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Aislamiento e identificacion de microorganismos entericos en muestras ambientales y cloacales en Crocodylus intermedius y Testudines de la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco en Villavicencio, Colombia.

ISOLATION AND IDENTIFICATION OF ENTERIC MICROORGANISMS IN ENVIRONMENTAL AND CLOACAE SAMPLES OF Crocodylus intermedius AND Testudines IN THE ESTACION DE BIOLOGIA TROPICAL ROBERTO FRANCO, VILLAVICENCIO, COLOMBIA

INTRODUCCION

La Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco (EBTRF), adscrita a la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional de Colombia, ubicada en la ciudad de Villavicencio, es el centro de recuperacion de especies silvestres en via de extincion mas importante en el pais; es una entidad encaminada al cuidado y la recuperacion principalmente de ejemplares de Crocodylus intermedius (Caiman Llanero) y Testudines, llevando a cabo investigaciones en el ambito sanitario, nutricional y reproductivo, lo cual permitira en un futuro cercano la repoblacion de estos ejemplares en su habitat natural (1).

Las condiciones propias del manejo ex situ de la fauna silvestre pueden, en determinadas situaciones, favorecer la susceptibilidad de los ejemplares a patologias causadas por bacterias oportunistas que pueden potencializar su poder patogeno hasta colonizar diferentes tejidos u organos generando cuadros de enfermedad; esto es facilmente explicable por situaciones como el estres a causa del cautiverio, fluctuaciones en la temperatura medioambiental, numero de microorganismos presentes, edad y estado nutricional del individuo (2, 3, 4). Estas patologias se expresan clinicamente por alteraciones en tejidos corporales y fluidos, induccion de edemas, ulceras, necrosis tisular, anemia, disminucion de la actividad fisica, perdida progresiva de peso, anorexia, regurgitacion, diarrea, constipacion, letargia con complicaciones importantes como coagulacion intravascular diseminada, y de manera secundaria gota articular (5, 6, 7, 8); el ejemplo mas apropiado para este tipo situacion es la colonizacion por Salmonella sp que, aunque ha sido reconocida como flora comensal intestinal en reptiles (9, 10, 11, 12), bajo condiciones de estres puede producir cuadros septicemicos. La via de entrada del microorganismo hacia el individuo es generalmente a traves del agua, el suelo o el alimento contaminado. Adicionalmente, no se puede hacer caso omiso con respecto a la presencia de estos enteropatogenos debido a sus implicaciones en la salud publica de la Estacion.

Dado que la EBTRF investiga y pretende salvar de la extincion especies representativas de la fauna colombiana, es fundamental el conocimiento de la microbiologia enterica normal de estas especies para documentar y apoyar el proceso diagnostico facilitando el manejo medico de diversas patologias, lo que fortalecera los programas de conservacion (13). Hasta el momento, paises como Estados Unidos, Costa Rica, Mexico, Alemania, Reino Unido, Belgica y Espana, entre otros, han realizado estudios similares al presente en serpientes (Vipera aspis, Python curtus, Boa constrictor), tortugas (Trachemys scripta elegans, Trachemys scripta scripta, Testudo graeca) y lagartos exoticos (Cnemidophorus lemniscatus, Ameiva ameiva, Basiliscus basiliscus) (6, 7, 8, 14, 15, 16, 17). Cabe resaltar que este estudio es la primera descripcion microbiologica de tracto enterico realizada hasta la fecha en ejemplares de Crocodylus intermedius en Colombia y en paises de la cuenca de la Orinoquia que comparten esta especie.

Este trabajo pretendio definir con la mayor precision analitica disponible la flora bacteriana enterica en los ejemplares de Crocodylus intermedius y Testudines mantenidos ex situ en la EBTRF. Mediante el uso de pruebas microbiologicas estandar se llevo a cabo el aislamiento y la identificacion de los microorganismos entericos a partir de muestras de hisopados cloacales y de agua / sedimento y arena / materia fecal hallada en los estanques donde se encuentran los ejemplares, de esta manera fue posible establecer los generos de microorganismos entericos que predominan en dichas especies. Adicionalmente, de acuerdo con los hallazgos especialmente frente a Salmonella, se interpreto el potencial riesgo zoonotico de tipo laboral, y se logro por otra parte dar un aporte en la promocion de la conservacion de la fauna nativa que se encuentra en peligro de extincion (18, 19).

MATERIALES Y METODOS

Area de estudio

Esta investigacion se llevo a cabo en La Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco (EBTRF) ubicada en la ciudad de Villavicencio, Meta, centro de investigacion de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogota. Las condiciones climaticas muestran un regimen de lluvias unimodal con una precipitacion media anual de 4085 mm, temperatura promedio de 27[grados] C, y una humedad relativa de 77,8% (20).

La Estacion cuenta actualmente con un numero mayor a 200 ejemplares de Crocodylus intermedius distribuidos en diferentes grupos etarios donde sobresalen los neonatos y juveniles (80%) reflejando el exito de las investigaciones en el area reproductiva; adicionalmente, la Estacion posee una coleccion viva que supera los 300 ejemplares de tortugas terrestres nativas del pais, distribuidas en mas de 20 especies.

Poblacion muestral

El muestreo se realizo sobre la totalidad de estanques ([N.sub.e] =52) de la Estacion. El total de animales muestreados de forma indirecta (arena / materia fecal; agua / sedimento) es de 29 caimanes adultos (4 anos en adelante) distribuidos en 8 estanques, 118 ejemplares juveniles (3-4 anos) ubicados en 8 estanques, y 80 caimanes neonatos (1-2 anos) distribuidos en 9 estanques. Los ~300 ejemplares del Orden Testudinea se encontraban distribuidos en 27 estanques en cada uno de los cuales se encuentran animales de diferentes especies algunas de ellas en peligro de extincion.

Obtencion de muestras

Se realizaron tres muestreos con una diferencia aproximada de 15 dias entre cada uno.

hisopado cloacal

Crocodylus intermedius neonatos: se introdujo a traves de la cloaca un hisopo esteril y se realizaron movimientos suaves de rotacion sobre la mucosa; inmediatamente el hisopo se deposito en una bolsa de cierre hermetico, a la cual, previamente se le incorporaron 10 ml de caldo lactosado 2% esteril, con el fin de evitar la deshidratacion y contaminacion de la muestra (10, 12, 14). Se muestreo aleatoriamente el 25% de los ejemplares neonatos (menores de 1 ano) encontrados en cada estanque.

Testudines: se evaluo el 25% de la poblacion presente en cada estanque empleando el mismo criterio de muestreo usado para los caimanes neonatos.

Muestreo de agua y sedimento de los estanques

Crocodylus intermedius neonatos y Testudines ([n.sub.e] =36): se homogeneizo el agua de los estanques y posteriormente, con ayuda de una jeringa esteril de 50 cc conectada a una sonda esteril de 50 cm de longitud, se realizo aspirado del fondo del estanque obteniendo una muestra total de 250 ml de agua y sedimento, esta se deposito en bolsas de cierre hermetico. Se empleo una jeringa y una sonda por cada estanque.

Crocodylus intermedius adultos y juveniles: directamente de los sistemas de evacuacion y desague de los respectivos estanques ([n.sub.e] =16) se colectaron en una bolsa aproximadamente 250 ml de agua y sedimento.

Muestreo de arena y materia fecal de los estanques

Se abarco la totalidad de la playa de cada encierro, llevando a cabo un muestreo significativo en 5 puntos del terreno conformando la letra Z (21), se realizo una excavacion aproximadamente de 10 cm de profundidad y a partir de este punto se obtuvo una muestra de 250 g de arena. Adicionalmente, en caso de hallar materia fecal sobre la arena, esta se colecto de inmediato.

Conservacion y transporte de las muestras

Todas las muestras se remitieron en bolsas de cierre hermetico debidamente identificadas y se garantizo que llegaran al laboratorio de procesamiento en la ciudad de Bogota en un periodo de tiempo maximo de 6 horas (22); dichas muestras fueron transportadas en refrigeracion y se procesaron en el laboratorio de Microbiologia Veterinaria de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogota.

Fase analitica

Aislamiento: todas las muestras se cultivaron siguiendo el respectivo protocolo de aislamiento en el medio de cultivo CHROMagar [Orientacion.sup.BD[R]]; posteriormente se incubaron durante 24-48 horas a una temperatura de 37[grados] C.

Identificacion preliminar de los cultivos: el reconocimiento de los microorganismos en el CHROMagar [Orientacion.sup.BD[R]] se realizo siguiendo las especificaciones del productor (23) planteadas en la tabla 1.

RESULTADOS

Microorganismos aislados en el total de estanques de la EBTRF

Los aislamientos obtenidos en el CHROMagar [Orientacion.sup.BD[R]] fueron comparados con la guia de identificacion colorimetrica de las colonias proporcionada por el productor, y se establecio una mayor prevalencia de microorganismos gram negativos pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae, encontrandose bacterias del genero Klebsiella sp., Escherichia coli, Proteus sp. Citrobacter sp. y Salmonella sp. Adicionalmente, se identificaron microorganismos gram positivos como Staphylococcus saprophyticus y Enterococcus sp. En la figura 1 se resumen los resultados finales. Los microorganismos pertenecientes al genero Enterococcus sp. se aislaron en 31% de las muestras, seguido por las enterobacterias Eschericha coli (28%) y Klebsiella sp. (26%) donde el porcentaje de aislamientos entre una y otra no evidencia una diferencia sustancial.

Microorganismos aislados en Testudines y su habitat

En la figura 2 se puede observar el porcentaje de presentacion de los microorganismos aislados por muestra para el grupo de testudines; teniendo en cuenta que en este estudio no se realizo una diferenciacion por especie, es posible evidenciar de manera general la abundante presencia del genero Enterococcus sp. en cada una de las muestras, asi: agua / sedimento 34%, arena / materia fecal 26%, e hisopado cloacal respectivamente, 33%.

Microorganismos aislados en Crocodylus intermedius y su habitat

Los datos obtenidos para los ejemplares del orden Crocodylia se encuentran reportados en la figura 3, donde es evidente el porcentaje de presencia de cada microorganismo segun el tipo de muestra.

ANALISIS ESTADISTICO

Los datos obtenidos fueron analizados mediante estadistica descriptiva y su interpretacion se facilito con la elaboracion de tablas, histogramas y graficos, entre otros.

DISCUSION DE RESULTADOS

Poco se conoce sobre el impacto de las enfermedades infecciosas bacterianas en las poblaciones de reptiles y sobre el papel que varios microorganismos puedan desarrollar como agentes patogenos (15). Por esta razon, es necesario ampliar el conocimiento sobre esta clase de animales para comprender dichos procesos patologicos y realizar manejos medicos adecuados debido a que se reconoce que las enfermedades infecciosas son una de las principales causas de mortalidad y morbilidad en reptiles dada la inmunosupresion generada por el estado de cautiverio (24).

En la Figura 2 se puede establecer que los hallazgos concuerdan con el realizado por Sunderland y Veal (25), al predominar flora gram negativa en los aislamientos, grupo donde se encuentran incluidos los patogenos bacterianos mas comunes en los reptiles (24); sin embargo, Enterococcus sp. (gram positivo), estuvo presente en un mayor porcentaje (31%) en todas las muestras trabajadas sin importar el origen de las mismas, y aunque las bacterias gram positivas no se consideran patogenicas en reptiles por encontrarse generalmente como flora nativa natural, presentan comportamiento oportunista y pueden generar enfermedad en los individuos (24). Desde este punto de vista, muchos de los aislamientos identificados en este estudio se consideran no solo potencialmente patogenos para el hospedador sino tambien potencialmente zoonoticos, tal como lo son Citrobacter sp., E. coli y Salmonella sp (6, 26, 27).

Por otra parte, en la figura 3 es posible observar el porcentaje de recuperacion de los microorganismos en las muestras de agua / sedimento y arena / materia fecal respectivamente en los estanques de Testudines muestreados, y se puede notar que en estos dos tipos de muestra evaluados hubo una mayor prevalencia de microorganismos del genero Enterococcus sp (32%), Eschericha coli (28%) y Klebsiella sp (26%); sin embargo, se observa que en las muestras de agua / sedimento se recuperaron mas microorganismos que en las de arena / materia fecal, aunque los porcentajes de presentacion no variaron significativamente entre las muestras. Adicionalmente, se tuvieron en cuenta los microorganismos encontrados a partir de muestras de hisopados cloacales de animales del OrdenTestudinata, donde a su vez puede establecerse que hubo una variacion en el porcentaje de presentacion de Klebsiella sp. frente a Escherichia coli puesto que a diferencia de las otras muestras, este ultimo microorganismo se encontro en menor proporcion. Simultaneamente, se puede concluir mediante la observacion de la grafica que la recuperacion de microorganismos fue menor para este tipo de muestra.

Para los ejemplares de Orden Crocodylia, la prevalencia de los microorganismos entericos fue muy similar a los aislamientos obtenidos en Testudines; sin embargo, tal como se puede observar en la figura 4 existe una marcada variacion en los porcentajes de microorganismos aislados a partir de agua / sedimento respecto al comportamiento presentado en las muestras de Testudines evaluadas previamente y los resultados obtenidos en arena / materia fecal e hisopado cloacal en ejemplares de caiman. Es asi como en las muestras de agua / sedimento obtenidas a partir de estanques de caiman, hubo una mayor prevalencia de microorganismos del genero Klebsiella sp. (27%) y, contrario a lo encontrado en otros tipos de muestras se obtuvo 19% de aislamientos de Enterococcus sp. La composicion y diversidad de especies de enterococos en las heces de animales silvestres parece depender sobre todo de la alimentacion y las condiciones del ambiente en el que se desarrolla el ciclo vital del hospedador; asi, los animales ex situ o de habitats periurbanos o que tienen una dieta oportunista son los que presentan una mayor diversidad de enterococos. Por el contrario, cuando existe una especializacion en un alimento o habitan en ambientes con menor influencia de la actividad humana se encuentra una menor diversidad del microorganismo (26). De igual forma, en un estudio realizado por Mundt (28), se obtuvo un 85,7% de recuperacion de Enterococcus sp. a partir de muestras fecales de reptiles, el alto porcentaje de recuperacion de estos microorganismos es interesante debido a la marcada diferencia en temperatura corporal entre reptiles y mamiferos; en consecuencia se puede decir que las bacterias aisladas, a pesar de ser mesofilas, pueden tener una adaptacion a la temperatura llegando a desarrollarse a temperaturas inferiores de lo esperado. Tambien se han aislado Citrobacter sp., Klebsiella sp. y Proteus sp., las cuales aunque son flora normal, bajo ciertas condiciones pueden llegar a producir septicemias, enterocolitis y diarreas; Escherichia coli puede generar dolor abdominal, diarrea, vomitos y fiebre; Klebsiella, presenta un comportamiento oportunista y produce enfermedades respiratorias; las principales lesiones posmortem encontradas son poliartritis, peritonitis y meningoencefalitis, las cuales se caracterizan por presentar material mucopurulento en la cavidad peritoneal y encefalica (4, 7, 26, 29); por ultimo, Citrobacter sp. ha sido implicado en enfermedades sistemicas en tortugas y alteraciones intestinales (4, 7), por ello el conocimiento de la comunidad microbiana normal en estas especies tan amenazadas permite una mayor capacidad de identificar la participacion de las bacterias en posibles procesos infecciosos y facilitar la prevencion de estas enfermedades mediante tratamientos y rutinas con desinfectantes convencionales (30, 31).

Un dato de suma importancia es el hallazgo de enterobacterias del genero Salmonella sp. dado que si bien es cierto que el microorganismo hace parte de la flora comensal de los reptiles, y que su aislamiento en Testudines de diferentes familias ha sido reportado con mayor frecuencia (12, 16, 17, 32, 33), no se puede ignorar el hecho de que para todos los individuos evaluados, las condiciones de cautiverio pueden llegar a generar cuadros de inmunosupresion marcada donde la enterobacteria es excretada de manera intermitente (9, 11, 34) llegando a producir estados patologicos caracterizados por letargia, anorexia, septicemia, pneumonia, celomitis, abscesos, shock hipovolemico y, bajo circunstancias extremas, la muerte del ejemplar (29, 35). Sin embargo, en un estudio retrospectivo (1997-2008) realizado en la EBTRF, donde se evaluaron los casos de patologias asociadas a bacterias, no se presento ningun reporte de aislamientos de Salmonella sp. tanto en ejemplares de Crocodylia como Testudinea. Otro aspecto relevante de la presencia de Salmonella sp. es su caracter zoonotico ya que los aislamientos y la clasificacion de la bacteria a partir de reptiles se han considerado como patogenos para humanos, al poseer factores de virulencia cruciales en el desarrollo de gastroenteritis (4, 17, 36).

Esta informacion demuestra la importancia de los resultados ya que en la EBTRF se ha confirmado la presencia de la enterobacteria Salmonella sp. en un porcentaje no discriminable tanto en los animales como en su habitat natural, por lo cual se han programado jornadas educativas con el fin de concientizar al personal que labora en sus instalaciones y que se encuentra en un potencial riesgo de contraer salmonelosis asociada a reptiles; debido a los resultados obtenidos en el estudio la Estacion inmediatamente reforzo las medidas de bioseguridad pertinentes y se dio inicio a la implementacion de un manual de bioseguridad con el fin prevenir todo riesgo para la poblacion humana y animal.

Es necesario conocer la particular poblacion saprofita en los reptiles debido a que cualquier causa que altere este equilibrio puede desencadenar patologias digestivas o sistemicas; sin embargo, este tipo de afecciones se encuentran condicionadas por el grado de compromiso que presente el sistema inmunologico del animal (7); tal condicion se verifica probablemente porque los sujetos inmunosuprimidos no son capaces de responder adecuadamente a una infeccion, favoreciendo asi la proliferacion masiva de bacterias presentes en individuos sanos (25, 33). Adicionalmente, hasta el momento se han realizado analisis como este en otras especies de reptiles (como serpientes y tortugas); no obstante, la informacion que se ofrece en este trabajo es la primera descripcion microbiologica realizada hasta la fecha en las especies de Crocodylus intermedius manejadas en Colombia.

La poblacion bacteriana recuperada no permite establecer o enfatizar en demasiadas consecuencias evolutivas o adaptativas sin la realizacion de estudios adicionales; por lo tanto, las investigaciones acerca de la flora bacteriana en animales silvestres son de fundamental importancia pues permiten conocer el papel que juegan estos microorganismos en las enfermedades infecciosas y como afectaran la superviviencia de las poblaciones de reptiles en las condiciones in situ dentro del equilibrio biologico de estos vertebrados. Con base en ello, el conocimiento de la microbiologia cloacal de estas especies es fundamental para diagnosticar desordenes de la flora digestiva asi como para prevenir procesos secundarios a estres e inmunosupresion; todo ello dirigido a optimizar programas de conservacion como los implementados a diario en la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco.

CONCLUSIONES

* Se logro aislar e identificar mediante el medio de cultivo CHROMagar [Orientacion.sup.BD[R]] los microorganismos entericos en muestras ambientales y cloacales de ejemplares de Testunines y Crocodylus intermedius mantenidos en cautiverio en la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco en la ciudad de Villavicencio, estableciendo una mayor prevalencia de Enterococcus sp. (31%) en todas las muestras procesadas, aunque hubo mayor presentacion de flora gram negativa en todas las muestras.

* Se comprueba que ninguna metodologia para el aislamiento de microorganismos entericos es por si sola suficientemente efectiva para la recuperacion de los mismos; de esta manera se deduce que se debe emplear mas de un tipo de muestra para obtener mayor porcentaje de resultados positivos.

* El conocimiento de la flora intestinal de este tipo de ejemplares es importante para entender los riesgos potenciales de la zoonosis en la Estacion.

* Este documento es el primer reporte sobre microbiologia enterica en ejemplares de Crocodylus intermedius en Colombia, siendo un aporte basico para los programas de reproduccion y repoblamiento de la especie.

AGRADECIMIENTOS

Al Laboratorio de Microbiologia de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia.

Agradecimiento especial a Becton Dickinson Colombia Ltda. por la dotacion de medios de cultivo, kit de identificacion y sensidiscos.

Al equipo humano de la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco por toda su colaboracion, y especialmente a su directora profesora Maria Cristina Ardila por sus aportes al trabajo.

Sugerencia: los ejemplares de la EBTRF son portadores asintomaticos de Salmonella sp, por lo cual se deben implementar medidas de control que minimicen su potencial como patogeno oportunista, desencadenando cuadros clinicos de salmonelosis. Igualmente, es necesario llevar a cabo un estudio que permita la serotipificacion de los aislamientos obtenidos y de esta forma evaluar su potencial zoonotico.

Recibido 04/08/2009 y aprobado 08/02/2010

REFERENCIAS

(1.) Ardila MC, Galvis G, Lugo M. Informe Final Proyecto Programa para la Conservacion del Caiman del Orinoco Crocodylus intermedius. Bogota: Colciencias, Universidad Nacional de Colombia; 1998.

(2.) Bejarano P. Estructura genetica de las poblaciones "ex situ" de Crocodylus intermedius en Colombia mediante marcadores AFLP'S. Bogota: Universidad Nacional de Colombia; 2001. Tesis de Grado.

(3.) Cardenas R. Evaluacion de dos sistemas de alimento formulado para el Caiman del Orinoco (Crocodylus intermedius) y babilla (Caiman crocodilui) juveniles. Bogota: Universidad Nacional de Colombia; 1994. Tesis de Grado.

(4.) Mader D. Reptile Medicine and Surgery. Phyladelphia: W.B. Saunders Company; 1996.

(5.) Jertborn M, Hagling P, Iwarson S, Svennerholm, M. Estimation of symptomatic and asymptomatic Salmonella infections. J Infect Dis 1990; 22: 451-455.

(6.) Johnson-Delaney CA. Reptile zoonoses and threats to public health (20-33). In: Mader DR (ed). Reptile Medicine and Surgery. Philadelphia: Saunders.

(7.) Martinez A, Silveira L, Mateo JA, Urioste J, Rodriguez MA, Pether J. Microbiologia cloacal en lagartos gigantes amenazados de las Islas Canarias (genero Gallota) en Cautividad. Rev Esp Herp 2003; 17: 29-37.

(8.) Monzon C, Ojeda A, Mecherta A, Usera M. Occurrence of Salmonella in cold blooded animals in Gran Canaria, Canary Islands. Antonie van Leewenhoek 1995; 68: 191-194.

(9.) Bradley T, Angulo F, Mitchell M. Public health education on Salmonella spp. and reptiles. JAVMA 2001; 754-755.

(10.) Chambers D, Hulse A. Salmonella Serovars in the Herpetofauna of Indiana County, Pennsylvania. Appl Environ Microbiol 2006: 72 (5): 3771-3773.

(11.) Ebani VV, Cerri D, Fratini F, Meille N, Val entini P, Andreani E. Salmonella enterica isolates from faeces of domestic reptiles and a study of their antimicrobial in vito sensitivity. J Vet Sci 2005; 78: 117-121.

(12.) Saelinger C, Lewbart G. Prevalence of Salmonella spp in cloacal, fecal, and gastrointestinal mucosal samples from wild North American turtles. JAVMA 2006; 229: 266-273.

(13.) Lugo LM. Cria del caiman del Orinoco (Crocodylus intermedius) en la estacion de Biologia Tropical Roberto Franco, Villavicencio, Meta. Rev Acad Col Cien 1995; 19 (4): 601-606.

(14.) Crawford G, Jackson JR, Jackson M. The Frequency of Salmonella and Arizona microorganisms in zoo turtles. Journal of Wildlife Diseases 1971; 7: 130-132.

(15.) Glazebrook JS, Campbell RSF. A survey of the diseases of marine turtles in northern Australia. II. Oceanarium-reared and wild turtles. DAO 1990; 9: 97-104.

(16.) Hidalgo J, Diaz C, Perez N, De Frutos C, Herrero A. Salmonella in free living exotic and native turtles and in pet exotic turtles from SW Spain. J Vet Sci 2008; 85: 449-452.

(17.) Pasmans F, De Herdt P, Dewulf J, Haesebrouk F. Pathogenesis of infection with Salmonella enteric subsp. enterica serovar Muenchen in the turtle Trachemys scripta scripta. Vet Mi crobiol 2002; 87: 315-325

(18.) Ministerio del Medio Ambiente. Tortugas Marinas y Continentales. Programa Nacional para la Conservacion. Direccion General de Ecosistemas; 2002.

(19.) Rodriguez M, Ramirez J. Crocodylus intermedius (caiman llanero) ex situ en la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco (EBTRF), Colombia (78-132). En: Velasco A, Colomine G, Villarroel G, Quero M. (eds). Memorias del taller para la conservacion del caiman del Orinoco (Crocodylus intermedius) en Colombia y Venezuela; 2000.

(20.) Ramirez P, Burbano C. Crocodylus intermedius (caiman Llanero) ex situ en la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco (78132). En: Velasco A, Colomine G, Villarroel G, Quero M. (eds). Memorias del Taller para la Conservacion del Caiman del Orinoco (Crocodylus intermedius) en Colombia y Venezuela. 2002.

(21.) Petersen RG, Calvin D. Methods of Soil Analysis, Part 1. 2 ed. Agronomy 2006; 9 (1): 33-51.

(22.) Luna G. Manual operativo de analisis microbiologicos para alimentos. Bogota: Fundacion Universidad de Bogota Jorge Tadeo Lozano; 1991.

(23.) Merlino J, Siarakas S, Robertson GJ, Funnel GR, Gottlieb T, Bradbury R. Evaluation of CHROMagar Orientation for differentiation and presumptive identification of Gram Negative bacilli and Enterococcus species. J Clin Microbiol 1996; 34, 1778-1793.

(24.) Rosenthal KL, Mader DR. Microbiology: fungal and bacterial diseases of reptiles - bacterial diseases. In: Mader DR (ed.). Reptile medicine and surgery. 2. ed. St. Louis: Saunders Elsevier; 2006. cap. 16, p. 227-238.

(25.) Sunderland R, Veal J. An investigation into the foecal flora of clinically healthy tortoises Testudo. J British Chel Gr 2001; 5: 23-34.

(26.) Ballesteros C. Estudio y caracterizacion de aislados de Enterococcus sp. obtenidos de aves silvestres. Madrid: Universidad Complutense; 2003. Trabajo de Grado.

(27.) Siebeling R, Neal P, Granberry D. Treatment of Salmonella -- Arizona infected turtle eggs with terramycin and chloromycetin by the temperature differential egg dip method. Appl Microbiol 1975; 30 (5): 791-799.

(28.) Mundt O. Occurrence of Enterococci in animals in a wild environment. Appl Microbiol 1963; 11.

(29.) Frye FL. Infectious diseases. Fungal actinomycete, bacterial, rickettsial and viral diseases (101-160). In: Frye FL. Biomedical and Surgical Aspects of Captive Reptile husbandry. Melbourne: Krieger; 1991.

(30.) Johnson JH, Benson PA. Laboratory reference values for a group of captive ball pythons (Python regius). AJVR 1996; 57: 1304-1307.

(31.) Mitchell J, Mc Avoy B. Enteric Bacteria in Natural Populations of Freshwater turtles in Virginia. Virg J Sci 1990; 41 (3): 233-244.

(32.) Hidalgo J, Diaz C, Jimenez C. Salmonella in free living terrestrial and aquatic turtles. Vet Microbiol 2007; 119: 311-315.

(33.) Santoro M, Orrego CM, Hernandez G. Flora bacteriana cloacal y nasal de Lepidochelis olivacea (Testudines: Cheloniidae) en el pacifico norte de Costa Rica. Rev Biol Trop 2005; 54: 43-48.

(34.) Chiodini RJ, Sundberg JP. Salmonellosis in reptiles: a review. Am J Epidemiol 1981; 113: 494-499.

(35.) Onderka DK, Finlayson MC. Salmonellae and salmonellosis in captive reptiles. Can J Comp Med 1985; 49: 268-270.

(36.) Ardila MC, Barahona P, Bonilla C, Cardenas R. Aportes al conocimiento de la reproduccion, embriologia y manejo de Crocodylus intermedius en la Estacion de Biologia Tropical Roberto Franco de Villavicencio. Rev Acad Col Cien 1999; 23: 417-424.

D. A. Pachon [1] A. P. Pulido [1] C. A. Moreno [2]

[1] Departamento de Microbiologia, Facultad de Ciencias, Pontificia Universidad Javeriana, Bogota, Colombia.

[2] Departamento de Ciencias para la Salud Animal, Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia, Universidad Nacional de Colombia, Bogota, Colombia.

(1.) pachond@javeriana.edu.co, adriana.pulido@javeriana.edu.co

(2.) aamorenotidunal.vdu.co
FIGURA 1. Microorganismos aislados en los estanques de la EBTRF

Escherichia coli      28%
Klebsiella sp.        26%
Enterococcus sp.      31%
Proteus sp.            3%
S. saprophyticus       5%
Citrobacter            1%
Salmonella sp.         6%

Nota: Tabla derivada de grafico segmentado.

FIGURA 2. Microorganismos aislados en las muestras obtenidas
a partir de Testudines en la EBTRF

                    H. CLOACAL   ARENA/M. FECAL    AGUA/SEDIMENTO

Escherichia coli       22%           33%                33%
Klebsiella sp.         26%           26%                25%
Enterococcus sp.       34%           32%                33%
Proteus sp.             4%                               2%
S. saprophyticus        4%                               2%
Citrobacter sp.         3%
Salmonella sp.          7%            2%                 5%

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

FIGURA 3. Microorganismos aislados en las muestras obtenidas
a partir de Crocodylia en la EBTRF

                     H. CLOACAL   ARENA/M. FECAL    AGUA/SEDIMENTO
                     (neonatos)

Escherichia coli       25%           27%                30%
Klebsiella sp.         27%           29%                22%
Enterococcus sp.       19%           33%                37%
Proteus sp.            13%                               2%
S. saprophyticus        3%            7%                 4%
Salmonella sp.         13%            2%                 7%

Nota: Tabla derivada de grafico de barra.

TABLA 1. Apariencia de los microorganismos en CHROMagar Orientacion
(BD)[R]

                    Apariencia de las
Microorganismo      colonias                   Pruebas confirmatorias

E. coli             Colonias rosadas,          --
                    transparentes, de tamano
                    medio con o sin halos
                    alrededor

Grupo KES *         Colonias de tamano medio   BBL Crystal E/NF, Indol
                    y pigmento azul oscuro

Grupo PMP **        Colonias beige o crema     BBL Crystal E/NF, Indol
                    redondeadas por halos
                    marron

Enterococcus        Colonias verde azul de     --
sp.                 tamano pequeno

Streptococcus       Colonias pequenas con      --
agalactiae          pigmento verde, azul
                    claro,

Staphylococcus      Colonias pequenas color    Disco de 5 ug
saprophyticus       purpura, opacas con o      novobiocina
                    sin halos

Otros (Incluyendo   Colonias sin pigmento,     Identificacion
Salmonella sp.)     color crema                bioquimica y serologica

* Klebsiella sp, Enterobacter sp y Serratia sp.

** Proteus sp., Morganella sp. Providencia sp.
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Title Annotation:Investigacion
Author:Pachon, D.A.; Pulido, A.P.; Moreno, C.A.
Publication:Revista Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia
Article Type:Report
Date:Jan 1, 2010
Words:4822
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