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Coccidioidomicosis sistemica en canino: estudio radiologico y anatomopatologico de un caso.

RESUMEN

Un paciente canino hembra de tres anos de edad y 20 kg de peso fue referido al servicio de diagnostico radiologico y anatomopatologico en la Policlinica Veterinaria de la Universidad del Zulia. El paciente referido presento signos de claudicacion y dolor a la palpacion de las articulaciones del codo de ambos miembros anteriores. El estudio radiologico revelo cambios osteoliticos y escleroticos en el extremo proximal del cubito y del condilo interno del humero en ambos miembros. La radiografia de cavidad toraxica revelo lesiones moderadas de espondilosis vertebral y un area densa nodular de 0,5 cm de diametro con aspecto solido e irregular en lobulo diafragmatico pulmonar. Posteriormente, el paciente fue remitido al servicio de anatomia patologica para su estudio y evaluacion. A la necropsia se observaron cambios morfologicos evidentes en organos internos y estructuras osteo-articulares. Habia engrasamiento de capsula sinovial de la articulacion del codo con proliferacion fibrosa y areas de osteolisis, el liquido sinovial era espeso y grumoso asi como la medula osea. En el pulmon derecho se encontro un area densa solida nodular de 2 cm de diametro a nivel del lobulo accesorio. El bazo tenia zonas ampulosas en la cara visceral y en el borde. La cara interna de la pared toraxica izquierda tenia algunas areas nodulares de 3-4 mm de diametro. Histopatologicamente se evidencio una reaccion inflamatoria cronica granulomatosa con infiltrado celular de macrofagos, polimorfonucleares neutrofilos, escasos linfocitos, celulas gigantes y epitelioides a nivel del tejido oseo y organos internos. Tambien se encontraron osteolisis y osteoclasis en conjunto con la presencia de estructuras redondeadas esfericas de 15-40 [my] de diametro con pared gruesa doble llenas de esferulas. Se realizaron reacciones histoquimicas especiales de Acido Peryodico de Shiff (PAS), y coloraciones de Griddley y Grocott resultando positivas al evidenciar las caracteristicas tipicas del hongo denominado Coccidioides inmitis.

Palabras clave: Coccidioidomicosis, canino, radiologia, anatomopatologico, micosis.

ABSTRACT

A radiologic and pathologic study of a 3 years old and 20 kg female dog with signs of lameness is reported. The patient was refered to the Radiology and Pathology Diagnostic Services at the Veterinary Clinic of the University of Zulia. Clinically the patient was lame and had swelling of both elbow joints of forelegs. The radiologic study showed, osteolytic changes and sclerosis of the proximal end of cubitus and internal condils of humerus in both anterior limbs. The thoraxic cavity had moderated changes on vertebrae (Spondylosis) and there was a 0.5 cm irregular solid and dense area in the caudal lobe of the lung. The animal was sent to the necropsy laboratory for postmortem examination. Grossly, there was a cronic swelling, haemorrhages and fibrosis with osteolisis of the elbow joints, the synovial fluid was dense and thick, as well as the bone marrow. The internal organs such as lung had a nodular area of 2 cm of diameter; the spleen had ampulous areas on the visceral surface. The left internal wall of thoracic cavity had some areas with nodules of 3-4 mm of diameter. The chronic granulomatous inflammatory reaction was characterized by the presence of round structures of 15-40 p of diameter with thick and double wall, filled with spherules. These structures were surrounded by inflammatory cells (macrophages, neutrophyls, linphocytes, giant and epithelioid cells) forming granulomas. The special histochemical reaction of Peryodic Acid of Shiff (PAS), and the special stain of Griddley and Grocott revealed the typical morphologic characteristics of Coccidioides inmitis.

Key words: Coccidioidomycosis, canine, radiology, pathology, mycosis.

Canine Systemic Coccidioidomycosis: Radiologic and Pathologic Study of One Case

INTRODUCCION

La Coccidioidomicosis es una entidad patologica causada por el Coccidioides inmitis, un hongo levaduriforme, que penetra a traves de los pulmones y se hace sistemico rapidamente, invadiendo tejidos y organos distantes al foco primario de infeccion [1, 2, 3, 4, 6], La enfermedad puede diseminarse frecuentemen:e por extension del foco primario pulmonar, invadiendo los nodulos linfaticos regionales, huesos, sistema nervioso central y organos parenquimatosos tales como bazo e higado [20, 21, 27, 29, 30].

La Coccidioidomicosis esta clasificada como una micosis sistemica diseminada y puede ocurrir infeccion focal pulmonar limitada [5, 8, 9], El agente causal Coccidioides inmitis es un hongo dimorfico y bifasico que esta clasificado dentro de la Subdivision: Deuteromycetos (hongos imperfectos); Clase: Ascomicetos; Genero: Coccidioides, Especie: inmitis [2, 6]. La enfermedad ha sido reportada en algunas especies domesticas como bovinos y equinos [8, 9, 16, 17, 23, 25, 29, 32], caninos [7, 10,14, 15, 18, 20, 27, 28, 31], roedores [1, 9, 17], suinos [24] y ovinos [30], asi como en animales salvajes, monos [19], llamas [11] e inclusive en el hombre [5, 30]. En caninos ha sido reportada en forma natural [7, 10, 17] y experimental [14] en diversas zonas geograficas en otros paises tales como Estados Unidos de Norteamerica (E.U.A) y Mexico. La literatura revisada no reporta casos de caninos en Venezuela.

Epidemiologicamente la enfermedad ha sido descrita y reportada como de distribucion mundial, existiendo casos referidos en Norteamerica: en los estados de California, Arizona [23] y al sudoeste de Texas. En America Central (Mexico) y en Suramerica (Argentina, Paraguay y Venezuela) tambien fue descrita [5, 7, 8, 9, 14, 18]. Existen casos humanos en areas endemicas de Europa y en Venezuela se han reportado casos en humanos en las areas secas y xerofilas de los estados Falcon, Lara y Zulia [5, 26, 31, 33, 35],

El hongo se presenta en forma saprofita en cultivos y en el medio ambiente bajo la fase micelial desarrollando artroconidias infectantes; tambien se presenta bajo la forma parasitaria en tejidos representada por un estado levaduriforme constituido por estructuras redondeadas esfericas de doble pared gruesa de 30-60 [my] de diametro. Estas estructuras estan llenas de esferulas (endosporas) en su interior [2, 3, 6]. Se han realizado estudios in vitro de los cambios citologicos, a traves de los ciclos artroconidia-hifa-artroconidia y artroconidia-esferula-endospora, demostrandose que este ultimo es iniciado por una artroconidia de nucleo grande mediante divisiones sincronicas, dando origen a endosporos uninucleados envueltos en un saco membranoso de doble pared. Los mecanismos de modificaciones morfologicas de las artroconidias en infeccion natural no estan bien establecidos a nivel de los tejidos [2, 6].

Las manifestaciones clinicas establecen que la infeccion primaria es frecuentemente pulmonar con manifestaciones de diseminacion sistemica progresiva y lesiones en otros organos y piel [3, 4, 7, 9, 10, 16, 18]. Los signos clinicos y los hallazgos radiologicos son representativos de la magnitud del dano, la extension y localizacion de la infeccion [28, 32], Debido a invasion del tejido oseo y medular (osteomielitis) las lesiones se encuentran cercanas al 50% en pacientes que tienen la forma diseminada, observandose lesiones osteoliticas y proliferativas [16]. La enfermedad se presenta con mayor frecuencia en su forma pulmonar primaria con signos de tos y disnea, siendo la infeccion cutanea poco frecuente [3, 22, 32].

El diagnostico definitivo de la enfermedad se realiza mediante examen directo del cultivo en Agar Sabouraud Dextrosa (ASD) y mediante examen histopatologico de los tejidos infectados, para demostrar la morfologia tipica del hongo [2, 3, 6, 20, 29, 30]. Las reacciones histoquimicas especiales tales como el Acido Peryodico de Shift (PAS), y los metodos de tincion de Griddley, Grocott y Gomori Nitrato de Plata (GNP) son de gran utilidad en la identificacion de la morfologia tipica del hongo [2, 3, 6], La enfermedad ha sido reportada en el hombre y animales en Venezuela y en otros paises [5, 29, 30, 31]. Se han reportado pruebas serologicas como la fijacion de complemento para determinar anticuerpos sericos con antigenos especificos (Coccidioidina) derivado de la fase micelial. Este tipo de prueba diagnostica inmunologica permite diferenciar la infeccion por Coccidioides inmitis de otras infecciones micoticas sistemicas (Blastomicosis e Histoplasmosis) [15].

MATERIALES Y METODOS

Estudio clinico

Canino hembra Doberman de 25 kg de peso y tres (3) anos de edad fue referido desde una clinica privada al Servicio de Diagnostico en la Policlinica Veterinaria, Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad del Zulia. El animal presentaba signos de claudicacion y fuerte dolor en el miembro anterior izquierdo con aumento de volumen en la articulacion del codo y diagnostico clinico de neoplasma primario oseo. Los signos vitales eran estables con temperatura corporal de 38,5[grados]C. Se practicaron examenes radiologicos y anatomopatologicos.

Examenes radiologicos

Al paciente se le realizo una evaluacion radiologica, mediante placas del area de la lesion a nivel de las articulaciones del codo de ambos miembros afectados en posicion anteroposterior y de la cavidad toraxica en posicion lateral, de acuerdo a las tecnicas rutinarias establecidas [20, 21], Se realizo la interpretacion de las imagenes radiograficas y se tomaron fotografias.

Anatomia patologica

Evaluacion macroscopica: Se realizo la tecnica rutinaria de necropsia [12] en un canino Doberman hembra, detectandose cambios morfologicos relevantes en la articulacion del codo de ambos miembros anteriores con interes de hueso y medula osea. Se observaron lesiones en bazo, higado y pulmon. Se tomaron fotografias y se recolectaron muestras de los organos lesionados para su evaluacion microscopica.

Examen microscopico: Los tejidos colectados fueron fijados en formalina neutra al 10% y procesados por las tecnicas histologicas rutinarias [13] para su evaluacion y diagnostico microscopico. Las coloraciones utilizadas fueron, Hematoxilina y Eosina (H y E), asi como la reaccion histoquimica especial de Acido Peryodico de Shiff (PAS), y los colorantes de Griddley y Grocott para hongos [2, 3, 13]. Se tomaron microfotografias de los tejidos y organos.

RESULTADOS

Evaluacion clinica y radiologica

El paciente con diagnostico clinico de probable neoplasma oseo, fue referido para evaluacion radiologica, evidenciandose en las imagenes radiograficas un proceso osteolitico y proliferativo bilateral de la articulacion del codo de ambos miembros. En la radiografia lateral del miembro anterior izquierdo, FIG. 1, se observo a nivel de la articulacion del codo, amplia zona osteolitica en la porcion proximal del cubito, involucrando el espacio articular de forma irregular y produciendo lesion de tipo periosteal, tanto en humero como en cubito y radio. Alrededor de esta lesion osteolitica se observo claramente esclerosis osea con marcado incremento en la densidad del hueso cubital, notandose un aumento de los tejidos blandos adyacentes. En la posicion anteroposterior de la misma articulacion, FIG. 2, se logro delimitar la inflamacion de los tejidos blandos en el plano medial del miembro con presencia de calcificacion circunscrita en el area proximal y diafisiaria del miembro. En esta posicion anteroposterior se observo notable destruccion osea del cubito en sus zonas proximal y medial.

En la radiografia lateral de la articulacion humero-radiocubital del miembro anterior derecho, FIG. 3, se observo una lesion osteolitica a nivel de la extremidad distal del humero, con reaccion periosteal de esclerosis osea, similar a la del miembro izquierdo. En este miembro derecho, la reaccion inflamatoria fue menos pronunciada. En el mismo, la imagen radiografica en posicion anteroposterior permitio evidenciar la lesion en ubicacion medial, involucrando el epicondilo interno del humero. El estudio radiografico evidencio en ambos miembros, atrofia muscular proximal a las articulaciones del codo, siendo mas afectado el miembro izquierdo.

La imagen de la radiografia lateral del torax, FIG.4, permitio evidenciar incremento en el patron intersticial y bronquial en los lobulos diafragmaticos del pulmon. La vena cava posterior se observo muy disminuida en su diametro. Entre el diafragma y el borde posterior del corazon donde se ubica el lobulo pulmonar accesorio, se observo un area densa nodular de caracteristicas irregulares que podria representar una lesion parecida a la descrita en los miembros.

Anatomia patologica

Evaluacion macroscopica: La diseccion anatomica y evaluacion macroscopica del cadaver revelo engrasamiento de la capsula articular del codo izquierdo con hemorragias de la superficie articular de la cabeza humeral y proliferacion severa de tejido conectivo fibroso. El liquido sinovial era denso, espeso y grumoso al igual que la medula osea. A nivel sistemico se detectaron cambios relevantes tales como, formaciones ampulosas en superficie visceral del bazo y fibrosis en cara visceral del higado, FIG. 5. El corazon presento en la base del musculo papilar del ventriculo derecho, una formacion nodular de 1 cm de diametro, y a nivel de la cara interna de la pared toraxica habia algunas formaciones nodulares blanquecinas de 3-4 mm de diametro, de consistencia firme. En la cara visceral del lobulo pulmonar accesorio habia un area nodular de 5 cm de diametro aproximadamente y nodulos de menor tamano y aspecto similar en los lobulos diafragmaticos, FIG. 6.

Examen microscopico: La evaluacion microscopica de los especimenes recolectados y procesados revelo la presencia de una reaccion tisular inflamatoria cronica y granulomatosa, con fibrosis marcada e infiltrado de macrofagos, linfocitos escasos, polimorfonucleares neutrofilos, celulas gigantes multinucleadas y celulas epitelioides, ademas de necrosis a nivel del tejido oseo (oncosis) y en medula osea, FIG. 7, bazo, FIG. 8 y pulmon, FIG. 9. En el seno del proceso inflamatorio se observaron estructuras redondeadas de 15-40 [my] de diametro, con doble pared y esferulas internas, FIG. 10. La morfologia tipica caracteristica del hongo fue evidenciada mediante las coloraciones de Griddley y Grocott, FIGS. 9, 10 y 12, asi como tambien, con la reaccion histoquimica de PAS, FIG. 11.

DISCUSION

La Coccidioidomicosis es una enfermedad de naturaleza micotica reportada en Venezuela en forma esporadica en el hombre y los animales domesticos [29, 30, 34, 35], En 1968 se diagnostico un caso natural en bovino mediante estudios clinicos e histopatologicos, demostrando las esferulas y endosporas tipicas del hongo [29]. Desde entonces y hasta el presente, solo se ha diagnosticado este nuevo caso de infeccion natural en canino, a traves del Servicio de Diagnostico Anatomopatologico de la Policlinica Veterinaria Universitaria de LUZ. La enfermedad se ha reportado en humanos, en zonas secas xerofilas como la alta Guajira en el estado Zulia y en el estado Falcon [31, 34, 35], Esto concuerda con algunos reportes publicados en otros paises [23].

Los hallazgos radiograficos son compatibles con lesiones producidas en otras micosis profundas sistemicas a nivel de sistema cardiopulmonar y esqueletico, asi como en casos de tuberculosis pulmonar diseminada. En el caso reportado en el presente trabajo las lesiones observadas eran debidas al Coccidioides inmitis, el cual fue demostrado por los estudios histopatologicos. Esto concuerda asi mismo, con estudios realizados en E.U.A. [11], donde se reportaron varios casos en Llamas a traves de estudios histopatologicos y micologicos, asi como en otras especies [13, 16].

Existen reportes de infeccion experimental [14] y diseminacion sistemica en caninos y otras especies [7, 9, 11, 24, 25, 27], pero de acuerdo a la literatura revisada, no se han reportado casos de infeccion natural diseminada en caninos de Venezuela. En el presente trabajo se reporta el primer caso de Coccidioidomicosis sistemica en el pais como infeccion natural en caninos y se demuestra el agente etiologico mediante cortes histologicos con coloraciones y reacciones especiales en varios tejidos, lo cual concuerda con otros autores [2, 3, 6, 9, 11, 13, 16].

CONCLUSIONES

Se reporta el primer caso de Coccidioidomicosis sistemica en canino en Venezuela. Se concluye que las tecnicas de diagnostico histopatologico utilizadas son de gran valor para diferenciar entidades patologicas con lesiones similares y de diferente naturaleza etiologica, tales como: procesos neoplasicos diseminados, Tuberculosis y otras micosis sistemicas (Histoplasmosis, Criptococosis). Las caracteristicas morfologicas tipicas del hongo levaduriforme, en su fase patogena a nivel tisular, en forma diseminada en varios organos, permiten concluir en la identificacion del agente causal Coccidioides inmitis. En el presente estudio se demuestra la infeccion primaria pulmonar y su ulterior diseminacion sistemica. El desarrollo de pruebas serologicas para el diagnostico de la enfermedad en sus estados iniciales sera de relevancia para la diferenciacion de otros procesos de naturaleza micotica sistemicas.

RECOMENDACIONES

Aplicar los metodos histotecnicos usados para la identificacion definitiva del microorganismo y establecer el diagnostico etiologico definitivo.

Continuar la linea de investigacion sobre las entidades patologicas de origen micotico en caninos.

Profundizar en el estudio ultraestructural del agente etiologico a fin de dilucidar su efecto patogeno en las especies susceptibles.

Realizar ensayos experimentales controlados, con el fin de estudiar las vias de penetracion del agente etiologico.

Establecer tecnicas de toma de biopsias para estudio micologico e histopatologico en casos sospechosos.

Realizar pruebas serologicas en casos sospechosos, para controlar su posible diseminacion al hombre (Zoonosis).

Recibido: 14 / 04 / 98. Aceptado: 31 / 07 / 98.

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Oswaldo E. Vale Echeto (1), Manuel S. Alvarado Morillo (2), Edgar E. Fernandez Orozco (1), Jesus E. Camacho Bracho (1) y Carlos Delgado (3)

(1) Catedra de Anatomia Patologica. (2) Catedra de Radiologia, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad del Zulia Apartado 15252. Maracaibo 4005-A, Edo. Zulia, Venezuela. (3) Clinica Privada, Maracaibo

Leyenda: FIGURA 1. RADIOGRAFIA LATERAL DEL MIEMBRO ANTERIOR IZQUIERDO. NOTE LESION PERIOSTEAL EN HUMERO, CUBITO Y RADIO (A). OBSERVE OSTEOLISIS Y ESCLEROSIS OSEA (B).

Leyenda: FIGURA 2. POSICION ANTERO-POSTERIOR DE LA ARTICULACION DEL CODO IZQUIERDO. NOTE CALCIFICACION CIRCUNSCRITA Y DESTRUCCION OSEA DEL CUBITO (A).

Leyenda: FIGURA 3. RADIOGRAFIA LATERAL DE LA ARTICULACION HUMERO-RADIO-CUBITAL DEL MIEMBRO ANTERIOR DERECHO. NOTE LESION OSTEOLITICA EN PORCION DISTAL DEL HUMERO (A) CON REACCION TISULAR PERIOSTEAL Y ESCLEROSIS (B).

Leyenda: FIGURA 4. RADIOGRAFIA LATERAL DEL TORAX. OBSERVE INCREMENTO DEL PATRON INTERSTICIAL Y BRONQUIAL EN LOBULOS DIAFRAGMATICOS DEL PULMON (A). VENA CAVA POSTERIOR CON LUMEN REDUCIDO (B). NOTESE UN AREA DENSA IRREGULAR FOCAL A NIVEL DEL BORDE POSTERIOR DEL CORAZON (FLECHA).

Leyenda: FIGURA 5. ASPECTO MACROSCOPICO DE BAZO E HIGADO. OBSERVE FORMACIONES AMPULOSAS EN SUPERFICIE VISCERAL DEL BAZO (A), Y FIBROSIS EN EL HIGADO.

Leyenda: FIGURA 6. ASPECTO MACROSCOPICO DE PULMON. OBSERVE AREA NODULAR EN CARA VISCERAL DEL LOBULO ACCESORIO (A), Y PEQUENOS NODULOS EN LOBULOS DIAFRAGMATICOS (B).

Leyenda: FIGURA 7. MICROFOTOGRAFIA DE MEDULA OSEA. OBSERVE LAS FORMACIONES REDONDEADAS DEL HONGO (A) Y EL INFILTRADO DE CELULAS INFLAMATORIAS Y NECROSIS (FLECHAS). H Y E. X 40.

Leyenda: FIGURA 8. MICROFOTOGRAFIA DE BAZO. NOTESE LA REACION INFLAMATORIA (A) Y AGENTE ETIOLOGICO (B). H Y E. X 40.

Leyenda: FIGURA 9. MICROFOTOGRAFIA DE PULMON. OBSERVE LAS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DEL HONGO Coccidioides inmitis (A) Y ESFERULAS (B). GROCOTT. 40X.

Leyenda: FIGURA 10. MICROFOTOGRAFIA DE BAZO. OBSERVE ESTRUCTURAS REDONDEADAS DE DOBLE PARED Y ESFERULAS INTERNAS (FLECHAS). GRIDDLEY. 40X.

Leyenda: FIGURA 11. MICROFOTOGRAFIA DE BAZO. NOTE LA MORFOLOGIA TIPICA DEL HONGO EN SU FASE HISTICA CON ESFERULAS INTERNAS (A Y B). PAS. 40X.

Leyenda: FIGURA 12. MICROFOTOGRAFIA DE BAZO. OBSERVE LAS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS QUE EVIDENCIAN EL HONGO Coccidioides inmitis (A). GROCOTT. 40X.
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Author:Vale Echeto, Oswaldo E.; Alvarado Morillo, Manuel S.; Fernandez Orozco, Edgar E.; Camacho Bracho, Je
Publication:Revista Cientifica de la Facultad de Ciencias Veterinarias
Date:Jul 1, 1999
Words:4195
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