml.sup.-1]. A maioria dos tanques individuais apresentou contagens inferiores a 1 x [10.sup.5]UFC [ml.sup.-1] e a maioria dos tanques coletivos apresentou contagens acima deste valor. Esses dados indicam que em muitas propriedades houve deficiencia nas praticas higienicas e a mistura de materia-prima de diversos produtores em tanques coletivos aumentaram os riscos, comprometendo a qualidade final do produto.

Contagens semelhantes de psicrotroficas tambem foram encontradas por PINTO et al. (2006) para leite de fornecedores de uma industria de laticinios localizada na Zona da Mata Mineira. Nas 33 amostras de leite coletadas de tanques individuais, as contagens variaram de 2,0 x [10.sup.2] a 1,0 x [10.sup.7]UFC/ml, e para 12 tanques coletivos, de 8,9 x [10.sup.2] a 3,2 x [10.sup.6]UFC/ml.

Os resultados apresentados indicam que ha propriedades em que as contagens de bacterias psicrotroficas sao muito altas, especialmente em tanques coletivos. Portanto, treinamentos devem ser direcionados para a melhoria das condicoes de higiene de ordenha e de armazenamento do leite para essas propriedades.

Identificacao e caracterizacao das bacterias psicrotroficas

Das 43 amostras de leite cru refrigerado coletadas nas propriedades rurais, foram isoladas uma levedura e 308 bacterias psicrotroficas, sendo 250 (81,2%) gram-negativas e 58 (18,8%) gram-positivas (Tabela 1). A maioria (161) das bacterias gram-negativas foi identificada a especie: Pseudomonas fluorescens (94), Pseudomonas putida (tres), Aeromonas hydrophila (20), Aeromonas sobria (uma), Aeromonas caviae (uma), Burkholderia cepacia (12), Klebsiella oxytoca (10), Ewingella americana (sete), Hafnia alvei (sete), Chryseomonas luteola (tres), Alcaligenes feacalis (uma), Methylobacterium mesophilicum (uma), Sphingomonas paucimobilis (uma). 84 bacterias foram identificadas a genero: Pseudomonas (11), Acinetobacter (39), Pantoea (17), Aeromonas (cinco), Moraxella (quatro), Serratia (tres), Yersinia (dois), Klebsiella (um), Enterobacter (um) e Methylobacterium (um). Cinco bacterias nao foram identificadas por meio do API 20E e API 20NE, que apresentaram resultados como "baixa discriminacao, duvidoso ou inaceitavel". Pseudomonas foi o genero mais isolado (43%), sendo P. fluorescens a especie predominante (37,6%). Esses resultados estao coerentes com os de outras pesquisas, que constataram predominio desse genero/especie em leite cru (JAYARAO & WANG, 1999; HOLM et al., 2004; ALATOSSAVA & ALATOSSAVA, 2006; PINTO et al., 2006). A maior ocorrencia de P. fluorescens pode ser associada ao seu menor tempo de geracao a temperaturas de refrigeracao e tambem a sua habilidade em formar biofilme em superficies de equipamentos e utensilios (JAYARAO & WANG, 1999; HOLM et al., 2004).

Aeromonas hydrophila foi o patogeno predominante, com 20 isolados identificados (Tabela 1). Aeromonas hydrophila e um microrganismo de potencial patogenico emergente que causa infeccoes gastrintestinais (MERINO et al. 1995; DASKALOV, 2006). Esse microrganismo e frequentemente encontrado na agua (DASKALOV, 2006) e assim a agua utilizada na limpeza de utensilios e equipamentos pode ser fonte importante de contaminacao do leite e produtos lacteos.

Os generos/especies patogenicos: Acinetobacter, Pantoea, Burkholderia cepacea (anteriormente Pseudomonas) e Klebsiella oxytoca tambem incluiram 10 ou mais isolados. A ocorrencia dessa diversidade de especies patogenicas e preocupante e estudos devem ser direcionados para a sua rastreabilidade por meio de sistemas acurados de identificacao genotipica.

As bacterias gram-positivas foram identificadas a especie quando o programa APILAB PLUS indicou identidade >80,0% e a genero quando indicou "boa identificacao para genero". Dos 58 isolados, apenas 22 foram identificados, sendo estes pertencentes aos generos Kurtia, Bacillus, Brevibacterium, Cellum/Microbacterium e Staphylococcus. A nao identificacao dos varios isolados pode ser atribuida ao numero insuficiente de testes na galeria API e a limitacoes da base de dados do programa APILAB PLUS.

ALATOSSAVA & ALATOSSAVA (2006), ao utilizarem o sistema API 20 NE para identificar 67 bacterias isoladas de leite cru, obtiveram para 29 isolados identificacao "duvidosa", "baixa discriminacao" ou "inaceitavel" e dois isolados nao puderam ser identificados. Devido a limitacao de identificacao destes sistemas bioquimicos, deve-se considerar sua confirmacao por caracterizacao genotipica.

Bacterias gram-negativas, particularmente Pseudomonas spp., sao os principais responsaveis pela deterioracao de leite refrigerado. Como esperado, a maioria das Pseudomonas apresentou atividade enzimatica extracelular (Tabela 2). Todas P. fluorescens foram lipoliticas a 4[grados]C, 7[grados]C, 10[grados]C e 21[grados]C, sendo que a atividade proteolitica a estas temperaturas foi verificada, respectivamente, em 66%, 74,5%, 88,3% e 95,7% das estirpes. Do total de 108 Pseudomonas spp., 60,57% apresentaram as duas atividades de proteolise e lipolise. Os tres isolados identificados como P. putida foram proteoliticos e lipoliticos. Embora P. fluorescens seja mais comumente associada a deterioracao de leite, outras especies como P. putida, P. fragi e P. maltophila sao tambem comuns (WIEDMANN et al., 2000). Os problemas ou defeitos atribuidos a Pseudomonas sao rancidez, sabor amargo, sabor de fruta, geleificacao em leite UHT, instabilidade termica do leite, instabilidade do leite ao etanol, resultado falso-positivo na pesquisa por fraude de leite com soro por meio da dosagem do acido sialico e reducao no rendimento na fabricacao de queijos (CHAMPAGNE et al.,1994; SORHOUG & STEPANIK, 1999; ARCURI et al., 2004).

Os generos Acinetobacter, Aeromonas e Burkholderia, que incluem especies patogenicas, tambem evidenciaram alto potencial de deterioracao. (Tabela 2). Todas B. cepacea, a maioria dos Acinetobacter (94,9 %) e cerca de 50 % das Aeromonas apresentaram atividade lipolitica em todas as temperaturas. Quanto a proteolise, esta foi verificada para A. caviae em todas as temperaturas estudadas, para >50 % das A. hydrophila a 7[grados]C, 10[grados]C e 21[grados]C , mas para nenhuma B. cepacea.

Bacterias psicrotroficas da familia Enterobacteriaceae podem causar deterioracao em leite (BOOR & MURPHY, 2002). Dos 48 isolados, atribuidos a sete generos desta familia (Pantoea, Klebsiella, Ewingella, Hafnia, Serratia, Yersinia e Enterobacter), nenhum apresentou atividade proteolitica a 4[grados]C, seis apresentaram a 7[grados]C e dez apresentaram a 10[grados]C e 21[grados]C. Atividade lipolitica foi verificada para um isolado a 4[grados]C, cinco a 7[grados]C e nove a 10[grados]C e 21[grados]C. A atividade enzimatica desses microrganismos e especie especifica e depende da temperatura de armazenamento (ALATOSSAVA & ALATOSSAVA, 2006), como evidenciado por esses dados.

Dos 58 isolados gram-positivos, nenhum apresentou atividade proteolitica a 4[grados]C, mas cinco apresentaram atividade lipolitica a esta temperatura (Tabela 2). Ja 50 % desses microrganismos expressaram atividade proteolitica a 7[grados]C e a maioria expressou a 10[grados]C e 21[grados]C, indicando que temperaturas abaixo de 4[grados]C controlam bem a atividade proteolitica destes microrganismos. Em geral, as bacterias gram-positivas foram encontradas com menor frequencia e predominaram dentre os isolados de cinco amostras de leite.

CONCLUSAO

Os resultados obtidos demonstram o nivel de contaminacao de leite cru com bacterias psicrotroficas e que a mistura de materia-prima de diversos produtores em tanques coletivos pode aumentar os riscos de contaminacao. Alem disso, os resultados mostram que o grupo psicrotrofico inclui uma diversidade de generos bacterianos, com predominancia do genero Pseudomonas, e que em sua maioria produz proteases e/ou lipases a temperaturas de refrigeracao. Esses resultados evidenciam a necessidade de serem realizados, nas propriedades rurais, treinamento, implementacao e monitoramento continuo de boas praticas para prevenir contaminacao e crescimento microbiano no leite.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem a Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) (projeto CAG 180) e ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPq) (projeto 472436), pelo apoio financeiro. Priscilla Diniz Lima da Silva foi bolsista da CAPES.

Recebido para publicacao 28.12.07 Aprovado em 18.06.08

REFERENCIAS

ALATOSSAVA, P.M.; ALATOSSAVA, T. Phenotypic characterization of raw milk-associated psychrotrophic bacteria. Microbiological Research, v.161, p.334-346, 2006.

ARCURI, E.F. et al. Efeito do crescimento de Pseudomonas sp. proteolitica na estabilidade do leite ao etanol. In: CONGRESSO NACIONAL DE LATICINIOS, 21., Juiz de Fora, MG. Revista do ILCT v.59, n.339, p.140-144, 2004.

BARROW, G.I.; FELTHAM, R.K.A. (ed.). Cowan and Steel's manual for the identification of medical bacteria. 3.ed. Cambridge: Cambridge University, 1993. 331p.

BOOR, K.J.; MURPHY, S.C. Microbiology of market milk. In: ROBINSON, R.K. Dairy microbiology handbook. 3.ed. New York: John Wiley and Sons, 2002. p.91-122.

BRITO, M.A.V.P. et al. Identificacao de contaminantes bacterianos no leite cru de tanques de refrigeracao. In: CONGRESSO NACIONAL DE LATICINIOS, 19., 2002, Juiz de Fora, MG. Revista do ILCT, v.57, p.83-88, 2002.

BRUM, J.V.F. et al. Pesquisa de microrganismos psicrotroficos em leite cru produzido nos estados do Parana e Santa Catarina. In: CONGRESSO NACIONAL DE LATICINIOS, 21., 2004, Juiz de Fora, MG. Revista do ILCT, v.59, p.150-154, n. 339, 2004.

CHAMPAGNE, C.P. et al. Psychrotrophs in dairy products : their effects and their control. Critical Review in Food Science and Nutrition, v.34, p.1-30, 1994.

CHEN, L. et al. Detection and impact of protease and lipase activities in milk and milk powders. International Dairy Journal, v.13, p.255-275, 2003.

DASKALOV, H. The importance of Aeromonas hydrophila in food safety. Food Control, v.17, p.474-483, 2006.

FRANK, J.F. et al. Tests for groups of microrganisms. In: MARSHALL, R.T. (Ed.). Standard methods for the examination of dairy products. 16.ed. Washington: American Public Health Association, 1992. p.271-286.

HOLM, L.J. et al. Predominant microflora of downgraded danish bulk tank milk. Journal of Dairy Science, v.87, p.1151-1157, 2004.

JAYARAO, B.M.; WANG, L. A study on the prevalence of Gram-negative bacteria in bulk tank milk. Journal of Dairy Science, v.88, p.2620-2624, 1999.

MERINO, S. et al. Emerging pathogens: Aeromonas spp. Food microbiology, v.28, p.157-168, 1995.

PINTO, C.L.O. et al. Qualidade microbiologica de leite cru refrigerado e isolamento de bacterias psicrotroficas proteoliticas. Ciencia e Tecnologia de Alimentos, v.26, n.3, p.645-651, 2006.

SHAH, N.P. Psychrotrophs in milk: a review. Milchwissenschaft, v.49, p.432-437, 1994.

SORHOUG, T.; STEPANIAK, L. Psychrotrophs and their enzymes in milk and dairy products: quality aspects. Trends in Food Science and Technology, Cambridge, v.8, p.35-41, 1997.

SOUZA, M.R. et al. Avaliacao da qualidade do leite resfriado, estocado em propriedades rurais por 48 horas e recebido por uma industria de laticinios. In: CONGRESSO NACIONAL DE LATICINIOS, 16., 1999, Juiz de Fora, MG. Revista do ILCT, v.54, p.238-241, 1999.

WIEDMANN, M. et al. Molecular and phenotypic characterization of Pseudomonas spp. isolated from milk. Applied and Environmental Microbiology, v.66, p.2085-2095, 2000.

Edna Froeder Arcuri (I) * Priscilla Diniz Lima da Silva (II) Maria Aparecida Vasconcelos Paiva Brito (I) Jose Renaldi Feitosa Brito (I) Carla Christine Lange (I) Margarida Maria dos Anjos Magalhaes (II)

(I) Embrapa Gado de Leite. Rua Eugenio do Nascimento, 610, Bairro Dom Bosco, 36038-330, Juiz de Fora, MG, Brasil. E-mail: edna@cnpgl.embrapa.br. * Autor para correspondencia.

(II) Departamento de Engenharia Quimica, Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN), 59072-970, Campus Universitario, Natal, RN, Brasil.
Tabela 1 - Identificacao das bacterias Gram-negativas e Gram-positivas
utilizando os sistemas de identificacao API e testes bioquimicos.

                                      Numero de      % Identificacao
Genero/Especie                         estirpes        sistema API

Bacterias Gram-negativas (250)
Pseudomonas fluorescens                   94           98,6 -99,9
Pseudomonas putida                         3           99,1
Pseudomonas spp.                          11           82,3 -99,4
Acinetobacter spp.                        39           78,9-91,9
Aeromonas hydrophila                      20           92,9 - 99.9
Aeromonas caviae                           1           98,9
Aeromonas sobria                           1           83,8
Aeromonas spp.                             5           85,9-99,9
Pantoea spp.                              17           * - 99,9
Bukholderia cepacea                       12           99,9
Klebsiella oxytoca                        10           97,4
Klebsiella sp.                             1           *
Hafnia alvei                               7           99,9
Erwingella americana                       7           92,9 -98,2
Moraxella spp.                             4           82,2
Chryseomonas luteola                       3           97,8 - 99,8
Serratia spp.                              3           * -99,4
Yersinia spp.                              2           95,7
Enterobacter sp.                           1           *
Alcaligenes faecalis                       1           96,6
Pasteurella sp.                            1           99,3
Sphingomonas paucimobilis                  1           99,8
Methylobacterium sp.                       1           88,2
Nao identificados                          5
Bacterias Gram-positivas (58)
Kurthia spp.                               7           *
Bacillus sp.                               1           *
Bacillus coagulans                         1           99,2
Bacillus lentus                            2           99,1
Brevibacterium sp.                         1           96,2
Cellum/Microbacterium                      6           99,9
Staphylococcus spp.                        3           91,9 - 97,4
Nao identificada                          37

* Boa identificacao para o genero, segundo o APILAB Plus v.3.3.3
(bioMerieux).

Tabela 2 - Atividade enzimatica de bacterias Gram-negativas e Gram-
positivas nas temperaturas de 4[grados]C, 7[grados]C, 10[grados]C e
21[grados]C.

                                        No de estirpes positivas
                                           (producao de halo)

                                               Proteolise
Genero ou especie
(numero de amostras)                   4[grados]C       7[grados]C

Bacterias Gram-negativas (250)
Pseudomonas fluorescens (94)               62               70
Pseudomonas putida (3)                      3                3
Pseudomonas spp. (11)                       2                4
Acinetobacter spp. (39)                     0                4
Aeromonas hydrophila (20)                   1               10
Aeromonas caviae (1)                        1                1
Aeromonas sobria (1)                        0                0
Aeromonas spp. (5)                          0                1
Pantoea spp. (17)                           0                0
Burkhol. Cepacia (12)                       0                0
Klebsiella oxytoca (10)                     0                3
Klebsiella sp.(1)                           0                1
Ewingella americana (7)                     0                0
Hafnia Alvei (7)                            0                0
Moraxella spp. (4)                          0                0
Chryseomonas luteola (3)                    2                2
Serratia spp. (3)                           0                0
Yersinia spp. (2)                           0                2
Enterobacter sp. (1)                        0                0
Methylobacterium sp. (1)                    0                0
Alcaligenes faecalis (1)                    0                0
Pasteurella sp. (1)                         0                0
Sphingomonas Paucimobilis (1)               0                0
Nao identificado (5)                        0                0
Bacterias Gram-positivas (58)
Kurtia spp. (7)                             0                0
Bacillus coagulans (1)                      0                1
Bacillus lentus (2)                         0                2
Bacillus sp (1)                             0                0
Brevibacterium (1)                          0                1
Cellum/Microbacterium (6)                   0                6
Staphylococcus spp. (3)                     0                0
Nao identificados (37)                      0               19
Total (308)                                71              130

                                        No de estirpes positivas
                                           (producao de halo)

                                               Proteolise
Genero ou especie
(numero de amostras)                   10[grados]C      21[grados]C

Bacterias Gram-negativas (250)
Pseudomonas fluorescens (94)               83               90
Pseudomonas putida (3)                      3                3
Pseudomonas spp. (11)                       5                3
Acinetobacter spp. (39)                     4                1
Aeromonas hydrophila (20)                  14               14
Aeromonas caviae (1)                        1                1
Aeromonas sobria (1)                        1                1
Aeromonas spp. (5)                          5                5
Pantoea spp. (17)                           1                1
Burkhol. Cepacia (12)                       0                0
Klebsiella oxytoca (10)                     3                3
Klebsiella sp.(1)                           1                1
Ewingella americana (7)                     1                1
Hafnia Alvei (7)                            0                0
Moraxella spp. (4)                          0                0
Chryseomonas luteola (3)                    1                2
Serratia spp. (3)                           2                1
Yersinia spp. (2)                           2                2
Enterobacter sp. (1)                        0                0
Methylobacterium sp. (1)                    0                0
Alcaligenes faecalis (1)                    0                0
Pasteurella sp. (1)                         0                1
Sphingomonas Paucimobilis (1)               0                0
Nao identificado (5)                        1                2
Bacterias Gram-positivas (58)
Kurtia spp. (7)                             0                0
Bacillus coagulans (1)                      1                1
Bacillus lentus (2)                         2                2
Bacillus sp (1)                             1                0
Brevibacterium (1)                          1                1
Cellum/Microbacterium (6)                   6                6
Staphylococcus spp. (3)                     0                0
Nao identificados (37)                     29               27
Total (308)                               168              168

                                        No de estirpes positivas
                                           (producao de halo)

                                               Lipolise
Genero ou especie
(numero de amostras)                   4[grados]C       7[grados]C

Bacterias Gram-negativas (250)
Pseudomonas fluorescens (94)               94               94
Pseudomonas putida (3)                      3                3
Pseudomonas spp. (11)                       8               10
Acinetobacter spp. (39)                    37               37
Aeromonas hydrophila (20)                  10               11
Aeromonas caviae (1)                        1                1
Aeromonas sobria (1)                        0                0
Aeromonas spp. (5)                          2                3
Pantoea spp. (17)                           0                1
Burkhol. Cepacia (12)                      12               12
Klebsiella oxytoca (10)                     0                1
Klebsiella sp.(1)                           1                1
Ewingella americana (7)                     0                0
Hafnia Alvei (7)                            0                0
Moraxella spp. (4)                          4                4
Chryseomonas luteola (3)                    2                2
Serratia spp. (3)                           0                0
Yersinia spp. (2)                           0                2
Enterobacter sp. (1)                        0                0
Methylobacterium sp. (1)                    1                1
Alcaligenes faecalis (1)                    1                1
Pasteurella sp. (1)                         1                1
Sphingomonas Paucimobilis (1)               0                0
Nao identificado (5)                        4                5
Bacterias Gram-positivas (58)
Kurtia spp. (7)                             0                0
Bacillus coagulans (1)                      0                0
Bacillus lentus (2)                         0                0
Bacillus sp (1)                             0                0
Brevibacterium (1)                          0                0
Cellum/Microbacterium (6)                   0                0
Staphylococcus spp. (3)                     0                0
Nao identificados (37)                      5                6
Total (308)                               186              196

                                        No de estirpes positivas
                                           (producao de halo)

                                               Lipolise
Genero ou especie
(numero de amostras)                   10[grados]C      21[grados]C

Bacterias Gram-negativas (250)
Pseudomonas fluorescens (94)               94               94
Pseudomonas putida (3)                      3                3
Pseudomonas spp. (11)                       9                9
Acinetobacter spp. (39)                    29               37
Aeromonas hydrophila (20)                  10               11
Aeromonas caviae (1)                        1                1
Aeromonas sobria (1)                        1                1
Aeromonas spp. (5)                          3                3
Pantoea spp. (17)                           4                4
Burkhol. Cepacia (12)                       9               12
Klebsiella oxytoca (10)                     1                1
Klebsiella sp.(1)                           1                1
Ewingella americana (7)                     0                0
Hafnia Alvei (7)                            0                0
Moraxella spp. (4)                          2                4
Chryseomonas luteola (3)                    2                1
Serratia spp. (3)                           2                1
Yersinia spp. (2)                           2                2
Enterobacter sp. (1)                        0                0
Methylobacterium sp. (1)                    1                1
Alcaligenes faecalis (1)                    1                1
Pasteurella sp. (1)                         1                1
Sphingomonas Paucimobilis (1)               1                1
Nao identificado (5)                        5                5
Bacterias Gram-positivas (58)
Kurtia spp. (7)                             0                0
Bacillus coagulans (1)                      0                0
Bacillus lentus (2)                         0                0
Bacillus sp (1)                             1                1
Brevibacterium (1)                          0                0
Cellum/Microbacterium (6)                   0                0
Staphylococcus spp. (3)                     0                0
Nao identificados (37)                     13               21
Total (308)                               196              216
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Author:Froeder Arcuri, Edna; Lima da Silva, Priscilla Diniz; Aparecida Vasconcelos Paiva Brito, Maria; Feit
Publication:Ciencia Rural
Date:Nov 1, 2008
Words:3787
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